| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-37页 |
| 一、HOX 基因家族简介 | 第8-13页 |
| （一） HOX 家族成员 | 第8-10页 |
| （二） HOX 家族蛋白的功能 | 第10-11页 |
| （三） HOXB13 基因及其功能研究 | 第11-13页 |
| 二、组蛋白乙酰化修饰、DNA 甲基化与真核生物基因的转录调控 | 第13-28页 |
| （一） 真核生物的染色质结构与转录调控的关系 | 第13-15页 |
| （二） 组蛋白乙酰化修饰与转录调控 | 第15-21页 |
| （三） 组蛋白去乙酰化酶 | 第21-25页 |
| （四） 组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第25-26页 |
| （五） DNA 甲基化与基因转录调控 | 第26-28页 |
| 三、PCG（POLYCOMB GROUP）蛋白复合物及其功能研究概述 | 第28-34页 |
| （一） PcG 蛋白复合物 | 第29-34页 |
| 四、本论文研究的内容和意义 | 第34-37页 |
| （一） 立题依据 | 第34-35页 |
| （二） 本论文的研究内容和意义 | 第35-37页 |
| 实验材料与方法 | 第37-52页 |
| 一、实验材料 | 第37-38页 |
| （一） 质粒 | 第37页 |
| （二） 蛋白质和抗体 | 第37页 |
| （三） 哺乳动物细胞系 | 第37-38页 |
| （四） 试剂 | 第38页 |
| 二、实验方法 | 第38-52页 |
| Ⅰ. 分子生物学实验方法 | 第38-46页 |
| （一） 分子克隆 | 第38页 |
| （二） DNA 的琼脂糖电泳 | 第38页 |
| （三） 质粒大量制备的方法 | 第38-40页 |
| （四） 哺乳动物细胞总RNA 的提取和反转录 | 第40-42页 |
| （五） 染色质免疫沉淀实验（Chromatin immunoprecipitation，ChIP） | 第42-44页 |
| （六） RNA 干涉（RNAi） | 第44-45页 |
| （七） 亚硫酸氢钠测序（bisulfite genomic sequencing） | 第45-46页 |
| Ⅱ. 细胞生物学实验方法 | 第46-52页 |
| （一） 哺乳动物细胞系的培养 | 第46页 |
| （二） 真核生物细胞的瞬时转染和荧光素酶报告基因检测 | 第46-47页 |
| （三） 真核生物细胞系的脂质体和罗氏瞬时转染 | 第47页 |
| （四） 蛋白质的Western Blot 分析 | 第47-49页 |
| （五） 免疫共沉淀（co-immunoprecipitation assay，CoIP）实验 | 第49-51页 |
| （六） MTT 细胞活性检测实验 | 第51-52页 |
| 实验结果与分析 | 第52-72页 |
| 一、HOXB13 参与组蛋白去酰化酶抑制剂丁酸钠(NAB)诱导的前列腺癌细胞生长抑制 | 第52-55页 |
| （一） NaB 抑制了前列腺癌细胞DU145 的生长并且提高了HOXB13 基因的表达水平 | 第52-53页 |
| （二） NaB 诱导的前列腺癌细胞生长停滞部分依赖于HOXB13 | 第53-55页 |
| 二、组蛋白去乙酰化酶参与调控HOXB13 基因转录的分子机制及意义 | 第55-65页 |
| （一） HDAC4 参与HOXB13 基因的表达调控机制及意义 | 第55-59页 |
| （二） YY1 参与HOXB13 基因的表达调控机制及意义 | 第59-63页 |
| （三） 转录因子YY1 能够与HDAC4 结合并且招募HDAC4 到HOXB13 基因启动子上 | 第63-65页 |
| 三、POLYCOMB参与HOXB13 基因的表达调控及机制 | 第65-68页 |
| （一） Polycomb 家族蛋白表达与HOXB13 的表达呈现明显的负相关，Polycomb 调控HOXB13 的表达 | 第65-67页 |
| （二） Polycomb 通过影响HOXB13 基因启动子上H3K27 三基化的水平调控基因的表达 | 第67-68页 |
| 四、DNA 甲基化参与HOXB13 基因的表达调控及机制 | 第68-72页 |
| （一） 在前列腺癌细胞DU145 中HOXB13 基因启动子高甲基化 | 第68-69页 |
| （二） DNA 甲基转移酶DNMT36 参与HOXB13 基因的调控 | 第69-72页 |
| 讨论 | 第72-76页 |
| 一、HOXB13 与肿瘤的关系 | 第72-73页 |
| 二、HDAC 调控HOXB13 基因转录活性的特异性 | 第73页 |
| 三、转录因子YY1 在乙酰化修饰调控HOXB13 基因的过程中发挥重要的作用 | 第73-74页 |
| 四、PCG 家族蛋白转录调控HOXB13 基因的具体分子机制 | 第74-75页 |
| 五、PCG 家族蛋白与前列腺癌的关系 | 第75-76页 |
| 主要结论和创新点 | 第76-77页 |
| 一、主要结论 | 第76页 |
| 二、主要创新点 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-94页 |
| 附录 | 第94-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第97页 |
