摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-18页 |
中英文缩略词表 | 第18-20页 |
第一章 成熟精子中mRNA 的研究现状 | 第20-47页 |
1. 精子发生的生理学过程 | 第20-28页 |
·精子发生(spermatogenesis) | 第20-25页 |
·精子的结构 | 第25-26页 |
·精子发生过程中的基因表达与调控 | 第26-28页 |
2. 关于精子中m RNA 的研究 | 第28-35页 |
·精子mRNA 存在的证据 | 第28-29页 |
·关于精子中RNA 存在的争议 | 第29-30页 |
·成熟精子中mRNA 的种类和特征 | 第30-31页 |
·精子中mRNA 的可能功能 | 第31-35页 |
3. 精子中蛋白质的合成 | 第35-47页 |
·精子线粒体 | 第35-38页 |
·mRNA 导向至线粒体 | 第38-39页 |
·RNA 进入线粒体 | 第39页 |
·线粒体rRNA 在细胞中的定位 | 第39-40页 |
·哺乳动物精子中细胞核mRNA 在线粒体核糖体上翻译的证据 | 第40-42页 |
·在精子中蛋白质合成的两种可能机制 | 第42-47页 |
第二章 H-Y 抗原重组体的克隆和表达及抗H-Y 抗原抗体的制备 | 第47-83页 |
1. 前言 | 第47-48页 |
2. 材料与方法 | 第48-66页 |
·材料与试剂 | 第48-53页 |
·实验动物 | 第48页 |
·试剂盒 | 第48-49页 |
·菌株和质粒 | 第49页 |
·仪器 | 第49页 |
·常用试剂 | 第49-51页 |
·常用试剂的配制 | 第51-53页 |
·实验方法 | 第53-66页 |
·SMCY 基因重组体的克隆及鉴定的方法与步骤 | 第53-57页 |
·构建原核表达重组质粒pET-28a-SMCY | 第57-59页 |
·SMCY 重组融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第59-61页 |
·针对SMCY 基因重组体的多克隆IGY 抗体的获取,纯化及鉴定 | 第61-66页 |
3. 结果 | 第66-80页 |
·SMCY 基因重组片段的选取 | 第66-67页 |
·人和小鼠SMCY 与SMCX 表达蛋白氨基酸序列的对比分析 | 第67-71页 |
·SMCY 基因的三个片段的RT-PCR | 第71-72页 |
·三个克隆片段质粒的酶切鉴定 | 第72-73页 |
·重组质粒pET-28a-SMCY 的PCR 鉴定 | 第73-74页 |
·H-Y 重组融合蛋白的表达 | 第74-75页 |
·SMCY 重组融合蛋白的纯化 | 第75-76页 |
·抗H-Y 抗原IgY 抗体的纯化 | 第76-78页 |
·抗H-Y 抗原IgY 抗体的免疫扩散结果 | 第78页 |
·抗H-Y 抗原IgY 抗体对人和小鼠雌雄细胞的免疫组化结果 | 第78-80页 |
4. 讨论 | 第80-83页 |
第三章 Y 染色体mRNA 在成熟精子中选择性保留机制的研究 | 第83-129页 |
1. 前言 | 第83-85页 |
2. 材料和方法 | 第85-106页 |
·材料与试剂 | 第85-88页 |
·组织标本与试验动物 | 第85-86页 |
·试剂盒 | 第86页 |
·菌株和质粒 | 第86页 |
·仪器 | 第86-87页 |
·常用试剂 | 第87页 |
·常用试剂的配制 | 第87-88页 |
·试验方法 | 第88-106页 |
·精子的纯化 | 第88-89页 |
·精子及组织RNA 的提取 | 第89页 |
·RT-PCR | 第89-93页 |
·原位杂交: | 第93-96页 |
·Western 免疫印迹 | 第96-97页 |
·免疫组化 | 第97-98页 |
·精子细胞的间接免疫荧光 | 第98-99页 |
·DBY 与SMCY 反义寡核苷酸表达载体的构建 | 第99-103页 |
·反义寡核苷酸载体的小鼠受精卵的显微注射 | 第103-105页 |
·小鼠胚胎的性别鉴定 | 第105-106页 |
3. 结果 | 第106-121页 |
·精子的质量问题 | 第106-107页 |
·Y 染色体编码的基因在人和小鼠不同组织中表达情况的PCR 结果 | 第107-110页 |
·Y 染色体基因mRNA 在人与小鼠成熟精子和睾丸组织中的原位杂交结果 | 第110-114页 |
·DBY 和RP54Y 在睾丸和成熟精子中的表达情况 | 第114-116页 |
·SMCY 在睾丸和成熟精子中的表达情况 | 第116-118页 |
·DBY 和SMCY 的mRNA 在受精卵中的存在情况 | 第118页 |
·DBY 和SMCY 反义寡核苷酸载体的酶切鉴定 | 第118-119页 |
·DBY 和SMCY 反义寡核苷酸显微注射的结果 | 第119-120页 |
·显微注射后小鼠胚胎DBY 水平的检测 | 第120-121页 |
4. 讨论 | 第121-129页 |
参考文献 | 第129-148页 |
致谢 | 第148-149页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第149-150页 |
附录 专利 | 第150-151页 |
发表论文 | 第151-162页 |
上海交通大学学位论文答辩决议书 | 第162页 |