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耐辐射球菌细胞内锰离子水平调控相关蛋白研究

ACKNOWLEDGEMENTS第1-7页
致谢第7-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-13页
缩写第13-14页
目录第14-17页
1 文献综述第17-48页
   ·耐辐射球菌的研究进展第17-28页
     ·耐辐射球菌的分类及细胞形态学结构研究第17-19页
     ·耐辐射球菌的基因组信息第19-21页
     ·耐辐射球菌的电离辐射抗性机制第21-27页
     ·耐辐射球菌的抗氧化机制第27-28页
     ·小结及展望第28页
   ·细菌金属离子通道及感应调节蛋白研究进展第28-40页
     ·锰离子通道蛋白研究第29-33页
     ·金属离子感应调节蛋白第33-39页
     ·小结及展望第39-40页
 参考文献第40-48页
2 耐辐射球菌锰离子外排通道蛋白的研究第48-77页
   ·引言第48-49页
   ·材料与方法第49-56页
     ·实验菌种、试剂及仪器第49-51页
     ·生物信息学分析第51页
     ·基因缺失突变株及补偿株的构建第51-52页
     ·H_2O_2抗性试验第52-53页
     ·金属离子抗性测定第53页
     ·感应耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)测定胞内锰离子浓度第53页
     ·H_2O_2处理下的生存曲线第53-54页
     ·UV处理下的生存曲线第54页
     ·电离辐射处理下的生存曲线第54页
     ·H_2O_2处理后细胞蛋白羰基化测定第54-55页
     ·耐辐射球菌突变率实验第55页
     ·耐辐射球菌总RNA的抽提及RT-PCR第55-56页
     ·生长曲线测定第56页
   ·实验结果与分析第56-72页
     ·同源序列比对分析第56-59页
     ·dr1102、dr1236突变株鉴定第59-60页
     ·H_2O_2抗性试验第60-61页
     ·锰离子胁迫下野生株与突变株生存能力比较第61-64页
     ·dr1236突变株与R1细胞内锰离子浓度水平第64-65页
     ·dr1236突变株与R1生存曲线第65-67页
     ·蛋白羰基化实验第67-68页
     ·QRT-PCR分析第68-70页
     ·细胞突变率及生存曲线测定第70-72页
   ·讨论第72-75页
 参考文献第75-77页
3 Dr0865生物信息及生化活性研究第77-93页
   ·引言第77页
   ·材料与方法第77-82页
     ·实验菌种、试剂及仪器第77-79页
     ·生物信息学分析第79页
     ·大肠杆菌感受态制备第79页
     ·Dr0865基因的克隆第79-80页
     ·Dr0865表达质粒的构建第80页
     ·Dr0865蛋白表达第80页
     ·DR0865蛋白的纯化第80-81页
     ·DR0865凝胶迁移实验第81页
     ·β-半乳糖甘酶活性实验第81-82页
   ·结果与分析第82-90页
     ·Dr0865序列比对以及结构预测第82-84页
     ·Dr0865的细胞外表达第84-85页
     ·Dr0865启动子DNA结合实验第85-87页
     ·dr0865以及-2523突变株锰离子敏感性试验第87-88页
     ·β-半乳糖甘酶活性实验第88-89页
     ·细胞内锰离子浓度测定第89-90页
   ·讨论第90-91页
 参考文献第91-93页
4 Dr2539的生物信息及生化活性研究第93-114页
   ·引言第93-94页
   ·材料与方法第94-99页
     ·实验菌种、试剂及仪器第94-97页
     ·生物信息学分析第97-98页
     ·Dr2539基因的克隆及表达载体的构建第98页
     ·DR0865蛋白的纯化第98页
     ·β-半乳糖甘酶表达载体构建第98-99页
     ·Dr2539突变体及Dr2539补偿菌株构建第99页
     ·锰离子抗性实验第99页
   ·结果与分析第99-109页
     ·生物信息学分析Dr2539第99-100页
     ·Dr2539的表达及纯化第100-101页
     ·Dr2539的DNA结合活性第101-103页
     ·β-半乳糖甘酶活性分析第103-105页
     ·Dr2539突变体(D11M,E101D)锰离子抗性实验第105-106页
     ·Dr2539突变体(H98Y Tru)锰离子抗性实验第106-108页
     ·Dr2539突变体(H98Y)DNA结合活性测定第108-109页
   ·讨论第109-112页
 参考文献第112-114页
总结与展望第114-117页
博士期间发表及待发表论文第117-118页
个人简历第118页

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