| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| ·我国苹果树腐烂病的危害情况 | 第12-14页 |
| ·苹果树腐烂病菌致病机理的研究概况 | 第14页 |
| ·遗传转化及丝状真菌遗传转化的研究进展 | 第14-19页 |
| ·本研究的目的意义及技术路线 | 第19-21页 |
| ·本研究的目的意义 | 第19-20页 |
| ·本研究的主要内容 | 第20页 |
| ·本研究的技术路线 | 第20-21页 |
| 第二章 农杆菌介导的苹果树腐烂病菌的转化 | 第21-35页 |
| ·前言 | 第21页 |
| ·材料、试剂、仪器及培养基 | 第21页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·主要仪器、试剂及培养基配方 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·潮霉素抑制苹果树腐烂病菌生长的最佳浓度筛选 | 第21页 |
| ·苹果树腐烂病菌分生孢子的培养 | 第21-22页 |
| ·潮霉素抑制苹果树腐烂病菌分生孢子萌发的最佳浓度筛选 | 第22页 |
| ·农杆菌介导苹果树腐烂病菌的遗传转化体系的建立 | 第22页 |
| ·转化子的遗传稳定性分析 | 第22页 |
| ·载体pBIG2RHPH2-GFP-GUS 的质粒提取 | 第22-23页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的DNA 的提取 | 第23页 |
| ·转化子的PCR 检测 | 第23-25页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的Southern Blotting 分析 | 第25-27页 |
| ·转化子的皿内培养性状观察 | 第27页 |
| ·突变体的保存 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-33页 |
| ·潮霉素抑制苹果树腐烂病菌生长的最佳浓度筛选 | 第27-28页 |
| ·潮霉素抑制苹果树腐烂病菌分生孢子萌发的最佳浓度筛选 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导的苹果树腐烂病菌转化子的获得 | 第29页 |
| ·转化子的遗传稳定性分析 | 第29-30页 |
| ·野生腐烂菌和转化子 DNA 提取 | 第30页 |
| ·转化子中T-DNA 插入的PCR 检测 | 第30页 |
| ·转化子中农杆菌污染的检测 | 第30-31页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子插入的Southern blotting 分析 | 第31-32页 |
| ·转化子的皿内培养性状观察 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 PEG 介导的苹果树腐烂病菌的遗传转化 | 第35-41页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·试剂、仪器及培养基 | 第35页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·主要仪器和试剂及培养基配方 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·苹果树腐烂病菌分生孢子的培养 | 第35页 |
| ·苹果树腐烂病菌原生质体的制备与再生 | 第35页 |
| ·苹果树腐烂病菌原生质体的再生 | 第35页 |
| ·PEG 介导的苹果树腐烂病菌的遗传转化 | 第35-36页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的筛选 | 第36页 |
| ·苹果树腐烂病菌基因组DNA 的提取 | 第36页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的PCR 检测 | 第36页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的Southern blotting 检测 | 第36-37页 |
| ·转化子的遗传稳定性检测 | 第37页 |
| ·突变体的保存 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-39页 |
| ·菌丝菌龄对苹果树腐烂病菌原生质转化的影响 | 第37页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的筛选 | 第37页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·转化子的Southern blotting 分析 | 第38-39页 |
| ·苹果树腐烂病菌转化子的遗传稳定性分析 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 附录1 实验所用试剂及培养基配制 | 第48-52页 |
| 附录2 实验所用仪器 | 第52-53页 |
| 附录3 缩略语表 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
