中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略语/符号说明Ⅺ | 第14-15页 |
前言 | 第15-21页 |
研究现状、成果 | 第15-19页 |
研究目的、方法 | 第19-21页 |
一、IKBKE调控YAP1、miR-Let-7b/i表达水平的体外研究 | 第21-55页 |
1.1 对象和材料 | 第21-26页 |
1.1.1 实验细胞系 | 第21页 |
1.1.2 实验材料 | 第21-26页 |
1.1.2.1 实验试剂 | 第21-24页 |
1.1.2.2 实验仪器 | 第24-25页 |
1.1.2.3 实验耗材 | 第25-26页 |
1.2 实验方法 | 第26-42页 |
1.2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
1.2.2 慢病毒转染细胞 | 第27-28页 |
1.2.3 蛋白提取 | 第28-30页 |
1.2.4 蛋白浓度测定 | 第30页 |
1.2.5 免疫蛋白印迹(Western blot)实验 | 第30-32页 |
1.2.6 细胞RNA提取及浓度测定 | 第32-34页 |
1.2.7 RNA反转录及RT-PCR操作 | 第34-35页 |
1.2.8 细胞增殖CCK-8实验 | 第35-36页 |
1.2.9 Transwell实验 | 第36-37页 |
1.2.10 免疫荧光实验 | 第37-38页 |
1.2.11 质粒提取及浓度测定 | 第38-41页 |
1.2.12 细胞质粒转染 | 第41页 |
1.2.13 所用统计学方法 | 第41-42页 |
1.3 实验结果 | 第42-52页 |
1.3.1 IKBKE shRNA慢病毒能够降低IKBKE基因表达 | 第42-43页 |
1.3.2 敲低IKBKE基因能够抑制胶质母细胞瘤细胞增值能力 | 第43-46页 |
1.3.3 敲低IKBKE基因能够下调YAP1蛋白表达 | 第46-49页 |
1.3.4 敲低IKBKE基因能够增加miR-Let-7b/i表达水平 | 第49-50页 |
1.3.5 过表达IKBKE基因能够升高YAP1蛋白表达水平 | 第50-51页 |
1.3.6 过表达IKBKE基因能够降低miR-Let-7b/i表达水平 | 第51-52页 |
1.4 讨论 | 第52-54页 |
1.5 小结 | 第54-55页 |
二、YAP1调控miR-Let-7b/i表达水平的体外研究 | 第55-63页 |
2.1 对象和材料 | 第55页 |
2.1.1 实验细胞系 | 第55页 |
2.1.2 实验材料 | 第55页 |
2.1.2.1 实验试剂 | 第55页 |
2.1.2.2 实验仪器 | 第55页 |
2.1.2.3 实验耗材 | 第55页 |
2.2 实验方法 | 第55-56页 |
2.2.1 细胞siRNA转染 | 第55-56页 |
2.3 实验结果 | 第56-61页 |
2.3.1 YAP1 siRNA敲低YAP1基因效果筛选 | 第56-58页 |
2.3.2 敲低YAP1基因能够上调miR-Let-7b/i表达水平 | 第58-59页 |
2.3.3 过表达YAP1基因能够降低miR-Let-7b/i表达水平 | 第59-61页 |
2.4 讨论 | 第61-62页 |
2.5 小结 | 第62-63页 |
三、miR-Let-7b/i调控IKBKE表达水平的体外研究 | 第63-67页 |
3.1 对象和材料 | 第63页 |
3.1.1 实验试剂 | 第63页 |
3.2 实验方法 | 第63页 |
3.2.1 细胞mimics转染 | 第63页 |
3.3 实验结果 | 第63-66页 |
3.3.1 miR-Let-7b mimics、miR-Let-7i mimic能够升高miR-Let-7b、miR-Let-7i表达水平 | 第63-64页 |
3.3.2 过表达miR-Let-7b、miR-Let-7i能够降低IKBKE、YAP1表达水平 | 第64-66页 |
3.4 讨论 | 第66页 |
3.5 小结 | 第66-67页 |
结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第74-75页 |
综述 LIN28/Let-7途径在肿瘤中的研究进展 | 第75-87页 |
综述参考文献 | 第83-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
个人简历 | 第88页 |