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鸭肠炎病毒糖蛋白B单克隆抗体的制备与鉴定

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
1 引言第13-23页
   ·鸭病毒肠炎研究概况第13-18页
     ·临床症状第13页
     ·病理剖检变化第13-14页
     ·流行病学第14页
     ·诊断第14-17页
     ·鸭病毒性肠炎的防制第17-18页
   ·鸭肠炎病毒研究概况第18-22页
     ·DEV 的生物学特性第18-19页
     ·鸭肠炎病毒分子生物学特性第19-20页
     ·鸭肠炎病毒基因组结构第20页
     ·鸭肠炎病毒囊膜蛋白B 的研究进展第20-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-35页
   ·材料第23-26页
     ·质粒、载体、菌种及病毒株第23页
     ·实验动物、细胞第23页
     ·主要试剂第23-24页
     ·主要实验器材及仪器设备第24页
     ·主要溶液配制第24-26页
   ·方法第26-35页
     ·真核表达载体pcDNA3.1-DEV-ul27 的构建第26-28页
     ·免疫原的制备第28-29页
     ·小鼠的免疫程序第29页
     ·间接免疫荧光检测方法的建立第29-30页
     ·单克隆抗体的制备第30-32页
     ·杂交瘤细胞的鉴定第32页
     ·单克隆抗体的鉴定第32-35页
3 结果第35-49页
   ·真核表达载体的构建第35-36页
     ·重组质粒pFastBacHTb-DEV-ul27 的酶切鉴定第35页
     ·重组质粒pcDNA3.1-DEV-ul27 的酶切鉴定及PCR 鉴定第35-36页
     ·大量提取的重组质粒pcDNA3.1-DEV-ul27 的浓度测定第36页
   ·间接免疫荧光检测方法的优化第36-40页
     ·鸭肠炎病毒滴度的确定第36-37页
     ·间接免疫荧光检测方法的确定第37-39页
     ·间接免疫荧光检测方法的应用第39-40页
   ·单克隆抗体的制备第40页
     ·细胞融合率第40页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选结果第40页
   ·杂交瘤细胞的鉴定第40-42页
     ·杂交瘤细胞的染色体数目分析第40-41页
     ·杂交瘤细胞稳定性测定第41-42页
   ·单克隆抗体的鉴定第42-49页
     ·单克隆抗体间接免疫荧光的鉴定第42-43页
     ·单克隆抗体Ig 亚类鉴定第43-44页
     ·单克隆抗体的Western blot 鉴定第44-45页
     ·Dot-ELISA 检测第45-46页
     ·单克隆抗体中和活性的测定第46-49页
4 讨论第49-53页
   ·单克隆抗体的制备第49-50页
     ·免疫原的选择第49页
     ·单克隆抗体筛选方法的选择第49-50页
   ·单克隆抗体的鉴定第50-52页
     ·单克隆抗体的制备第50-51页
     ·单克隆抗体的Western blot 的分析第51页
     ·Dot-ELISA 检测第51-52页
     ·单克隆抗体的中和活性检测第52页
   ·单克隆抗体鉴定结果的综合分析第52-53页
5 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-63页
攻读硕士期间发表的学术论文第63页

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