| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-26页 |
| 1 MIRNA 简介 | 第11-19页 |
| ·MIRNA 的发现 | 第12页 |
| ·MIRNA 的生物合成及组装 | 第12-14页 |
| ·miRNA 前体的转录 | 第12页 |
| ·miRNA 的加工和外运 | 第12-13页 |
| ·miRNA 组装入沉默复合体 | 第13-14页 |
| ·MIRNA 的作用机制 | 第14页 |
| ·MIRNA 的功能 | 第14-15页 |
| ·MIRNA 的鉴定 | 第15-16页 |
| ·植物中保守的MIRNA | 第16页 |
| ·植物中不保守的MIRNA | 第16-17页 |
| ·MIRNA 与SIRNA 的比较 | 第17页 |
| ·植物MIRNA 靶基因的鉴定 | 第17-19页 |
| ·植物miRNA 靶基因的鉴定 | 第17-18页 |
| ·植物miRNA 调控范围 | 第18-19页 |
| ·植物miRNA 靶基因的实验确定 | 第19页 |
| 2 MIR164 与植物缺刻 | 第19-22页 |
| ·植物叶片的发育及影响因子 | 第19-20页 |
| ·MIR164 与CUC2 的突变体 | 第20-22页 |
| ·miR164a 突变体缺刻加深 | 第20-21页 |
| ·miR164a 靶基因的确定 | 第21页 |
| ·CUC2 与MIR164A 的表达定位 | 第21-22页 |
| ·叶片缺刻形成的模型 | 第22页 |
| 3 IP51 的发现及作用机制 | 第22-23页 |
| ·IP51 的研究 | 第22页 |
| ·IP51 的作用机制 | 第22-23页 |
| 4 排水器的结构与发育 | 第23-24页 |
| 5 简并PCR 技术 | 第24-25页 |
| ·简并引物的设计 | 第24页 |
| ·简并PCR 技术的局限性 | 第24-25页 |
| ·使用简并PCR 获得基因全长的方法 | 第25页 |
| 6 耐盐模式植物盐芥 | 第25-26页 |
| 第二部分 实验论文 | 第26-48页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌种及质粒 | 第26页 |
| ·引物序列 | 第26-27页 |
| ·酶及试剂盒 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·培养基及化学试剂 | 第27-28页 |
| ·分析软件 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-35页 |
| ·MIR164 沉默载体的构建 | 第28-32页 |
| ·CTAB 法提取植物基因组DNA | 第28-29页 |
| ·克隆IP51 序列 | 第29页 |
| ·Gene Clean 方法从琼脂糖凝胶上回收DNA 片段 | 第29页 |
| ·改造的与miR164 互补的IP51 序列 | 第29-30页 |
| ·改造的IP51 连接载体 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第31页 |
| ·质粒的提取 | 第31-32页 |
| ·酶切验证 | 第32页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第32页 |
| ·MIR164 过表载体的构建 | 第32-33页 |
| ·PCR 克隆MIR164 基因 | 第33页 |
| ·MIR164 基因连接载体 | 第33页 |
| ·靶基因的克隆 | 第33-35页 |
| ·植物总RNA 的提取及反转录 | 第33-34页 |
| ·简并引物克隆盐芥 CUC2 同源基因 | 第34-35页 |
| ·快速扩增CDNA 3'末端(3'-RACE) | 第35页 |
| 3 实验结果 | 第35-42页 |
| ·改造的IPS1 检测 | 第35-36页 |
| ·沉默载体的检测 | 第36-37页 |
| ·盐芥CUC2 同源基因的克隆 | 第37-41页 |
| ·MIR164 沉默转化株系 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |