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延边黄牛干扰素-γ基因的克隆与原核表达

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
前言第10-22页
 1 干扰素的研究背景第10-12页
   ·干扰素的起源第10页
   ·干扰素的产生及其分类第10-11页
   ·干扰素及其相应受体分布第11页
   ·干扰素的基因结构第11-12页
   ·干扰素的一些基本特性第12页
 2 干扰素的生物学活性及其作用机制第12-18页
   ·干扰素的作用机制第12-13页
   ·干扰素的生物学活性第13-18页
 3 干扰素的临床应用第18-19页
   ·抗肝纤维化第18页
   ·治疗淋巴瘤第18页
   ·慢性淋巴细胞白血病(CLL)的治疗第18-19页
   ·治疗病毒性中枢神经系统感染第19页
   ·治疗慢性丙型肝炎第19页
 4 干扰素的副作用第19页
 5 干扰素的研究状况及研究意义第19-22页
   ·干扰素的基因工程研究进展第19-20页
   ·IFN蛋白工程的研究进展第20-21页
   ·IFN的发酵和细胞工程研究进展第21页
   ·纯化和产品质量控制方面的进展第21-22页
试验研究第22-41页
 1 材料第22-23页
   ·试验原料来源第22页
   ·试验用菌种和载体第22页
   ·试剂第22页
   ·主要仪器第22-23页
   ·主要试剂的配制第23页
   ·主要培养基的配制第23页
 2 方法第23-29页
   ·引物设计与合成第23-24页
   ·脾淋巴细胞的分离和培养第24页
   ·总RNA提取第24页
   ·BoIFN-γcDNA的RT-PCR扩增第24-25页
   ·BoIFN-γ基因的克隆与鉴定第25-26页
   ·原核表达载体的构建第26-27页
   ·pET-28a(+)-BoIFN-γ的表达第27-28页
   ·融合蛋白的大量表达及可溶性分析第28页
   ·免疫印迹(Western-blotting)分析第28-29页
 3 结果第29-37页
   ·目的基因的PCR结果第29页
   ·pMD18-T-BoIFN-γ的鉴定第29页
   ·pET-28a(+)-BoIFN-γ的鉴定第29-30页
   ·pET-28a(+)-BoIFN-γ原核表达与鉴定第30页
   ·融合蛋白的大量表达和可溶性分析第30页
   ·Western-blotting鉴定第30-37页
 4 讨论第37-40页
 5 结论第40-41页
参考文献第41-45页
致谢第45-46页
作者简介第46页

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