| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 研究目的及意义 | 第13-14页 |
| 第一部分 文献综述 | 第14-31页 |
| 第一章 烟草赤星病菌的研究进展 | 第15-20页 |
| 1 烟草赤星病菌的分类地位 | 第15页 |
| 2 病原菌形态和生物学特性 | 第15-16页 |
| 3 烟草赤星病菌致病性分化 | 第16-18页 |
| 4 赤星病菌的致病机理 | 第18-20页 |
| 第二章 植物病原菌角质酶的研究进展 | 第20-31页 |
| 1 角质酶的结构 | 第21-24页 |
| ·角质酶的一级结构 | 第21-22页 |
| ·角质酶的三级结构 | 第22-24页 |
| 2 角质酶的纯化研究 | 第24-25页 |
| 3 角质酶是一种诱导酶 | 第25-26页 |
| 4 角质酶在致病中的作用研究 | 第26-30页 |
| 5 角质酶的应用前景 | 第30-31页 |
| 第二部分 研究内容 | 第31-62页 |
| 第一章 烟草赤星病菌产角质酶发酵条件的优化 | 第32-41页 |
| 1 材料和方法 | 第32-35页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·菌株和试剂 | 第32页 |
| ·所用仪器 | 第32-33页 |
| ·所需培养基 | 第33页 |
| ·PDA 培养基 | 第33页 |
| ·液体发酵基础培养基 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·苹果角质的制备 | 第33页 |
| ·烟草赤星病菌的液体产酶培养 | 第33-34页 |
| ·培养时间及苹果角质对酶活性的影响 | 第33-34页 |
| ·最适温度的确定 | 第34页 |
| ·最适初始pH 的确定 | 第34页 |
| ·最佳碳源 | 第34页 |
| ·最佳氮源 | 第34页 |
| ·正交试验 | 第34页 |
| ·角酶活性测定 | 第34-35页 |
| 2 结果和讨论 | 第35-41页 |
| ·结果 | 第35-39页 |
| ·培养时间对烟草赤星病菌产生角质酶的影响 | 第35页 |
| ·培养温度对角质酶活力的影响 | 第35-36页 |
| ·初始pH 对角质酶活力的影响 | 第36-37页 |
| ·单因素实验确定碳源和氮源对角质酶活力的影响 | 第37页 |
| ·正交实验确定最佳的碳和氮源的配方对角质酶活力的影响 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第二章 烟草赤星病菌产生角质酶的纯化和性质测定 | 第41-56页 |
| 1 材料和方法 | 第41-46页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-46页 |
| ·液体发酵培养 | 第42页 |
| ·酶活力测定 | 第42页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·标准蛋白质溶液 | 第42页 |
| ·操作方法 | 第42页 |
| ·烟草赤星病菌角质酶的分离纯化 | 第42-45页 |
| ·粗酶液的制备 | 第42-43页 |
| ·DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换层析 | 第43页 |
| ·Sephacryl S-100 分子筛层析 | 第43页 |
| ·Phenyl-Sepharose 6 fast flow (highsub) 疏水层析 | 第43页 |
| ·角质酶的纯度鉴定及相对分子量的测定 | 第43-45页 |
| ·角质酶性质的测定 | 第45-46页 |
| ·溶液的配制 | 第45-46页 |
| ·反应最适温度 | 第46页 |
| ·温度稳定性 | 第46页 |
| ·反应最适pH | 第46页 |
| ·pH 稳定性 | 第46页 |
| ·不同金属离子对酶活性的影响 | 第46页 |
| 2 结果与讨论 | 第46-56页 |
| ·结果 | 第46-53页 |
| ·蛋白质含量标准曲线的测定 | 第46-47页 |
| ·烟草赤星病菌产生角质酶的纯化 | 第47-51页 |
| ·DEAE-Sepharose fast flow 离子交换层析 | 第47页 |
| ·Sephacryl S-100 分子筛层析 | 第47-48页 |
| ·Phenyl-Sepharose 6 fast flow (highsub) 疏水层析 | 第48-49页 |
| ·烟草赤星病菌产生角质酶的纯化结果 | 第49-51页 |
| ·烟草赤星病菌产生角质酶的性质研究 | 第51-53页 |
| ·最适温度和温度稳定性 | 第51页 |
| ·最适pH 和pH 稳定性 | 第51-52页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| ·关于纯化方法 | 第53-54页 |
| ·离子交换层析 | 第53页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第53页 |
| ·疏水层析 | 第53-54页 |
| ·纯化过程中的注意问题 | 第54页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第54页 |
| ·纯化结果的分析 | 第54页 |
| ·关于角质酶的分子量 | 第54-55页 |
| ·关于性质的测定 | 第55-56页 |
| 第三章 角质酶在烟草赤星病菌致病中的作用研究 | 第56-62页 |
| 1 材料和方法 | 第56-58页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·孢子悬浮液的制备 | 第57页 |
| ·离体叶片接种方法 | 第57页 |
| ·孢子萌发过程中的角质酶产生试验 | 第57-58页 |
| 2 结果和讨论 | 第58-62页 |
| ·结果 | 第58-60页 |
| ·孢子萌发过程中的角质酶产生实验 | 第58页 |
| ·不同菌株致病力强弱与产角质酶活性的对比 | 第58-60页 |
| ·不同菌株的致病力测定 | 第58页 |
| ·不同菌株液体培养产角质酶活力对比 | 第58-59页 |
| ·分生孢子悬浮液中添加角质酶接种试验 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第79页 |
