内容提要 | 第1-10页 |
英文缩略词 | 第10-11页 |
第一章 前言 | 第11-19页 |
·自噬性死亡 | 第11-14页 |
·概述 | 第11-13页 |
·电离辐射与自噬性细胞死亡 | 第13-14页 |
·BECLIN 1 基因 | 第14-15页 |
·Beclin 1 基因的组成与定位 | 第14页 |
·Beclin 1 基因的功能 | 第14-15页 |
·BECLIN 1 基因与其他基因相互作用与调控 | 第15-18页 |
·Beclin 1 与UVRAG 的相互依赖作用 | 第15页 |
·Beclin 1 与bcl-2 的相互作用 | 第15-16页 |
·Beclin 1 与mTOR 的关系 | 第16页 |
·Beclin 1 基因与p53 基因 | 第16-17页 |
·Beclin 1-PI3KⅢ 复合物与 PI3K-AKT-mTOR 复合物的关系 | 第17-18页 |
·Beclin 1 基因与Barkor 的关系 | 第18页 |
·BECLIN 1 基因在辐射诱导的自噬性细胞死亡中的作用 | 第18-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-32页 |
·材料 | 第19-21页 |
·主要的试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·细胞培养 | 第21-22页 |
·细胞株 | 第21页 |
·细胞培养试剂的配制 | 第21-22页 |
·细胞模型的构建 | 第22-25页 |
·质粒 | 第22-23页 |
·试剂准备 | 第23页 |
·转染步骤 | 第23-24页 |
·感染细胞 | 第24-25页 |
·细胞样本的处理 | 第25页 |
·试剂的配制 | 第25页 |
·步骤 | 第25页 |
·蛋白质的提取 | 第25-26页 |
·试剂的配制 | 第25-26页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第26页 |
·蛋白质浓度测定 | 第26-27页 |
·试剂的配制 | 第26页 |
·步骤 | 第26-27页 |
·蛋白质免疫印迹法(WESTERN BLOT) | 第27-29页 |
·试剂的配制 | 第27页 |
·凝胶的制备 | 第27-28页 |
·SDS-PAGE 电泳 | 第28页 |
·转膜及封闭 | 第28页 |
·抗体的杂交 | 第28-29页 |
·暗室暴光 | 第29页 |
·照射条件 | 第29页 |
·细胞生长倍增时间研究 | 第29页 |
·MTT 法 | 第29-30页 |
·试剂配制 | 第29页 |
·步骤 | 第29-30页 |
·免疫细胞化学 | 第30-31页 |
·试剂配制 | 第30页 |
·操作步骤 | 第30-31页 |
·统计学处理 | 第31-32页 |
·生长曲线采用Origin 软件处理 | 第31页 |
·倍增时间的计算采用公式 | 第31页 |
·辐射敏感性采用Excel 软件处理 | 第31页 |
·Westere Blot 条带采用Quantity One 软件处理 | 第31-32页 |
第三章 实验结果 | 第32-45页 |
·电离辐射对LC3 的影响 | 第32-33页 |
·MCF7 PQN-GFP-LC3 构建 | 第32页 |
·电离辐射对LC3 蛋白的影响 | 第32-33页 |
·细胞模型建立及一般生物学指标检测 | 第33-35页 |
·MCF7BeclinRi 细胞模型构建 | 第33页 |
·细胞倍增时间检测 | 第33-35页 |
·电离辐射后细胞存活率的变化 | 第35页 |
·电离辐射后 Beclin、p53、p21 量效、时程变化比较分析 | 第35-45页 |
·Beclin 1 基因在各细胞中量效表达变化 | 第35-37页 |
·Beclin 1 基因在各细胞中时程表达变化 | 第37-38页 |
·p53 基因在各细胞中量效表达变化 | 第38-40页 |
·p53 基因在各细胞中时程表达变化 | 第40-41页 |
·p21 基因在各细胞中量效表达变化 | 第41-43页 |
·p21 基因在各细胞中时程表达变化 | 第43-45页 |
第四章 讨论 | 第45-49页 |
·电离辐射引起MCF7 细胞发生自噬性死亡 | 第45页 |
·Beclin 1 基因沉默对细胞一般生物学指标的影响 | 第45-46页 |
·电离辐射对 Beclin 1、p53 及 p21 基因的影响 | 第46-47页 |
·研究展望 | 第47-49页 |
第五章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
导师及作者简介 | 第57-59页 |
中文摘要 | 第59-62页 |
ABSTRACT | 第62-64页 |