| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-16页 |
| 英文缩略表 | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-44页 |
| 1 植物抗病相关基因及克隆技术 | 第18-21页 |
| ·植物抗病相关基因类型 | 第18页 |
| ·植物抗病相关基因克隆技术 | 第18-21页 |
| ·转座子标签技术 | 第19页 |
| ·定位克隆技术 | 第19页 |
| ·同源克隆技术 | 第19页 |
| ·mRNA 差异显示技术 | 第19-20页 |
| ·基因芯片技术 | 第20页 |
| ·表达序列标签技术 | 第20页 |
| ·蛋白质组学技术 | 第20-21页 |
| ·其它技术 | 第21页 |
| 2 植物抗病机制研究进展 | 第21-24页 |
| ·植物抗病类型 | 第22页 |
| ·植物抗病分子基础 | 第22-24页 |
| ·木质素 | 第22-23页 |
| ·植保素 | 第23页 |
| ·活性氧 | 第23页 |
| ·水杨酸 | 第23-24页 |
| ·病程相关蛋白 | 第24页 |
| ·防御酶系 | 第24页 |
| 3 蛋白质学及其在植物抗病研究中的应用 | 第24-29页 |
| ·蛋白质组学定义及研究内容 | 第24-25页 |
| ·蛋白质组学研究的关键技术 | 第25-27页 |
| ·蛋白质分离技术 | 第25-26页 |
| ·质谱鉴定技术 | 第26页 |
| ·生物信息学技术 | 第26-27页 |
| ·蛋白质组学在植物病害研究中的应用 | 第27-29页 |
| ·水稻、小麦等病害蛋白质组学研究 | 第27-28页 |
| ·玉米病害蛋白质组学研究 | 第28-29页 |
| 4 玉米弯孢菌叶斑病研究概况 | 第29-34页 |
| ·玉米弯孢菌叶斑病的危害与防治 | 第29-30页 |
| ·玉米弯孢菌叶斑病病原学研究概况 | 第30-32页 |
| ·病原菌 | 第30-31页 |
| ·致病性分化 | 第31-32页 |
| ·毒素分析 | 第32页 |
| ·玉米弯孢菌叶斑病抗性机制研究概况 | 第32-34页 |
| 5 本论文的研究内容及技术路线 | 第34-35页 |
| ·研究背景 | 第34页 |
| ·立题依据 | 第34-35页 |
| ·研究内容 | 第35页 |
| ·技术路线 | 第35页 |
| 6 预期目标及可能存在的问题 | 第35-36页 |
| ·预期目标 | 第35-36页 |
| ·存在的问题及展望 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-44页 |
| 第二章 玉米抗弯孢叶斑病菌侵染相关防御因子分析 | 第44-58页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| ·材料与试剂 | 第44页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·试验方法 | 第44-47页 |
| ·孢子悬浮液制备 | 第44-45页 |
| ·接种及取样 | 第45页 |
| ·SA、ABA 及ROS 含量测定 | 第45页 |
| ·防卫基因转录水平分析 | 第45-47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-52页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后SA 含量变化 | 第47页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后ABA 含量变化 | 第47-48页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后ROS 含量变化 | 第48-49页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后防卫基因转录水平分析 | 第49-52页 |
| ·病程相关蛋白 | 第49页 |
| ·防御酶系 | 第49-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| ·SA 增强了玉米弯孢菌叶斑病抗性 | 第52页 |
| ·ABA 增强了玉米弯孢菌叶斑病易感性 | 第52页 |
| ·ROS 在玉米弯孢菌叶斑病早期抗性中发挥重要作用 | 第52-53页 |
| ·PR-1,10 及PAL 参与玉米弯孢菌叶斑病抗性防御反应 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 第三章 玉米叶片蛋白质分离2-DE 体系建立与优化 | 第58-72页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·材料与试剂 | 第58-59页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58-59页 |
| ·试验方法 | 第59-62页 |
| ·取样 | 第59页 |
| ·优化方案 | 第59页 |
| ·2-DE 试验流程 | 第59-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-68页 |
| ·玉米叶片总蛋白质分离2-DE 体系的优化 | 第62-66页 |
| ·总蛋白质提取方法的确定 | 第62-63页 |
| ·裂解液中尿素最佳浓度的确定 | 第63-64页 |
| ·等电聚焦时间的优化 | 第64-65页 |
| ·IPG 胶条pH 范围的确定 | 第65-66页 |
| ·玉米叶片去除高丰度蛋白质2-DE 体系的优化 | 第66-68页 |
| ·去除高丰度蛋白质最佳PEG 浓度的确定 | 第66-67页 |
| ·去除高丰度蛋白质对2-DE 图谱的影响 | 第67-68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| ·玉米叶片总蛋白质沉淀方法 | 第68页 |
| ·PEG 沉淀法去除高丰度蛋白Rubisco | 第68-69页 |
| ·尿素对蛋白质样品裂解效果的影响 | 第69页 |
| ·等电聚焦时间对2-DE 图谱的影响 | 第69页 |
