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稻瘟病生防菌Af1、Af4的初步研究

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 前言第11-40页
 1 文献综述第11-39页
   ·稻瘟病的综合防治第11-13页
   ·芽孢杆菌在植物病害生物防治中的应用和主要作用机制第13-23页
     ·生防细菌的研究历史及现状第13-17页
     ·枯草芽孢杆菌生防研究进展第17-19页
       ·国外枯草芽孢杆菌的研究状况第17-18页
       ·国内枯草芽孢杆菌的研究状况第18-19页
     ·芽孢杆菌生物防治主要作用机制第19-23页
       ·营养和空间位点的竞争第19-20页
       ·拮抗作用第20-21页
       ·寄生作用第21页
       ·诱导植物产生抗病性第21-22页
       ·促进植物生长第22-23页
   ·生物农药及其发展前景第23-29页
     ·生物农药第23-25页
       ·植物体生物农药第24-25页
       ·微生物体生物农药第25页
       ·动物体生物农药第25页
     ·生物化学农药第25-27页
       ·微生物性生化农药第25-26页
       ·植物性生化农药第26-27页
       ·动物性生化农药第27页
     ·转基因生物农药第27-28页
     ·生物农药的发展前景第28-29页
   ·芽孢杆菌抗菌蛋白的研究概况第29-39页
     ·前沿第29-31页
     ·抗菌蛋白的总种类及应用第31-37页
       ·动物的抗菌蛋白第31-32页
       ·植物抗菌肽第32-33页
       ·微生物抗菌肽第33-37页
     ·抗菌蛋白的分离与纯化第37页
     ·展望第37-39页
 2 研究目的和意义第39-40页
第二章 水稻稻瘟病拮抗菌的分离与鉴定第40-51页
 1 材料与方法第40-46页
   ·材料第40-43页
     ·主要试剂第40-41页
     ·主要仪器设备第41-42页
     ·主要培养基第42页
     ·试剂盒第42-43页
   ·方法第43-46页
     ·拮抗菌的分离第43页
     ·形态结构的观察第43页
     ·培养特征观察第43页
     ·生理生化实验第43-45页
       ·蔗糖水解试验第43页
       ·需氧性测定第43-44页
       ·淀粉水解第44页
       ·甲基红(M.R)反应第44页
       ·乙酰甲基甲醇试验(V-P试验)第44页
       ·硝酸还原试验第44页
       ·pH生长测定第44页
       ·耐盐性试验第44-45页
       ·明胶液化试验第45页
     ·拮抗菌Af1、Af4的16S rRNA鉴定第45-46页
       ·菌株Af1、Af4基因组DNA提取第45页
       ·PCR扩增第45-46页
       ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物第46页
       ·DNA片段的切胶纯化第46页
       ·序列分析第46页
 2 结果与分析第46-49页
   ·形态结构特征第46页
   ·培养特征第46-47页
   ·生理生化特征第47-48页
   ·PCR扩增结果第48-49页
   ·测序结果核苷酸序列同源性分析第49页
 3 小结与讨论第49-51页
   ·小结第49页
   ·讨论第49-51页
第三章 拮抗菌Af1、Af4的抗菌活性鉴定第51-63页
 1 材料和方法第51-54页
   ·材料第51页
     ·菌株第51页
     ·主要仪器设备第51页
   ·方法第51-54页
     ·菌株的活化第51-52页
       ·拮抗菌活化第51页
       ·病原真菌的活化第51-52页
     ·拮抗菌的液体培养第52页
     ·病原真菌的液体培养第52页
     ·拮抗菌Af1、Af4抗菌活性的测定第52-53页
       ·拮抗菌Af1、Af4对稻瘟病菌的抑制作用第52页
