| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-22页 |
| ·柑橘黄龙病研究进展 | 第11-12页 |
| ·柑橘黄龙病检测技术研究进展 | 第12-16页 |
| ·生物学检测技术 | 第13页 |
| ·显微镜观察 | 第13页 |
| ·血清学检测技术 | 第13-14页 |
| ·DNA杂交技术 | 第14页 |
| ·PCR检测技术 | 第14-16页 |
| ·基于锁式探针的滚环扩增检测技术 | 第16-21页 |
| ·锁式探针及其扩增方式 | 第17页 |
| ·滚环扩增技术 | 第17-19页 |
| ·锁式探针及滚环扩增技术的运用 | 第19-20页 |
| ·基于锁式探针的滚环扩增技术的优缺点及前景 | 第20-21页 |
| ·研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-31页 |
| ·CTAB法提取总核酸 | 第22-23页 |
| ·总RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·PCR检测 | 第24-26页 |
| ·扩增引物 | 第24页 |
| ·反转录 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增体系 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| ·基因克隆 | 第26-28页 |
| ·目标片段的回收与纯化 | 第26页 |
| ·目标片段与载体的连接 | 第26-27页 |
| ·热激转化大肠杆菌DH5α感受态细胞 | 第27页 |
| ·PCR法筛选阳性克隆 | 第27-28页 |
| ·柑橘HLB病菌锁式探针及扩增引物的设计 | 第28-29页 |
| ·滚环扩增检测体系的建立及优化 | 第29-31页 |
| ·连接反应 | 第29页 |
| ·消化反应 | 第29页 |
| ·分支滚环式扩增反应(HRCA) | 第29-30页 |
| ·滚环扩增体系的优化 | 第30页 |
| ·滚环扩增检测的特异性 | 第30页 |
| ·滚环扩增检测的灵敏度 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-40页 |
| ·柑橘黄龙病常规PCR检测 | 第31-33页 |
| ·滚环扩增体系的优化 | 第33-34页 |
| ·滚环扩增检测的特异性及灵敏度 | 第34-36页 |
| ·柑橘HLB,CTV,CEVd的多重PCR检测体系的建立 | 第36-40页 |
| ·柑橘HLB,CTV,CEVd单一RT-PCR检测结果 | 第36-37页 |
| ·柑橘HLB,CTV,CEVd的多重RT-PCR检测体系的研究 | 第37-39页 |
| ·HLB,CTV二重RT-PCR技术建立 | 第37-38页 |
| ·HLB,CTV多重RT-PCR检测体系的实际应用 | 第38-39页 |
| ·柑橘HLB,CTV,CEVd多重RT-PCR检测体系的研究 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| ·柑橘HLB常规PCR检测 | 第40页 |
| ·锁式探针的设计及滚环扩增体系的优化 | 第40-41页 |
| ·柑橘HLB滚环扩增检测体系的特异性与灵敏度 | 第41页 |
| ·柑橘HLB,CTV和CEVd的多重RT-PCR检测体系的建立 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 附录:主要试剂及溶液配制 | 第49-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
