| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 英文缩略词 | 第10-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-34页 |
| 1.1 Vtg | 第17-28页 |
| 1.1.1 Vtg的发现 | 第17页 |
| 1.1.2 多基因体系 | 第17-20页 |
| 1.1.3 Yp的生成途径 | 第20-23页 |
| 1.1.3.1 Yp积累的一般模式——外源合成 | 第20-21页 |
| 1.1.3.2 Yp的内源合成 | 第21-23页 |
| 1.1.4 两次成熟性降解与“新功能化” | 第23-26页 |
| 1.1.4.1 Vtg蛋白的纯化与鉴定 | 第23页 |
| 1.1.4.2 第一次成熟性降解 | 第23-24页 |
| 1.1.4.3 第二次成熟性降解与“新功能化” | 第24-26页 |
| 1.1.5 vtg基因的表达调控 | 第26-28页 |
| 1.1.5.1 雌激素与vtg基因的表达 | 第26页 |
| 1.1.5.2 雌激素之外的其他因素与vtg基因的表达 | 第26-27页 |
| 1.1.5.3 雌激素样内分泌干扰物的生物标志物 | 第27-28页 |
| 1.2 Vtg相关受体 | 第28-32页 |
| 1.2.1 LR8- | 第28-31页 |
| 1.2.2 LRP13 | 第31-32页 |
| 1.3 大菱鲆Vtg研究背景 | 第32-33页 |
| 1.4 本研究的意义与目的 | 第33-34页 |
| 第二章 繁殖期大菱鲆卵子发生及卵巢分期 | 第34-47页 |
| 2.1 前言 | 第34-35页 |
| 2.2 材料与方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第35页 |
| 2.2.2 实验试剂和仪器 | 第35页 |
| 2.2.3 组织学观察 | 第35-37页 |
| 2.2.4 血清E_2的测定 | 第37页 |
| 2.2.5 数据处理与分析 | 第37页 |
| 2.3 结果 | 第37-45页 |
| 2.3.1 繁殖期大菱鲆卵子生成过程 | 第37-42页 |
| 2.3.1.1 卵黄积累之前的变化 | 第38-40页 |
| 2.3.1.2 卵黄积累、成熟与退化 | 第40-42页 |
| 2.3.2 以卵子生成为依据的卵巢分期 | 第42-43页 |
| 2.3.3 繁殖期雌性大菱鲆的生理指标 | 第43-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 大菱鲆Vtg多基因体系和卵黄生成内外源途径分析 | 第47-77页 |
| 3.1 前言 | 第47-48页 |
| 3.2 材料与方法 | 第48-57页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第48页 |
| 3.2.2 实验试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 3.2.3 肝脏和卵巢组织E2测定 | 第49-50页 |
| 3.2.4 大菱鲆3个vtg基因c DNA全长的克隆 | 第50-52页 |
| 3.2.5 序列分析 | 第52页 |
| 3.2.6 荧光定量PCR分析组织特异性分布及在肝脏和卵巢中的表达模式 | 第52-54页 |
| 3.2.7 原位杂交实验分析vtg基因在大菱鲆卵巢组织中的表达定位 | 第54-56页 |
| 3.2.8 免疫组化实验分析卵巢组织Vtg的合成 | 第56-57页 |
| 3.2.9 数据分析 | 第57页 |
| 3.3 结果 | 第57-73页 |
| 3.3.1 vtg基因c DNA全长及其结构分析 | 第57-58页 |
| 3.3.2 相似性与进化分析 | 第58-66页 |
| 3.3.3 3个vtg基因mRNA的组织特异性分布分析 | 第66页 |
| 3.3.4 繁殖期雌性大菱鲆肝脏和卵巢组织的E2水平 | 第66-69页 |
| 3.3.5 繁殖期雌性大菱鲆肝脏和卵巢中vtg基因的表达趋势 | 第69-70页 |
| 3.3.6 卵巢中vtg基因及其蛋白的表达定位 | 第70-73页 |
| 3.4 讨论 | 第73-77页 |
| 第四章 大菱鲆Vtg体外重组及外源合成、转运、积累模式初探 | 第77-93页 |
| 4.1 前言 | 第77-78页 |
| 4.2 材料与方法 | 第78-81页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第78页 |
| 4.2.2 实验试剂和仪器 | 第78页 |
| 4.2.3 大菱鲆VtgAa、VtgAb、VtgC结构分析 | 第78-79页 |
| 4.2.4 VtgAa和 VtgAb抗体制备 | 第79-80页 |
| 4.2.4.1 VtgAa和 VtgAb分段表达 | 第79-80页 |
| 4.2.4.2 蛋白纯化及抗体制备 | 第80页 |
| 4.2.5 Western blot鉴定各组织Vtg及 Yps | 第80-81页 |
| 4.3 结果 | 第81-88页 |
| 4.3.1 大菱鲆VtgAa、VtgAb、VtgC结构分析 | 第81-86页 |
| 4.3.2 抗体的制备及特异性检验 | 第86-87页 |
| 4.3.3 大菱鲆A类 Vtg在肝脏、血清、水合前卵巢以及成熟卵子中的分子量鉴定 | 第87-88页 |
| 4.3.4 繁殖期大菱鲆肝脏、血清以及卵巢中Vtg的动态变化 | 第88页 |
| 4.3.5 体内老化卵子Yp降解分析 | 第88页 |
| 4.4 讨论 | 第88-93页 |
| 第五章 大菱鲆卵黄蛋白原外源途径内吞相关受体的表达模式研究 | 第93-113页 |
| 5.1 前言 | 第93-94页 |
| 5.2 材料与方法 | 第94-97页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第94页 |
| 5.2.2 实验试剂和仪器 | 第94页 |
| 5.2.3 受体基因cDNA全长的克隆 | 第94-95页 |
| 5.2.4 序列分析 | 第95-96页 |
| 5.2.5 qRT-PCR分析受体基因组织特异性分布及在性腺中的表达模式 | 第96-97页 |
| 5.2.6 原位杂交实验分析受体基因在大菱鲆卵巢组织中的表达定位 | 第97页 |
| 5.2.7 数据分析 | 第97页 |
| 5.3 结果 | 第97-109页 |
| 5.3.1 受体基因结构与进化分析 | 第97-103页 |
| 5.3.2 受体mRNA组织特异性分布分析 | 第103-104页 |
| 5.3.3 繁殖期大菱鲆性腺中受体基因的表达趋势 | 第104-106页 |
| 5.3.4 繁殖期卵巢中erβ1和erβ2 的表达趋势 | 第106-107页 |
| 5.3.5 卵巢中受体基因的表达定位 | 第107-109页 |
| 5.4 讨论 | 第109-113页 |
| 第六章 结论与展望 | 第113-115页 |
| 6.1 结论 | 第113-114页 |
| 6.2 展望 | 第114-115页 |
| 参考文献 | 第115-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 作者简历 | 第134-135页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第135页 |
