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人体肠道菌群结构与宿主代谢的相关性研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-16页
第一章 文献综述第16-73页
 引言第16-18页
   ·人体肠道菌群的多样性组成第18-30页
     ·人体肠道菌群的多样性概况第18-20页
     ·人体肠道菌群主要类群的分布特征第20-25页
       ·厚壁菌门(Firmicutes)第21-22页
       ·拟杆菌门(Bacteroidetes)第22-24页
       ·变形菌门(Proteobacteria)第24页
       ·放线菌门(Actinobacteria)第24-25页
     ·影响人体肠道菌群多样性的因素第25-30页
       ·宿主的选择压(Host selective pressure)第25-27页
       ·获得性免疫系统(Adaptive immune system)第27-28页
       ·营养因素第28-29页
       ·其他外在因素第29-30页
   ·人体肠道菌群的主要功能第30-39页
     ·代谢作用(metabolic function)第30-32页
     ·营养作用(tropic function)第32-33页
     ·保护作用(protective function)第33-34页
     ·肠道菌群与疾病第34-39页
       ·菌群失衡与肠道疾病第34-36页
       ·菌群失衡与非肠道疾病第36-39页
   ·研究肠道菌群的微生物分子生态学技术第39-46页
     ·指纹图谱技术第39-42页
       ·变性/温度梯度凝胶电泳(DGGE/TGGE)第40-41页
       ·末端限制性片段长度多态性(T-RFLP)第41-42页
       ·ERIC-PCR 指纹图谱第42页
     ·基于测序的技术第42-46页
       ·克隆文库技术第42-43页
       ·新型454 测序技术第43-45页
       ·元基因组学技术第45-46页
   ·代谢组学及其在肠道菌群研究中的应用第46-51页
     ·代谢组学的概念第46-47页
     ·代谢组学的研究方法第47-49页
       ·色谱-质谱联用仪法(MS)第47-48页
       ·核磁共振波谱法(NMR)第48-49页
       ·色谱-核磁-质谱联用法第49页
     ·基于NMR 的代谢组学在肠道菌群研究中的应用第49-51页
   ·多变量统计学在肠道菌群和代谢组学分析中的应用第51-55页
     ·非监督的多变量统计学方法第52-53页
     ·有监督的多变量统计学方法第53-55页
   ·肠道菌群与肥胖、2 型糖尿病关系的研究进展第55-60页
     ·肥胖和2 型糖尿病的诊断第55-56页
     ·肥胖和2 型糖尿病的流行情况及趋势第56-57页
     ·肥胖和2 型糖尿病的影响因素第57-60页
       ·基因因素第57-58页
       ·肥胖、2 型糖尿病与肠道菌群第58-60页
 参考文献第60-73页
第二章 一个四代的中国家庭成员肠道菌群结构与宿主整体代谢的相关性研究.第73-122页
 引言第77-78页
   ·材料与方法第78-90页
     ·实验对象选择第78-79页
     ·样品采集、预处理及粪便细菌DNA 提取第79-80页
       ·粪便样品的预处理第79-80页
       ·尿液样品的预处理第80页
       ·粪便样本细菌总DNA 提取及纯化第80页
     ·粪便菌群的细菌通用16S rRNA 基因克隆文库分析第80-84页
       ·细菌通用16S rRNA 基因的PCR 扩增及文库构建第80-81页
       ·细菌通用16S rRNA 基因克隆文库的系统发育分析第81-82页
       ·细菌通用16S rRNA 基因克隆文库的多样性评价第82-83页
       ·细菌通用16S rRNA 基因克隆文库的分析比较第83-84页
     ·粪便菌群的拟杆菌属(Bacteroides spp.)类群特异性16S rRNA 基因克隆文库分析第84-86页
       ·拟杆菌属类群特异性PCR 扩增及文库构建第84-85页
       ·拟杆菌属类群特异性16S rRNA 基因克隆文库的序列分析第85页
       ·类群特异性克隆文库的多样性评估第85-86页
       ·类群特异性克隆文库的统计学比较第86页
     ·粪便菌群组成的变性梯度凝胶电泳(DGGE)分析第86-88页
       ·优势细菌的16S rRNA 基因V3 区的PCR 扩增及DGGE 分析第86-87页
