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Beclin 1及其相关基因在电离辐射诱导的自噬性细胞死亡中的作用

内容提要第1-10页
英文缩略词第10-11页
第一章 前言第11-19页
   ·自噬性死亡第11-14页
     ·概述第11-13页
     ·电离辐射与自噬性细胞死亡第13-14页
   ·BECLIN 1 基因第14-15页
     ·Beclin 1 基因的组成与定位第14页
     ·Beclin 1 基因的功能第14-15页
   ·BECLIN 1 基因与其他基因相互作用与调控第15-18页
     ·Beclin 1 与UVRAG 的相互依赖作用第15页
     ·Beclin 1 与bcl-2 的相互作用第15-16页
     ·Beclin 1 与mTOR 的关系第16页
     ·Beclin 1 基因与p53 基因第16-17页
     ·Beclin 1-PI3KⅢ 复合物与 PI3K-AKT-mTOR 复合物的关系第17-18页
     ·Beclin 1 基因与Barkor 的关系第18页
   ·BECLIN 1 基因在辐射诱导的自噬性细胞死亡中的作用第18-19页
第二章 材料与方法第19-32页
   ·材料第19-21页
     ·主要的试剂第19-20页
     ·主要仪器第20-21页
   ·细胞培养第21-22页
     ·细胞株第21页
     ·细胞培养试剂的配制第21-22页
   ·细胞模型的构建第22-25页
     ·质粒第22-23页
     ·试剂准备第23页
     ·转染步骤第23-24页
     ·感染细胞第24-25页
   ·细胞样本的处理第25页
     ·试剂的配制第25页
     ·步骤第25页
   ·蛋白质的提取第25-26页
     ·试剂的配制第25-26页
     ·细胞总蛋白的提取第26页
   ·蛋白质浓度测定第26-27页
     ·试剂的配制第26页
     ·步骤第26-27页
   ·蛋白质免疫印迹法(WESTERN BLOT)第27-29页
     ·试剂的配制第27页
     ·凝胶的制备第27-28页
     ·SDS-PAGE 电泳第28页
     ·转膜及封闭第28页
     ·抗体的杂交第28-29页
     ·暗室暴光第29页
   ·照射条件第29页
   ·细胞生长倍增时间研究第29页
   ·MTT 法第29-30页
     ·试剂配制第29页
     ·步骤第29-30页
   ·免疫细胞化学第30-31页
     ·试剂配制第30页
     ·操作步骤第30-31页
   ·统计学处理第31-32页
     ·生长曲线采用Origin 软件处理第31页
     ·倍增时间的计算采用公式第31页
     ·辐射敏感性采用Excel 软件处理第31页
     ·Westere Blot 条带采用Quantity One 软件处理第31-32页
第三章 实验结果第32-45页
   ·电离辐射对LC3 的影响第32-33页
     ·MCF7 PQN-GFP-LC3 构建第32页
     ·电离辐射对LC3 蛋白的影响第32-33页
   ·细胞模型建立及一般生物学指标检测第33-35页
     ·MCF7BeclinRi 细胞模型构建第33页
     ·细胞倍增时间检测第33-35页
     ·电离辐射后细胞存活率的变化第35页
   ·电离辐射后 Beclin、p53、p21 量效、时程变化比较分析第35-45页
     ·Beclin 1 基因在各细胞中量效表达变化第35-37页
     ·Beclin 1 基因在各细胞中时程表达变化第37-38页
     ·p53 基因在各细胞中量效表达变化第38-40页
     ·p53 基因在各细胞中时程表达变化第40-41页
     ·p21 基因在各细胞中量效表达变化第41-43页
     ·p21 基因在各细胞中时程表达变化第43-45页
第四章 讨论第45-49页
   ·电离辐射引起MCF7 细胞发生自噬性死亡第45页
   ·Beclin 1 基因沉默对细胞一般生物学指标的影响第45-46页
   ·电离辐射对 Beclin 1、p53 及 p21 基因的影响第46-47页
   ·研究展望第47-49页
第五章 结论第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
导师及作者简介第57-59页
中文摘要第59-62页
ABSTRACT第62-64页

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