| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1. 公畜繁殖性状的研究意义 | 第14-15页 |
| 2. HSP70-2 基因研究进展 | 第15-17页 |
| ·HSP70-2 与精子发生 | 第15-17页 |
| ·HSP70-2 与生精细胞的细胞周期 | 第15-16页 |
| ·HSP70-2 与生精细胞联会复合体(SC)的装配 | 第16页 |
| ·HSP70-2 在生精细胞凋亡中的作用 | 第16-17页 |
| ·HSP70-2 基因结构及定位 | 第17页 |
| ·HSP70-2 作为鸡繁殖性状分子标记的可行性 | 第17页 |
| 3. 热应激与繁殖性状 | 第17-20页 |
| ·热应激 | 第17-18页 |
| ·热应激对种公畜繁殖机能的影响 | 第18-20页 |
| ·热应激对射精量的影响 | 第18-19页 |
| ·热应激对精子活力的影响 | 第19页 |
| ·热应激对畸形率的影响 | 第19页 |
| ·热应激对精子密度的影响 | 第19-20页 |
| 4. 遗传标记辅助选择 | 第20-22页 |
| ·遗传标记 | 第20页 |
| ·单核苷酸多态性 | 第20-21页 |
| ·SNPs 的检测方法 | 第21-22页 |
| ·PCR-SSCP 法 | 第21页 |
| ·PCR-RFLP | 第21-22页 |
| ·高分辨率熔解曲线 | 第22页 |
| 5. 实时荧光定量 PCR 分析技术 | 第22-25页 |
| ·实时荧光定量PCR 的原理 | 第23页 |
| ·实时荧光定量PCR 的定量方法 | 第23-25页 |
| ·标准曲线法的相对定量 | 第24页 |
| ·标准曲线法的绝对定量 | 第24页 |
| ·比较Ct 法的相对定量 | 第24-25页 |
| 第二章 北京油鸡 HSP70-2 基因多态性与鸡精液品质性状的相关性研究 | 第25-44页 |
| 1. 材料 | 第25-26页 |
| ·试验动物与饲养 | 第25页 |
| ·样品的采集 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·精液品质检测 | 第25页 |
| ·基因组DNA 提取 | 第25-26页 |
| ·PCR-SSCP | 第26页 |
| ·酶切 | 第26页 |
| 2. 试验方法 | 第26-31页 |
| ·精液品质测定 | 第26-28页 |
| ·精液量 | 第26-27页 |
| ·精液pH | 第27页 |
| ·精子活率 | 第27页 |
| ·精子活力 | 第27页 |
| ·精子畸形率 | 第27页 |
| ·精子密度 | 第27-28页 |
| ·鸡基因组DNA 提取 | 第28页 |
| ·引物设计及扩增 | 第28-30页 |
| ·引物设计 | 第28-29页 |
| ·目的片段的扩增 | 第29-30页 |
| ·测序 | 第30页 |
| ·PCR-SSCP | 第30-31页 |
| ·非变性聚丙烯酞胺凝胶的制备 | 第30页 |
| ·硝酸银染色 | 第30-31页 |
| ·酶切 | 第31页 |
| ·数据统计和分析 | 第31页 |
| 3. 结果 | 第31-36页 |
| ·北京油鸡基因组DNA 和PCR 产物结果 | 第31-32页 |
| ·基因组DNA 提取结果 | 第31-32页 |
| ·PCR 产物结果 | 第32页 |
| ·北京油鸡HSP70-2 基因多态性分析结果 | 第32-35页 |
| ·HSP70-2 基因P1、P2、P3 位点测序分析图 | 第33-34页 |
| ·P5 位点多态性分析 | 第34页 |
| ·P7 位点多态性分析 | 第34页 |
| ·P8 位点多态性分析 | 第34-35页 |
| ·HSP70-2 基因多态性与精液品质相关性状最小二乘分析 | 第35-36页 |
| ·HSP70-2 基因单位点不同基因型与精液品质性状关联分析 | 第35页 |
| ·HSP70-2 基因两位点组合基因型与精液品质性状关联分析 | 第35-36页 |
| 4. 讨论 | 第36-42页 |
| ·基因组DNA 的提取及检测 | 第36-39页 |
| ·关于影响PCR 扩增反应的因素 | 第39页 |
| ·PCR-SSCP 法的优化 | 第39-40页 |
| ·PCR-RFLP 法 | 第40页 |
| ·HSP70-2 基因单核苷酸多态分析 | 第40-42页 |
| ·单位点单核苷酸多态性与精液品质性状分析 | 第40-41页 |
| ·双位点组合基因型与精液品质性状分析 | 第41-42页 |
| 5. 结论 | 第42-44页 |
| 第三章 热应激对 HSP70-2 基因不同组合基因型公鸡繁殖性能的影响 | 第44-64页 |
| 1. 试验材料 | 第44-45页 |
| ·试验动物与饲养 | 第44页 |
| ·样品的采集 | 第44-45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| 2. 试验方法 | 第45-50页 |
| ·精液品质测定 | 第45-46页 |
| ·受精率、孵化率及健雏率 | 第46页 |
| ·实时荧光定量PCR 引物设计 | 第46页 |
| ·总 RNA 提取及 cDNA 第一链合成、检测 | 第46-48页 |
| ·总RNA 提取 | 第46-47页 |
| ·总RNA 检测 | 第47页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第47页 |
| ·cDNA 第一链合成检测 | 第47-48页 |
| ·荧光定量PCR | 第48页 |
| ·荧光定量PCR 反应体系 | 第48页 |
| ·荧光定量PCR 扩增程序 | 第48页 |
| ·统计分析 | 第48-50页 |
| ·荧光定量计算方法 | 第48-49页 |
| ·引物扩增效率计算 | 第49-50页 |
| ·数据整理与统计 | 第50页 |
| 3. 结果 | 第50-60页 |
| ·短期热应激对北京油鸡种公鸡精液品质的影响 | 第50-54页 |
| ·热应激对HSP70-2 基因单位点不同基因型精液品质性状关联分析 | 第50-53页 |
| ·热应激对HSP70-2 基因两位点不同基因型组合精液品质性状关联分析 | 第53-54页 |
| ·热应激对不同基因型组合受精率、孵化率及健雏率的影响 | 第54-56页 |
| ·RNA 及反转录检测 | 第56-60页 |
| ·常规PCR 及测序结果 | 第57页 |
| ·Real-time 荧光定量检测 | 第57-59页 |
| ·候选基因mRNA 表达结果 | 第59-60页 |
| 4. 讨论 | 第60-63页 |
| ·短期热应激对北京油鸡HSP70-2 基因不同基因型精液品质影响 | 第60-61页 |
| ·短期热应激对北京油鸡HSP70-2 基因不同基因型种蛋受精率、孵化率和健雏率的影响 | 第61页 |
| ·HSP70-2 基因不同基因型表达分析 | 第61-63页 |
| 5. 结论 | 第63-64页 |
| 第四章 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 攻读学位期间发表学术论文目录 | 第75页 |
