| 摘要 | 第11-13页 |
| 英文摘要 | 第13-15页 |
| 1 引言 | 第16-34页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 1.2 全球干旱、高温现状 | 第17-18页 |
| 1.3 植物抗旱耐热的生理学研究 | 第18-22页 |
| 1.3.1 旱热胁迫对植物光合作用的影响 | 第18-19页 |
| 1.3.2 旱热胁迫对植物呼吸作用的影响 | 第19-20页 |
| 1.3.3 旱热胁迫对植物生理特性的影响 | 第20-22页 |
| 1.4 植物抗旱耐热的基因组学研究 | 第22-30页 |
| 1.4.1 旱热胁迫信号感知及传递途径 | 第22-24页 |
| 1.4.2 植物转录因子对旱热胁迫响应的调控 | 第24-26页 |
| 1.4.3 植物转录水平对旱热胁迫的响应 | 第26-30页 |
| 1.5 植物抗旱耐热的蛋白质组学研究 | 第30-34页 |
| 1.5.1 蛋白质组学简述 | 第30页 |
| 1.5.2 植物蛋白质组学对旱热胁迫的响应 | 第30-32页 |
| 1.5.3 蛋白质组学与转录组学关联分析的意义 | 第32-34页 |
| 技术路线图 | 第34-36页 |
| 2 材料与方法 | 第36-47页 |
| 2.1 大豆抗旱性鉴定试验 | 第36-39页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第36页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第36-37页 |
| 2.1.3 测定指标及方法 | 第37-38页 |
| 2.1.4 抗旱性评价方法 | 第38-39页 |
| 2.2 干旱、高温及旱热共胁迫下大豆叶片生理指标检测试验 | 第39页 |
| 2.2.1 供试材料 | 第39页 |
| 2.2.2 试验方法 | 第39页 |
| 2.2.3 测定项目及方法 | 第39页 |
| 2.3 干旱、高温及旱热共胁迫下大豆叶片差异表达基因分析试验 | 第39-44页 |
| 2.3.1 试验材料与处理 | 第39-40页 |
| 2.3.2 总RNA的提取 | 第40页 |
| 2.3.3 cDNA文库的构建及测序 | 第40-41页 |
| 2.3.4 将序列比对到大豆参考基因组 | 第41页 |
| 2.3.5 差异表达基因定量与筛选 | 第41-42页 |
| 2.3.6 差异表达基因功能分析 | 第42-43页 |
| 2.3.7 差异表达基因的转录因子分析 | 第43页 |
| 2.3.8 实时荧光定量PCR试验 | 第43-44页 |
| 2.4 干旱胁迫下大豆叶片差异蛋白分析试验 | 第44-47页 |
| 2.4.1 试验材料与处理 | 第44页 |
| 2.4.2 蛋白提取 | 第44-45页 |
| 2.4.3 蛋白质浓度测定 | 第45页 |
| 2.4.4 SDS-PAGE电泳 | 第45页 |
| 2.4.5 蛋白质酶解 | 第45页 |
| 2.4.6 肽段标记及分离 | 第45页 |
| 2.4.7 LC-MS/MS | 第45-46页 |
| 2.4.8 蛋白数据库搜索鉴定 | 第46页 |
| 2.4.9 蛋白质IBT定量 | 第46页 |
| 2.4.10 数据分析 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-120页 |
| 3.1 大豆芽期抗旱性评价 | 第47-54页 |
| 3.1.1 不同浓度PEG处理对大豆芽期的影响 | 第47-49页 |
| 3.1.2 芽期抗旱性综合评价分析 | 第49-54页 |
| 3.2 大豆苗期抗旱性评价 | 第54-60页 |
| 3.2.1 干旱胁迫后幼苗存活率 | 第54-57页 |
| 3.2.2 苗期抗旱性综合评价分析 | 第57-60页 |
| 3.2.3 苗期抗旱各指标间的相关性 | 第60页 |
| 3.3 干旱、高温及旱热共胁迫对大豆叶片生理特性的影响 | 第60-62页 |
| 3.3.1 干旱、高温及旱热共胁迫对叶片超氧化物歧化酶活性的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.2 干旱、高温及旱热共胁迫对叶片脯氨酸含量的影响 | 第61页 |
| 3.3.3 干旱、高温及旱热共胁迫对叶片丙二醛含量的影响 | 第61页 |
| 3.3.4 干旱、高温及旱热共胁迫对叶片可溶性糖含量的影响 | 第61-62页 |
| 3.3.5 基因表达分析试验胁迫处理最佳时间的选择 | 第62页 |
| 3.4 大豆叶片干旱、高温及旱热共胁迫转录表达谱分析 | 第62-101页 |
| 3.4.1 RNA-seq数据质量统计 | 第62-65页 |
| 3.4.2 干旱、高温及旱热共胁迫差异表达基因分析 | 第65-66页 |
| 3.4.3 关键高温响应基因分析 | 第66-75页 |
| 3.4.4 关键干旱响应基因分析 | 第75-81页 |
| 3.4.5 旱热共胁迫响应基因分析 | 第81-84页 |
| 3.4.6 干旱、高温及旱热共胁迫响应的转录因子分析 | 第84-88页 |
| 3.4.7 实时荧光定量PCR验证 | 第88-89页 |
| 3.4.8 干旱胁迫下生理指标相关差异表达基因分析 | 第89-91页 |
| 3.4.9 干旱胁迫下植物激素信号转导相关差异表达基因分析 | 第91-97页 |
| 3.4.10 干旱胁迫下转录因子与植物激素信号转导途径相关差异表达基因CNC共表达分析 | 第97-101页 |
| 3.5 大豆叶片干旱胁迫蛋白质组学分析 | 第101-120页 |
| 3.5.1 蛋白鉴定基本信息 | 第101-103页 |
| 3.5.2 差异蛋白统计 | 第103-104页 |
| 3.5.3 GO分析 | 第104-110页 |
| 3.5.4 COG分析 | 第110页 |
| 3.5.5 KEGG分析 | 第110-113页 |
| 3.5.6 参与干旱胁迫响应调控差异表达蛋白分析 | 第113-117页 |
| 3.5.7 转录组和蛋白质组关联分析 | 第117-120页 |
| 4 讨论 | 第120-135页 |
| 4.1 干旱胁迫对大豆抗旱性的影响 | 第120-121页 |
| 4.2 干旱、高温及旱热共胁迫下叶片差异表达基因的特性 | 第121-125页 |
| 4.2.1 干旱、高温及旱热共胁迫下叶片差异表达基因的响应 | 第121-123页 |
| 4.2.2 干旱、高温及旱热共胁迫下差异表达转录因子的响应 | 第123-125页 |
| 4.3 大豆叶片响应干旱胁迫重要差异表达基因的特性 | 第125-130页 |
| 4.3.1 大豆叶片响应干旱胁迫生理特性与差异表达基因的关联分析 | 第125页 |
| 4.3.2 大豆叶片响应干旱胁迫植物激素信号转导途径的特性 | 第125-127页 |
| 4.3.3 大豆叶片响应干旱胁迫转录因子与植物激素信号转导的共表达分析 | 第127-130页 |
| 4.4 干旱胁迫下大豆叶片差异表达蛋白质的特性 | 第130-132页 |
| 4.5 干旱胁迫下大豆叶片转录组和蛋白组关联分析 | 第132-135页 |
| 5 结论 | 第135-136页 |
| 致谢 | 第136-137页 |
| 参考文献 | 第137-159页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第159页 |
