| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-16页 |
| 第一章 综述 | 第16-40页 |
| ·课题的提出 | 第16-18页 |
| ·前人的研究进展 | 第18-39页 |
| ·晚疫病病原菌的特征 | 第18-19页 |
| ·马铃薯晚疫病的症状与危害 | 第19-20页 |
| ·马铃薯晚疫病的抗性机制 | 第20-22页 |
| ·泛素-蛋白酶体通路 | 第22-39页 |
| ·研究的目的和意义 | 第39-40页 |
| 第二章 材料与方法 | 第40-57页 |
| ·试验材料 | 第40-41页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·病原菌 | 第40-41页 |
| ·菌株、质粒及试剂 | 第41页 |
| ·试验方法 | 第41-57页 |
| ·植物材料的准备 | 第41-43页 |
| ·马铃薯总RNA的提取(用于反转录和RT-PCR) | 第43-44页 |
| ·cDNA的合成与纯化 | 第44-45页 |
| ·基因全长cDNA的克隆 | 第45-47页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第47-48页 |
| ·单克隆质粒的小量提取 | 第48-49页 |
| ·阳性克隆的鉴定及生物信息学分析 | 第49页 |
| ·基因全长编码序列的克隆 | 第49页 |
| ·马铃薯叶片基因组DNA小量抽提 | 第49-50页 |
| ·TAIL-PCR反应程序 | 第50-51页 |
| ·马铃薯叶片基因组DNA大量抽提(用于Southern杂交) | 第51-52页 |
| ·Southern杂交 | 第52-53页 |
| ·RT-PCR | 第53-54页 |
| ·农杆菌感受态的制备与转化 | 第54页 |
| ·马铃薯的遗传转化 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的抗性鉴定 | 第55-56页 |
| ·转基因马铃薯试管苗的耐盐性评价 | 第56-57页 |
| 第三章 马铃薯RING指蛋白基因StRFP的克隆与功能分析 | 第57-105页 |
| ·前言 | 第57-58页 |
| ·材料和方法 | 第58-68页 |
| ·试验材料 | 第58页 |
| ·马铃薯StRFP基因全长cDNA的克隆 | 第58页 |
| ·StRFP基因分别在三种抗性材料中gDNA的克隆 | 第58-59页 |
| ·StRFP基因内源拷贝数分析 | 第59页 |
| ·StRFP基因的染色体定位 | 第59页 |
| ·StRFP基因的亚细胞定位 | 第59-63页 |
| ·StRFP基因的表达分析 | 第63页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第63-66页 |
| ·转基因马铃薯植株的获得与分子检测 | 第66-67页 |
| ·转基因植株的抗性鉴定 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-101页 |
| ·马铃薯StRFP基因的克隆与序列分析 | 第68-79页 |
| ·基因内源拷贝数分析 | 第79页 |
| ·基因组序列分析 | 第79-84页 |
| ·马铃薯StRFP基因的染色体定位 | 第84页 |
| ·马铃薯StRFP基因亚细胞定位 | 第84-87页 |
| ·基因表达分析 | 第87-92页 |
| ·转基因鉴定 | 第92-101页 |
| ·讨论 | 第101-105页 |
| ·StRFP为马铃薯ATL基因家族的一个新成员 | 第101-102页 |
| ·StRFP参与了马铃薯抗晚疫病菌的信号传导途径 | 第102-103页 |
| ·StRFP蛋白的亚细胞定位 | 第103-105页 |
| 第四章 马铃薯StPUB基因的克隆与功能分析 | 第105-139页 |
| ·前言 | 第105-106页 |
| ·材料和方法 | 第106-109页 |
| ·植物材料 | 第106页 |
| ·马铃薯StPUB基因全长cDNA的克隆 | 第106页 |
| ·StPUB基因在不同抗性材料中gDNA的克隆 | 第106页 |
| ·StPUB基因启动子克隆 | 第106-107页 |
| ·StPUB基因内源拷贝数分析 | 第107页 |
| ·StPUB基因的表达分析 | 第107页 |
| ·StPUB基因RNAi抑制表达载体的构建 | 第107-108页 |
| ·转基因马铃薯植株的获得与分子检测 | 第108页 |
| ·转基因植株的抗性鉴定 | 第108页 |
| ·转基因马铃薯试管苗的耐盐性评价 | 第108-109页 |
| ·结果与分析 | 第109-134页 |
| ·马铃薯StPUB基因的克隆与序列分析 | 第109-118页 |
| ·马铃薯StPUB基因内源拷贝数分析 | 第118-119页 |
| ·马铃薯StPUB基因启动子序列的克隆 | 第119-120页 |
| ·马铃薯StPUB基因的基因组序列的克隆及分析 | 第120-121页 |
| ·基因表达分析 | 第121-126页 |
| ·转基因鉴定 | 第126-134页 |
| ·讨论 | 第134-139页 |
| ·StPUB为马铃薯PUB/ARM重复蛋白基因家族的一个新成员 | 第134-135页 |
| ·StPUB基因参与了马铃薯抗晚疫病菌的抗病反应 | 第135-137页 |
| ·StPUB基因参与了NaCl介导的盐胁迫反应 | 第137-139页 |
| 第五章 讨论 | 第139-144页 |
| ·StRFP和StPUB是马铃薯泛素连接酶基因家族中的新成员 | 第139页 |
| ·StRFP和StPUB参与了马铃薯对生物和非生物胁迫的响应 | 第139-140页 |
| ·StRFP和StPUB基因可能的作用机理 | 第140-143页 |
| ·StRFP基因可能的作用机理 | 第140-141页 |
| ·StPUB基因可能的作用机理 | 第141-143页 |
| ·研究展望 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-165页 |
| 附录 | 第165-180页 |
| 附录1:StRFP基因在GenBank的登记信息 | 第165-167页 |
| 附录2:StPUB基因在GenBank的登记信息 | 第167-169页 |
| 附录3:StPUB基因与同源基因的核苷酸序列比对 | 第169-175页 |
| 附录4:马铃薯不同品种或材料中StPUB基因核苷酸序列分析 | 第175-180页 |
| 附录5:博士在读期间发表或接收的文章 | 第180-181页 |
| 致谢 | 第181-182页 |
