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苏云金芽胞杆菌的筛选鉴定及新型cry基因克隆、表达的研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
1. 引言第14-38页
   ·苏云金芽胞杆菌的研究历史第14-15页
   ·苏云金芽胞杆菌的特点第15-18页
     ·苏云金芽胞杆菌的生物学特性第15页
     ·苏云金芽胞杆菌的血清型及亚种第15-16页
     ·苏云金芽胞杆菌的分布与分离第16-18页
   ·编码杀虫晶体蛋白的cry/cyt基因第18-25页
     ·杀虫晶体蛋白基因的分类及鉴定第18-21页
     ·杀虫晶体蛋白基因的定位与克隆第21-25页
   ·苏云金杆菌杀虫晶体蛋白第25-32页
     ·杀虫晶体蛋白的结构与功能第25-30页
     ·杀虫晶体蛋白的作用机制第30-31页
     ·杀虫晶体蛋白的生物活性第31-32页
   ·苏云金芽胞杆菌在害虫防治中的应用第32-36页
     ·Bt工程菌第34-35页
     ·Bt转基因植物第35-36页
   ·研究目的及意义第36-38页
2. 材料与方法第38-49页
   ·材料与仪器第38-40页
     ·土样第38-39页
     ·菌株与质粒第39页
     ·培养基第39页
     ·试剂第39-40页
   ·仪器设备第40-41页
   ·研究方法第41-49页
     ·土样的采集方法第41页
     ·Bt菌株的分离第41页
     ·菌株的保存第41页
     ·Bt生理生化反应第41页
     ·Bt总DNA提取第41-42页
     ·Bt质粒DNA的提取第42页
     ·E.coli质粒DNA提取第42页
       ·PCR-RFLP鉴定Bt菌株cry基因第42-46页
     ·限制性内切酶酶切方法第46页
     ·DNA片段回收第46页
     ·DNA连接方法第46页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备第46页
     ·转化方法第46页
     ·DNA序列测定第46-47页
     ·序列分析采用的本地软件第47页
     ·目的基因在大肠杆菌中的表达第47页
     ·SDS-PAGE电泳分析第47页
     ·室内生物活性测定第47-49页
3. 结果与分析第49-91页
   ·Bt菌株的分离及伴胞晶体形态的多样性第49-50页
     ·Bt菌株的分离第49-50页
     ·Bt菌株伴胞晶体形态的多样性第50页
   ·Bt菌株基因型的鉴定及SDS-PAGE分析第50-58页
     ·苏云金芽胞杆菌cry基因的鉴定第50-56页
     ·苏云金芽胞杆菌晶体蛋白的SDS-PAGE分析第56-58页
   ·部分Bt菌株生物活性的初步检测第58页
   ·菌株BF-4和NJ-1的生物学特性研究第58-63页
     ·形态特征第58-59页
     ·生理生化反应第59页
     ·菌株BF-4及NJ-1的质粒图谱第59-60页
     ·菌株BF-4及NJ-1的cry基因的鉴定第60-61页
     ·菌株BF-4及NJ-1的SDS-PAGE分析第61-63页
     ·菌株BF-4和NJ-1的杀虫活性检测第63页
   ·cry9Ba2基因的克隆及序列分析第63-70页
     ·cry9Ba2基因的克隆第63-64页
     ·cry9Ba2基因的序列测定及分析第64-70页
   ·cry2Ab15基因的克隆和表达第70-79页
     ·cry2Ab15基因的克隆及序列分析第70-76页
     ·cry2Ab15基因在大肠杆菌中的表达第76-79页
   ·cry1Ib4基因的克隆及表达第79-91页
     ·cry1Ib4基因的克隆及序列分析第79-87页
     ·cry1Ib4在大肠杆菌中的表达第87-91页
4. 讨论第91-95页
   ·苏云金芽胞杆菌分布的一般规律第91页
   ·不同地域条件下Bt的基因型和伴胞晶体形态多样性的差异第91页
   ·苏云金芽胞杆菌的鉴定第91-92页
   ·苏云金芽胞杆菌的杀虫晶体蛋白第92-93页
   ·cry2Ab基因的特点及活性分析第93页
   ·Cry1I类蛋白的特点及cry1Ib基因的生物活性第93页
   ·Cry2及Cry1I类蛋白在延缓害虫产生抗性中的作用第93-94页
   ·展望第94-95页
5. 结论第95-97页
致谢第97-98页
参考文献第98-108页
附录 缩略词第108-109页
攻读学位期间发表的学术论文第109页

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