摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 绪论 | 第11-22页 |
·盐胁迫对植物的危害和植物对盐胁迫的应答机制 | 第11-15页 |
·盐胁迫对植物的影响 | 第11页 |
·植物的耐盐机制 | 第11-13页 |
·植物液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白基因研究进展 | 第13-15页 |
·RD29A 启动子的研究进展 | 第15-16页 |
·RD29A 启动子的结构与功能特性 | 第15-16页 |
·RD29A 启动子在转基因植物中的应用 | 第16页 |
·CRE/loxP 重组系统 | 第16-19页 |
·CRE/loxP 重组系统的结构和功能 | 第16-17页 |
·CRE/loxP 重组系统的作用机制 | 第17页 |
·CRE/loxP 重组系统的应用 | 第17-19页 |
·共转化体系的研究进展 | 第19-20页 |
·本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
·本研究的主要内容与技术路线 | 第21-22页 |
第2章 CRE/loxP 载体系统的构建 | 第22-46页 |
·试验材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·质粒与菌种 | 第22页 |
·酶和生化制剂 | 第22页 |
·引物 | 第22-23页 |
·培养基 | 第23页 |
·质粒提取液 | 第23页 |
·DNA 提取缓冲液(CTAB 法) | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·试验方法 | 第23-27页 |
·拟南芥基因组DNA 的提取 | 第23-24页 |
·质粒DNA 的小量制备 | 第24页 |
·拟南芥RD29A 启动子的克隆 | 第24-26页 |
·载体构建 | 第26-27页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
·冻融法转化农杆菌感受态细胞 | 第27页 |
·结果与分析 | 第27-43页 |
·RD29A 启动子克隆载体的构建 | 第27-30页 |
·植物表达载体pG11227-RD29ACREN_2 的构建与鉴定 | 第30-33页 |
·中间载体pBnUAS-TvNHX1-T_n 的构建与鉴定 | 第33-35页 |
·中间载体pBnUAS-AtNHX1-T_n 的构建与鉴定 | 第35页 |
·植物表达载体pG11227-UASTvNHX1T_n-HSCREN_2 的构建与鉴定 | 第35-39页 |
·植物表达载体pG11227-UASAtNHX1T_n-HSCREN_2 的构建与鉴定 | 第39-40页 |
·植物表达载体pG11227-UASTvNHX1T_n-RD29ACREN_2 的构建与鉴定 | 第40-42页 |
·助质粒pSoup 及植物表达载体转化农杆菌及鉴定 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-45页 |
·载体构建策略 | 第43页 |
·PCR 产物克隆策略 | 第43-44页 |
·助质粒pSoup 的作用 | 第44页 |
·冻融法转化策略及农杆菌鉴定 | 第44-45页 |
·本章小结 | 第45-46页 |
第3章 CRE/loxP 载体系统对拟南芥的共转化及抗性筛选 | 第46-53页 |
·试验材料 | 第46-47页 |
·植物材料 | 第46页 |
·菌株和质粒 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器设备 | 第46-47页 |
·试验方法 | 第47-49页 |
·拟南芥的土壤栽培 | 第47-48页 |
·转化方案的设计 | 第48页 |
·转化操作 | 第48-49页 |
·转基因拟南芥的抗性筛选 | 第49页 |
·结果与分析 | 第49-51页 |
·拟南芥土壤栽培效果 | 第49页 |
·转化情况 | 第49页 |
·转基因拟南芥的筛选 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·转化方案设计原理 | 第51页 |
·共转化策略及影响因素 | 第51-52页 |
·蘸花法转化拟南芥的影响因素 | 第52页 |
·转基因植株的抗性筛选 | 第52页 |
·本章小结 | 第52-53页 |
第4章 CRE/loxP 重组激活系统的鉴定与检测 | 第53-62页 |
·试验材料 | 第53-54页 |
·植物材料 | 第53页 |
·主要试剂 | 第53页 |
·引物 | 第53-54页 |
·主要仪器 | 第54页 |
·试验方法 | 第54-55页 |
·转基因植株基因组DNA 的提取 | 第54页 |
·转基因植株PCR 检测 | 第54页 |
·CRE/loxP 重组系统的活性检测 | 第54-55页 |
·转基因植株的耐盐性检测 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-58页 |
·拟南芥DNA 的提取 | 第55页 |
·转基因植株的PCR 鉴定 | 第55-58页 |
·CRE/loxP 重组系统的活性 | 第58页 |
·转基因植株的耐盐性 | 第58页 |
·讨论 | 第58-61页 |
·CRE/loxP 重组激活系统工作原理 | 第59页 |
·GAL4-VP16/UAS 双因子反式激活系统 | 第59-60页 |
·GFP 表达情况 | 第60-61页 |
·重组CRE/loxP 激活系统与植株的耐盐性 | 第61页 |
·本章小结 | 第61-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
图版 | 第71-74页 |
图版说明 | 第74-76页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第76-78页 |
致谢 | 第78页 |