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抗H-Y抗原抗体的制备和成熟精子中Y染色体编码基因mRNA的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-18页
中英文缩略词表第18-20页
第一章 成熟精子中mRNA 的研究现状第20-47页
 1. 精子发生的生理学过程第20-28页
   ·精子发生(spermatogenesis)第20-25页
   ·精子的结构第25-26页
   ·精子发生过程中的基因表达与调控第26-28页
 2. 关于精子中m RNA 的研究第28-35页
   ·精子mRNA 存在的证据第28-29页
   ·关于精子中RNA 存在的争议第29-30页
   ·成熟精子中mRNA 的种类和特征第30-31页
   ·精子中mRNA 的可能功能第31-35页
 3. 精子中蛋白质的合成第35-47页
   ·精子线粒体第35-38页
   ·mRNA 导向至线粒体第38-39页
   ·RNA 进入线粒体第39页
   ·线粒体rRNA 在细胞中的定位第39-40页
   ·哺乳动物精子中细胞核mRNA 在线粒体核糖体上翻译的证据第40-42页
   ·在精子中蛋白质合成的两种可能机制第42-47页
第二章 H-Y 抗原重组体的克隆和表达及抗H-Y 抗原抗体的制备第47-83页
 1. 前言第47-48页
 2. 材料与方法第48-66页
   ·材料与试剂第48-53页
     ·实验动物第48页
     ·试剂盒第48-49页
     ·菌株和质粒第49页
     ·仪器第49页
     ·常用试剂第49-51页
     ·常用试剂的配制第51-53页
   ·实验方法第53-66页
     ·SMCY 基因重组体的克隆及鉴定的方法与步骤第53-57页
     ·构建原核表达重组质粒pET-28a-SMCY第57-59页
     ·SMCY 重组融合蛋白的诱导表达及纯化第59-61页
     ·针对SMCY 基因重组体的多克隆IGY 抗体的获取,纯化及鉴定第61-66页
 3. 结果第66-80页
   ·SMCY 基因重组片段的选取第66-67页
   ·人和小鼠SMCY 与SMCX 表达蛋白氨基酸序列的对比分析第67-71页
   ·SMCY 基因的三个片段的RT-PCR第71-72页
   ·三个克隆片段质粒的酶切鉴定第72-73页
   ·重组质粒pET-28a-SMCY 的PCR 鉴定第73-74页
   ·H-Y 重组融合蛋白的表达第74-75页
   ·SMCY 重组融合蛋白的纯化第75-76页
   ·抗H-Y 抗原IgY 抗体的纯化第76-78页
   ·抗H-Y 抗原IgY 抗体的免疫扩散结果第78页
   ·抗H-Y 抗原IgY 抗体对人和小鼠雌雄细胞的免疫组化结果第78-80页
 4. 讨论第80-83页
第三章 Y 染色体mRNA 在成熟精子中选择性保留机制的研究第83-129页
 1. 前言第83-85页
 2. 材料和方法第85-106页
   ·材料与试剂第85-88页
     ·组织标本与试验动物第85-86页
     ·试剂盒第86页
     ·菌株和质粒第86页
     ·仪器第86-87页
     ·常用试剂第87页
     ·常用试剂的配制第87-88页
   ·试验方法第88-106页
     ·精子的纯化第88-89页
     ·精子及组织RNA 的提取第89页
     ·RT-PCR第89-93页
     ·原位杂交:第93-96页
     ·Western 免疫印迹第96-97页
     ·免疫组化第97-98页
     ·精子细胞的间接免疫荧光第98-99页
     ·DBY 与SMCY 反义寡核苷酸表达载体的构建第99-103页
     ·反义寡核苷酸载体的小鼠受精卵的显微注射第103-105页
     ·小鼠胚胎的性别鉴定第105-106页
 3. 结果第106-121页
   ·精子的质量问题第106-107页
   ·Y 染色体编码的基因在人和小鼠不同组织中表达情况的PCR 结果第107-110页
   ·Y 染色体基因mRNA 在人与小鼠成熟精子和睾丸组织中的原位杂交结果第110-114页
   ·DBY 和RP54Y 在睾丸和成熟精子中的表达情况第114-116页
   ·SMCY 在睾丸和成熟精子中的表达情况第116-118页
   ·DBY 和SMCY 的mRNA 在受精卵中的存在情况第118页
   ·DBY 和SMCY 反义寡核苷酸载体的酶切鉴定第118-119页
   ·DBY 和SMCY 反义寡核苷酸显微注射的结果第119-120页
   ·显微注射后小鼠胚胎DBY 水平的检测第120-121页
 4. 讨论第121-129页
参考文献第129-148页
致谢第148-149页
攻读学位期间发表的学术论文目录第149-150页
附录 专利第150-151页
发表论文第151-162页
上海交通大学学位论文答辩决议书第162页

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