| ·IPG 胶条pH 范围对2-DE 图谱的影响 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-72页 |
| 第四章 玉米弯孢菌叶斑病抗性相关蛋白质鉴定 | 第72-98页 |
| 1 材料与方法 | 第72-75页 |
| ·材料与试剂 | 第72-73页 |
| ·材料 | 第72页 |
| ·试剂 | 第72-73页 |
| ·试验方法 | 第73-75页 |
| ·孢子悬浮液制备 | 第73页 |
| ·接种及取样 | 第73页 |
| ·2-DE 试验流程 | 第73-74页 |
| ·质谱分析及数据库检索 | 第74-75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-90页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后总蛋白质2-DE 图谱的比较 | 第75-80页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后去除高丰度蛋白质2-DE 图谱的比较 | 第80-84页 |
| ·差异蛋白质点质谱鉴定结果 | 第84-90页 |
| 3 讨论 | 第90-92页 |
| ·遗传背景对抗性相关蛋白质筛选效率的影响 | 第90页 |
| ·光合作用及能量代谢相关蛋白参与侵染应答反应 | 第90页 |
| ·寄主抗氧化胁迫相关蛋白参与侵染应答反应 | 第90-91页 |
| ·寄主抗干旱胁迫相关蛋白参与侵染应答反应 | 第91页 |
| ·蛋白质合成相关蛋白参与侵染应答反应 | 第91-92页 |
| ·其它抗性相关蛋白 | 第92页 |
| 参考文献 | 第92-98页 |
| 第五章 玉米弯孢叶斑病抗性基因ZmDip 克隆及表达 | 第98-118页 |
| 1 材料与方法 | 第98-103页 |
| ·材料与试剂 | 第98-99页 |
| ·材料 | 第98页 |
| ·试剂 | 第98-99页 |
| ·试验方法 | 第99-103页 |
| ·孢子悬浮液制备 | 第99页 |
| ·接种及取样 | 第99页 |
| ·cDNA 克隆 | 第99-100页 |
| ·基因组扩增 | 第100-101页 |
| ·Southern blot | 第101页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第101-102页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第102页 |
| ·SDS-PAGE 检测表达产物 | 第102页 |
| ·表达蛋白的可溶性分析 | 第102页 |
| ·表达产物的Western blot 分析 | 第102页 |
| ·表达产物的纯化 | 第102-103页 |
| ·重组子耐盐特性分析 | 第103页 |
| 2 结果与分析 | 第103-113页 |
| ·干旱诱导蛋白cDNA 克隆及序列分析 | 第103-108页 |
| ·ZmDip 基因 Southern blot 分析 | 第108-109页 |
| ·ZmDip 基因原核表达载体构建及分析 | 第109页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第109-110页 |
| ·表达产物的 Western blot 分析 | 第110-111页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第111-112页 |
| ·重组子耐盐特性分析 | 第112-113页 |
| 3 讨论 | 第113-114页 |
| ·ZmDip 与 ZmAsr1 为同一个基因 | 第113页 |
| ·ZmDip 重组蛋白以二聚体形式存在于胞质中 | 第113-114页 |
| ·ZmDip 基因提高了细菌耐盐性 | 第114页 |
| 参考文献 | 第114-118页 |
| 第六章 ZmDip 与玉米弯孢菌叶斑病抗性关系的探讨 | 第118-135页 |
| 1 材料与方法 | 第118-123页 |
| ·材料与试剂 | 第118-119页 |
| ·材料 | 第118-119页 |
| ·试剂 | 第119页 |
| ·试验方法 | 第119-123页 |
| ·孢子悬浮液制备 | 第119页 |
| ·接种及取样 | 第119-120页 |
| ·ZmDip 表达特异性分析 | 第120页 |
| ·ABA、SA 对ZmDip 转录水平的影响 | 第120页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后ZmDip 转录水平分析 | 第120页 |
| ·植物表达载体pBI-Zm Dip-Gus 的构建 | 第120-121页 |
| ·农杆菌介导的ZmDip 瞬时表达 | 第121-122页 |
| ·ZmDip 表达对ROS 及清除酶活性的影响 | 第122页 |
| ·ZmDip 表达对玉米抗弯孢叶斑病菌侵染的影响 | 第122-123页 |
| 2 结果与分析 | 第123-130页 |
| ·ZmDip 表达特性分析 | 第123-124页 |
| ·弯孢叶斑病菌侵染后ZmDip 转录水平的变化 | 第124-125页 |
| ·重组载体构建及农杆菌介导的瞬时表达 | 第125-126页 |
| ·ZmDip 表达对ROS 含量及清除酶系活性的影响 | 第126-128页 |
| ·ZmDip 表达对玉米抗弯孢叶斑病菌侵染的影响 | 第128-130页 |
| 3 讨论 | 第130-131页 |
| ·ZmDip 表达具有组织特异性 | 第130页 |
| ·ZmDip 表达与SA、ABA 积累可能没有直接相关性 | 第130页 |
| ·ZmDip 表达与ROS 代谢有关 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-135页 |
| 第七章 结论及后续工作展望 | 第135-137页 |
| 1 创新点 | 第135页 |
| 2 主要结论 | 第135-136页 |
| 3 后续工作展望 | 第136-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 附录 攻读学位期间发表文章及其它 | 第138-142页 |