       ·拮抗菌Af1、Af4对稻瘟病菌菌丝生长的影响第52页
       ·拮抗菌Af1、Af4对稻瘟病菌孢子萌发的影响第52-53页
       ·拮抗菌Af1、Af4的抑菌谱实验第53页
     ·拮抗菌Af1、Af4发酵液的拮抗性测定第53-54页
       ·不同浓度的发酵液对稻瘟病菌的拮抗性测定第53页
       ·不同处理时间的发酵液对稻瘟病菌的拮抗性测定第53-54页
       ·不同pH值的发酵液对稻瘟病菌的拮抗性测定第54页
     ·实验数据分析第54页
 2 结果与分析第54-60页
   ·拮抗菌Af1、Af4对稻瘟病菌的抑制作用第54-55页
   ·拮抗菌Af1、Af4对稻瘟病菌菌丝生长的影响第55-56页
   ·拮抗菌Af1、Af4对稻瘟病菌孢子萌发的影响第56-57页
   ·拮抗菌Af1、Af4的抑菌谱实验第57-58页
   ·拮抗菌Af1、Af4发酵液的拮抗性测定第58-60页
     ·不同浓度的发酵液对稻瘟病菌的拮抗性测定第58-59页
     ·不同处理时间的发酵液对稻瘟病菌的拮抗性测定第59-60页
     ·不同pH值的发酵液对稻瘟病菌的拮抗性测定第60页
 3 小结与讨论第60-63页
   ·小结第60-61页
   ·讨论第61-63页
第四章 抗菌物质的初步研究第63-80页
 1 材料和方法第63-69页
   ·材料第63-64页
     ·相关试剂、缓冲液的配制第63-64页
     ·主要仪器设备第64页
   ·方法第64-69页
     ·粗提蛋白的获得以及活性检测第64-66页
       ·粗提蛋白的制备-(NH4)2SO4沉淀法第64-65页
       ·蛋白粗提物的活性检测第65页
       ·蛋白粗提物抑制稻瘟病菌黑色素形成的检测第65页
       ·SDS-PAGE检测第65-66页
     ·脂肽类抗生素分离纯化与活性检测第66-67页
       ·浓盐酸沉淀法获得脂肽类抗生素粗提物第66-67页
       ·脂肽类抗生素粗提物的活性检测第67页
     ·活性粗提物对温度、蛋白酶K的稳定性检测第67-68页
     ·脂肽类抗生素合成相关基因的克隆与测序第68-69页
       ·引物设计第68页
       ·菌株Af1、Af4基因组DNA提取第68页
       ·PCR扩增第68-69页
       ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物第69页
       ·DNA片段的切胶纯化第69页
       ·序列分析第69页
 2 结果与分析第69-80页
   ·拮抗菌Af1、Af4蛋白粗提物的活性检测第69-72页
     ·粗提物抑制黑色素的形成第69-70页
     ·拮抗菌Af1发酵液含有非蛋白类抗菌物质第70-71页
     ·对蛋白粗提物SDS-PAGE的检测结果第71-72页
   ·拮抗菌Af1、Af4抗生素粗提物质的活性检测第72-75页
     ·脂肽类抗生素粗提物抑制稻瘟病菌菌丝的生长第72-73页
     ·脂肽类抗生素粗提物质对温度、蛋白酶K的稳定性第73-75页
   ·脂肽类抗生素相关基因克隆测序第75-78页
     ·PCR扩增结果第75页
     ·测序结果同源性分析第75-76页
     ·氨基酸序列比较分析第76-78页
  3 小结与讨论第78-80页
   ·小结第78页
   ·讨论第78-80页
第五章 拮抗菌Af1、Af4发酵液对稻瘟病的防效测定第80-83页
 1 材料和方法第80-81页
   ·材料第80页
     ·水稻品种第80页
     ·培养基第80页
   ·实验方法第80-81页
     ·接种体的制备第80页
     ·水稻苗的种植第80页
     ·水稻叶片的离体接种第80-81页
 2 结果与分析第81-83页
3 小结与讨论第83-85页
   ·小结第83页
   ·讨论第83-85页
参考文献第85-92页
致谢第92-93页
附录第93-101页
 附录A 相关基因PCR扩增结果第93-95页
 附录B 实验中所用图表对映的数据第95-99页
 附录C 实验图片第99-101页

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