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重金属胁迫诱导水稻发生可遗传的表观遗传变异及其可能作用于水稻提高抗重金属能力的机制的研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-10页
引言第10-20页
 1 DNA 甲基化的分子生物学研究进展第10-14页
   ·植物基因组中的 DNA 甲基化第10-11页
   ·植物基因组中 DNA 甲基化的建立和保持第11页
   ·植物基因组中 DNA 去甲基化作用第11-12页
   ·DNA 甲基化的生物学功能第12-14页
     ·DNA 甲基化与基因组防御第12-13页
     ·DNA 甲基化与基因表达第13-14页
 2 非生物胁迫和表观遗传学第14-16页
 3 本研究的背景、目的和意义第16-20页
材料与方法第20-29页
 1. 实验材料第20页
 2. 实验方法第20-29页
   ·植物材料的重金属胁迫处理第20页
   ·植物基因组 DNA 的提取与纯化第20-21页
   ·Southern 杂交分析第21-22页
     ·DNA 酶切第21页
     ·Southern 印迹第21页
     ·探针的分离第21-22页
     ·探针的标记,Southern 杂交记杂交信号的检测第22页
   ·亚硫酸盐测序第22-25页
     ·C-T 转换试剂使用前的制备第22页
     ·C-T 转换的操作过程第22-23页
     ·序列的PCR 扩增及纯化和回收第23-24页
     ·感受态细胞的制备,转化,α互补筛选及阳性克隆的PCR 测序第24-25页
   ·植物总RNA 的提取及RT-PCR第25-28页
     ·植物总 RNA 的提取第25页
     ·反转录第25页
     ·检测总RNA 中DNA 污染是否完全去除及反转录第一链合成是否成功第25-26页
     ·RT-PCR、琼脂糖电泳检测第26-28页
   ·植物抗重金属能力的检测第28-29页
结果与分析第29-51页
 1 重金属处理植株表现出明显的表型变异第29页
 2 Southern 杂交检测重金属胁迫诱导转座子和基因发生的可遗传的DNA 甲基化变异第29-39页
   ·转座子和基因均发生明显的去甲基化变异,并且变异只发生在 CNG 位点第29-33页
   ·自交后代中甲基化变异的模式为一代发生新的或者进一步的去甲基化变异,而二代基本可稳定遗传一代的甲基化模式第33-39页
   ·正反交后代的结果证明序列特异的甲基化变异从父本遗传或者从母本遗传没有太大的差异第39页
 3 亚硫酸测序验证重金属胁迫诱导的甲基化变异第39-42页
 4 RT-PCR 检测重金属胁迫诱导甲基转移酶相关基因,5-甲基胞嘧啶糖基化酶基因和染色质重构因子(DDM1)发生的表达变异第42-44页
 5 RT-PCR 检测重金属胁迫诱导转座子和基因发生可遗传的表达的变异第44-47页
   ·重金属胁迫诱导松前当代转座子和基因发生明显的表达变异第44-45页
   ·基因表达变异的生物遗传分析第45-47页
 6 后代植物抗重金属能力提高及植物中 P1 B - 类型的 ATP 酶的表达变异第47-51页
   ·后代植物抗重金属胁迫能力的提高第47-48页
   ·P18-类型的ATP酶的表达变异第48-51页
讨论第51-55页
结论第55-56页
参考文献第56-66页
致谢第66-67页
在学期间公开发表论文及著作情况第67页

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