       ·拟杆菌属类群特异性PCR 扩增及DGGE 分析第87页
       ·柔嫩梭菌亚群类群特异性PCR 扩增及DGGE 分析第87-88页
       ·DGGE 条带的割胶回收与测序第88页
     ·尿液的代谢组学分析第88-89页
     ·数据处理第89-90页
       ·DGGE 图谱的处理第89页
       ·~1H NMR 图谱的处理第89页
       ·多变量统计学分析第89-90页
   ·实验结果第90-111页
     ·中国家庭成员肠道菌群的细菌通用16S rRNA 基因克隆文库多样性分析第90-96页
       ·细菌通用 16S rRNA 基因克隆文库的库容分析第90-93页
       ·细菌通用16S rRNA 基因克隆文库的系统发育分析第93-94页
       ·细菌通用16S rRNA 基因克隆文库的比较分析第94-96页
     ·中国家庭成员肠道菌群拟杆菌属(Bacteroides spp.)类群特异性克隆文库的多样性分析第96-101页
       ·拟杆菌属类群特异性克隆文库的库容分析第96-97页
       ·拟杆菌属类群特异性克隆文库的系统发育分析第97页
       ·家庭成员拟杆菌类群特异性克隆文库的比较分布第97-100页
       ·拟杆菌属类群特异性克隆文库与通用文库多样性的比较分析第100-101页
     ·中国家庭成员肠道菌群组成的DGGE 分析第101-106页
     ·中国家庭成员尿液代谢物的1H NMR 分析第106-107页
     ·肠道菌群DGGE 图谱与尿液NMR 代谢谱的共变化分析(Covariation analysi第107-111页
   ·讨论第111-116页
   ·本章小结第116页
   ·参考文献第116-122页
第三章 2 型糖尿病及对照人群肠道菌群结构特征分析第122-175页
 引言第126-128页
   ·材料与方法第128-140页
     ·人群抽样及招募方案第128-129页
     ·生物样本采集第129-131页
       ·血样采集第129页
       ·尿液采集第129-130页
       ·粪样采集第130-131页
     ·大规模粪便样品细菌总基因组DNA 提取方法的建立第131-135页
       ·样品采集与准备第131-132页
       ·DNA 提取方案第132-133页
       ·不同DNA 提取方法的DNA 产量测定第133页
       ·不同DNA 提取方法的肠道菌群PCR-DGGE 分析第133-135页
     ·新发糖尿病及对照人群粪便DNA 的16S rRNA 基因V3 区bar coded 454 测序第135-136页
     ·454 序列的处理及系统发育分析第136-138页
       ·序列整理(trimming)及归并(binning)第136-137页
       ·序列的系统发育分析第137-138页
       ·454 序列的多样性评价第138页
     ·人群肠道菌群结构的多变量统计学比较分析第138-140页
       ·主成份分析(PCA)及偏最小二乘判别法(PLS-DA)第138-139页
       ·UniFrac 分析第139-140页
   ·实验结果第140-162页
     ·人群招募及样品采集总体情况第140-141页
     ·不同DNA 提取方法的比较第141-147页
       ·不同DNA 提取方法的DNA 产量比较第141页
       ·不同DNA 提取方法的DNA 纯度比较第141-143页
       ·不同DNA 提取方法获得的菌群多样性比较第143-147页
     ·Bar coded 454 测序方法的可靠性及重复性检验第147-149页
     ·454 序列的多样性评价第149-151页
     ·人群肠道菌群多样性组成的系统发育分析第151-153页
     ·人群肠道菌群组成的个体差异性第153-155页
     ·糖尿病人群与对照人群肠道菌群的比较分析第155-162页
       ·糖尿病人群与对照人群肠道菌群多样性组成的比较第155-157页
       ·糖尿病人群与对照人群肠道菌群结构的统计学比较第157-162页
   ·讨论第162-165页
   ·本章小结第165-166页
   ·参考文献第166-175页
论文创新点第175-176页
附录1 缩写及全称第176-178页
附录2 溶液及培养基配方第178-179页
附录3 仪器设备第179-180页
致谢第180-182页
已(待)发表的学术文章及参加的科研课题第182-185页

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