摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-23页 |
·鸭病毒肠炎研究概况 | 第13-18页 |
·临床症状 | 第13页 |
·病理剖检变化 | 第13-14页 |
·流行病学 | 第14页 |
·诊断 | 第14-17页 |
·鸭病毒性肠炎的防制 | 第17-18页 |
·鸭肠炎病毒研究概况 | 第18-22页 |
·DEV 的生物学特性 | 第18-19页 |
·鸭肠炎病毒分子生物学特性 | 第19-20页 |
·鸭肠炎病毒基因组结构 | 第20页 |
·鸭肠炎病毒囊膜蛋白B 的研究进展 | 第20-22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-35页 |
·材料 | 第23-26页 |
·质粒、载体、菌种及病毒株 | 第23页 |
·实验动物、细胞 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-24页 |
·主要实验器材及仪器设备 | 第24页 |
·主要溶液配制 | 第24-26页 |
·方法 | 第26-35页 |
·真核表达载体pcDNA3.1-DEV-ul27 的构建 | 第26-28页 |
·免疫原的制备 | 第28-29页 |
·小鼠的免疫程序 | 第29页 |
·间接免疫荧光检测方法的建立 | 第29-30页 |
·单克隆抗体的制备 | 第30-32页 |
·杂交瘤细胞的鉴定 | 第32页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第32-35页 |
3 结果 | 第35-49页 |
·真核表达载体的构建 | 第35-36页 |
·重组质粒pFastBacHTb-DEV-ul27 的酶切鉴定 | 第35页 |
·重组质粒pcDNA3.1-DEV-ul27 的酶切鉴定及PCR 鉴定 | 第35-36页 |
·大量提取的重组质粒pcDNA3.1-DEV-ul27 的浓度测定 | 第36页 |
·间接免疫荧光检测方法的优化 | 第36-40页 |
·鸭肠炎病毒滴度的确定 | 第36-37页 |
·间接免疫荧光检测方法的确定 | 第37-39页 |
·间接免疫荧光检测方法的应用 | 第39-40页 |
·单克隆抗体的制备 | 第40页 |
·细胞融合率 | 第40页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选结果 | 第40页 |
·杂交瘤细胞的鉴定 | 第40-42页 |
·杂交瘤细胞的染色体数目分析 | 第40-41页 |
·杂交瘤细胞稳定性测定 | 第41-42页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第42-49页 |
·单克隆抗体间接免疫荧光的鉴定 | 第42-43页 |
·单克隆抗体Ig 亚类鉴定 | 第43-44页 |
·单克隆抗体的Western blot 鉴定 | 第44-45页 |
·Dot-ELISA 检测 | 第45-46页 |
·单克隆抗体中和活性的测定 | 第46-49页 |
4 讨论 | 第49-53页 |
·单克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
·免疫原的选择 | 第49页 |
·单克隆抗体筛选方法的选择 | 第49-50页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第50-52页 |
·单克隆抗体的制备 | 第50-51页 |
·单克隆抗体的Western blot 的分析 | 第51页 |
·Dot-ELISA 检测 | 第51-52页 |
·单克隆抗体的中和活性检测 | 第52页 |
·单克隆抗体鉴定结果的综合分析 | 第52-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第63页 |