中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-10页 |
引言 | 第10-20页 |
1 DNA 甲基化的分子生物学研究进展 | 第10-14页 |
·植物基因组中的 DNA 甲基化 | 第10-11页 |
·植物基因组中 DNA 甲基化的建立和保持 | 第11页 |
·植物基因组中 DNA 去甲基化作用 | 第11-12页 |
·DNA 甲基化的生物学功能 | 第12-14页 |
·DNA 甲基化与基因组防御 | 第12-13页 |
·DNA 甲基化与基因表达 | 第13-14页 |
2 非生物胁迫和表观遗传学 | 第14-16页 |
3 本研究的背景、目的和意义 | 第16-20页 |
材料与方法 | 第20-29页 |
1. 实验材料 | 第20页 |
2. 实验方法 | 第20-29页 |
·植物材料的重金属胁迫处理 | 第20页 |
·植物基因组 DNA 的提取与纯化 | 第20-21页 |
·Southern 杂交分析 | 第21-22页 |
·DNA 酶切 | 第21页 |
·Southern 印迹 | 第21页 |
·探针的分离 | 第21-22页 |
·探针的标记,Southern 杂交记杂交信号的检测 | 第22页 |
·亚硫酸盐测序 | 第22-25页 |
·C-T 转换试剂使用前的制备 | 第22页 |
·C-T 转换的操作过程 | 第22-23页 |
·序列的PCR 扩增及纯化和回收 | 第23-24页 |
·感受态细胞的制备,转化,α互补筛选及阳性克隆的PCR 测序 | 第24-25页 |
·植物总RNA 的提取及RT-PCR | 第25-28页 |
·植物总 RNA 的提取 | 第25页 |
·反转录 | 第25页 |
·检测总RNA 中DNA 污染是否完全去除及反转录第一链合成是否成功 | 第25-26页 |
·RT-PCR、琼脂糖电泳检测 | 第26-28页 |
·植物抗重金属能力的检测 | 第28-29页 |
结果与分析 | 第29-51页 |
1 重金属处理植株表现出明显的表型变异 | 第29页 |
2 Southern 杂交检测重金属胁迫诱导转座子和基因发生的可遗传的DNA 甲基化变异 | 第29-39页 |
·转座子和基因均发生明显的去甲基化变异,并且变异只发生在 CNG 位点 | 第29-33页 |
·自交后代中甲基化变异的模式为一代发生新的或者进一步的去甲基化变异,而二代基本可稳定遗传一代的甲基化模式 | 第33-39页 |
·正反交后代的结果证明序列特异的甲基化变异从父本遗传或者从母本遗传没有太大的差异 | 第39页 |
3 亚硫酸测序验证重金属胁迫诱导的甲基化变异 | 第39-42页 |
4 RT-PCR 检测重金属胁迫诱导甲基转移酶相关基因,5-甲基胞嘧啶糖基化酶基因和染色质重构因子(DDM1)发生的表达变异 | 第42-44页 |
5 RT-PCR 检测重金属胁迫诱导转座子和基因发生可遗传的表达的变异 | 第44-47页 |
·重金属胁迫诱导松前当代转座子和基因发生明显的表达变异 | 第44-45页 |
·基因表达变异的生物遗传分析 | 第45-47页 |
6 后代植物抗重金属能力提高及植物中 P1 B - 类型的 ATP 酶的表达变异 | 第47-51页 |
·后代植物抗重金属胁迫能力的提高 | 第47-48页 |
·P18-类型的ATP酶的表达变异 | 第48-51页 |
讨论 | 第51-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第67页 |