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hTERT启动子调控的TRAIL基因诱导乳腺癌细胞凋亡作用的研究

内容提要第1-10页
英文缩写单词表第10-11页
第一篇 前言第11-25页
 第一章 人端粒酶逆转录酶HTERT 在肿瘤治疗中的研究进展第13-21页
  1 hTERT 基因和蛋白的结构第13-14页
  2 hTERT 的表达调控第14-15页
  3 hTERT 蛋白的功能第15页
   ·维持端粒长度和端粒结构第15页
   ·促进细胞增殖和生长第15页
  4 hTERT 启动子在肿瘤靶向性基因治疗中的作用第15-21页
   ·hTERT 启动子的肿瘤特异性第15-16页
   ·hTERT 启动子与自杀基因的治疗第16-17页
   ·hTERT 启动子与肿瘤的溶瘤病毒治疗第17-18页
   ·hTERT 启动子与肿瘤的抑癌基因治疗第18-21页
 第二章 TRAIL 及其受体在乳腺癌中的研究进展第21-25页
  1 TRAIL 及其受体在乳腺癌表达与预后的关系第21-22页
  2 TRAIL 与其他治疗方法联合治疗乳腺癌第22-25页
   ·TRAIL 与化疗第22-23页
   ·TRAIL 与放射治疗第23页
   ·TRAIL 与内分泌治疗第23页
   ·TRAIL 与Her-2 为靶点的靶向治疗第23-25页
第二篇 PCMV-TRAIL 及PHTERT-TRAIL 真核表达载体的构建第25-37页
 第一章 材料与方法第25-33页
  1 材料第25-26页
   ·主要试剂第25页
   ·主要仪器设备第25-26页
   ·引物第26页
  2 方法第26-33页
   ·TRAIL 基因的获取第26-27页
   ·重组载体pCMV/EGFP-TRAIL 的构建第27-29页
   ·端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子的获取第29-30页
   ·重组载体phTERT/EGFP-TRAIL 的构建第30-31页
   ·重组表达载体pCMV第31-33页
 第二章 实验结果第33-35页
  1 TRAIL 目的基因的扩增第33页
  2 重组载体pCMV/EGFP-TRAIL 的构建第33-34页
  3 端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子的获取第34页
  4 重组载体phTERT/EGFP-TRAIL 的构建第34-35页
 第三章 讨论第35-37页
第三篇 PHTERT-TRAIL 表达载体诱导乳腺癌细胞MDA-MB-231 及MDA-MB-435 凋亡作用的研究第37-75页
 第一章 材料与方法第37-47页
  1 材料第37-39页
   ·主要试剂第37-38页
   ·细胞株第38页
   ·主要仪器设备第38页
   ·主要溶液的配制第38-39页
  2 方法第39-46页
   ·乳腺癌MDA-MB-231 和MDA-MB-435 细胞的培养第39页
   ·乳腺癌MDA-MB-231 和MDA-MB-435 细胞的转染第39-40页
   ·脂质体2000 介导乳腺癌细胞转染最佳质粒/脂质体比值的确定第40页
   ·MTT 法检测细胞增殖变化第40-41页
   ·细胞凋亡检测第41-42页
   ·细胞凋亡相关因素的研究第42-46页
  3 统计学分析第46-47页
 第二章 实验结果第47-70页
  1 乳腺癌MDA-MB-231 和MDA-MB-435 细胞的转染第47-48页
  2 MTT 实验检测不同处理组对细胞增殖的抑制作用第48-49页
  3 重组载体对乳腺癌MDA-MB-231 和MDA-MB-435 细胞凋亡的影响第49-57页
   ·流式细胞技术对凋亡的检测第49-53页
   ·TUNEL 染色检测细胞凋亡第53-57页
  4 细胞凋亡相关因素的研究第57-70页
   ·RT-PCR 检测凋亡相关蛋白mRNA 表达变化第57-64页
   ·Western blot 检测凋亡相关蛋白表达变化第64-70页
 第三章 讨论第70-75页
第四篇 PHTERT-TRAIL 表达载体对人胚肺成纤维细胞WI38 诱导凋亡作用的研究第75-89页
 第一章 材料与方法第75-77页
  1 材料第75页
   ·主要试剂第75页
   ·主要仪器设备第75页
   ·主要溶液的配置第75页
   ·细胞株第75页
  2 方法第75-77页
   ·人胚肺成纤维细胞WI38 的培养第75页
   ·人胚肺成纤维细胞WI38 的转染第75-76页
   ·MTT 法检测细胞增殖变化第76页
   ·细胞凋亡检测第76页
   ·细胞凋亡相关因素的研究第76-77页
 第二章 实验结果第77-87页
  1 MTT 法检测人胚肺成纤维细胞WI38 的增殖变化第77页
  2 流式细胞技术对凋亡的检测第77-79页
  3 细胞凋亡相关因素的研究第79-87页
   ·RT-PCR 检测凋亡相关蛋白mRNA 表达变化第79-83页
   ·Western blot 检测凋亡相关蛋白表达变化第83-87页
 第三章 讨论第87-89页
第五篇 结论第89-90页
参考文献第90-99页
附录第99-101页
攻博期间发表的学术论文及其他成果第101-102页
致谢第102-103页
中文摘要第103-106页
ABSTRACT第106-108页

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