逆转录病毒为载体制备转基因鸡的初步研究
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-25页 |
| ·转基因家禽的研究进展 | 第8-21页 |
| ·转基因家禽生物反应器的优势 | 第8-10页 |
| ·家禽转基因制作面临的困境及可能战略 | 第10-19页 |
| ·家禽转基因的研究策略及发展趋势 | 第19-21页 |
| ·逆转录病毒载体 | 第21-25页 |
| ·逆转录病毒表达系统的构成 | 第21-22页 |
| ·逆转录病毒表达系统应用的理论依据 | 第22-23页 |
| ·逆转录表达系统的开发研究 | 第23-25页 |
| 2 逆转录病毒载体的构建及表达 | 第25-40页 |
| ·试验材料 | 第25-28页 |
| ·供试材料 | 第25页 |
| ·试验主要试剂 | 第25页 |
| ·试验主要药品的配制 | 第25-27页 |
| ·仪器设备 | 第27页 |
| ·主要试验器械的清洗与消毒 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-34页 |
| ·克隆载体的构建 | 第28-31页 |
| ·表达载体的构建 | 第31-33页 |
| ·表达载体及包装载体的大量提取 | 第33-34页 |
| ·逆转录表达载体及包装载体的浓度测定 | 第34页 |
| ·逆转录表达载体的表达 | 第34页 |
| ·试验结果 | 第34-38页 |
| ·克隆载体的鉴定与测序 | 第34-36页 |
| ·表达载体的鉴定与测序 | 第36-37页 |
| ·逆转录病毒表达载体及包装载体的浓度测定 | 第37-38页 |
| ·逆转录病毒表达载体的表达 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 3 逆转录病毒载体体内转染鸡胚原始生殖细胞 | 第40-50页 |
| ·试验材料 | 第40-41页 |
| ·供试材料 | 第40页 |
| ·试验主要试剂 | 第40页 |
| ·试验主要药品的配制 | 第40-41页 |
| ·仪器设备 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-45页 |
| ·细胞的复苏、传代与冷冻保存 | 第41页 |
| ·磷酸钙转染法制备逆转录病毒 | 第41-42页 |
| ·病毒滴度的检测 | 第42页 |
| ·逆转录病毒的浓缩 | 第42页 |
| ·鸡胚中外源基因整合的PCR检测 | 第42-43页 |
| ·鸡胚中外源基因整合的Southern杂交检测 | 第43-45页 |
| ·试验结果 | 第45-47页 |
| ·逆转录病毒的包装与滴度测定结果 | 第45-46页 |
| ·PCR检测外源基因在鸡胚中的整合 | 第46-47页 |
| ·Southern杂交检测 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 4 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
