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沙眼衣原体感染过程中的免疫识别和免疫逃逸机理研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
缩略词第10-15页
前言第15-22页
    参考文献第18-22页
第一章 沙眼衣原体感染诱导RIG-Ⅰ表达第22-49页
    引言第22-24页
    1.1 实验材料第24-26页
        1.1.1 细胞系及细胞培养第24页
        1.1.2 细菌第24页
        1.1.3 抗体第24-25页
        1.1.4 核酸操作及检测试剂盒第25页
        1.1.5 其他主要试剂第25页
        1.1.6 实验仪器第25页
        1.1.7 耗材第25-26页
    1.2 实验方法第26-32页
        1.2.1 细胞培养和细菌的增殖培养第26页
        1.2.2 CT滴度测定第26-27页
        1.2.3 CT感染实验第27页
        1.2.4 细胞总RNA提取第27页
        1.2.5 RNA逆转录第27页
        1.2.6 聚合酶链式反应(PCR)第27-28页
        1.2.7 实时荧光定量PCR(qPCR)第28-29页
        1.2.8 免疫印迹第29页
        1.2.9 免疫荧光第29-30页
        1.2.10 细菌核酸的提取第30页
        1.2.11 细胞转染第30-32页
    1.3 实验结果第32-42页
        1.3.1 CT感染时诱导干扰素通路基因表达第32-33页
        1.3.2 CT感染强烈诱导RIG-Ⅰ的表达第33-35页
        1.3.3 RIG-Ⅰ的诱导表达不依赖于衣原体复制第35-36页
        1.3.4 CT核酸提取物特异性诱导RIG-Ⅰ第36-38页
        1.3.5 衣原体DNA通过Pol Ⅲ诱导RIG-Ⅰ第38-39页
        1.3.6 RIG-Ⅰ表达对CT感染无明显抑制作用,但是抑制RIG-Ⅰ表达可以降低衣原体诱导的干扰素调控通路的基因表达第39-42页
    1.4 讨论第42-44页
    1.5 小结第44-45页
    参考文献第45-49页
第二章 沙眼衣原体裂解MAVS蛋白研究第49-71页
    引言第49-51页
    2.1 实验材料第51-52页
        2.1.1 细胞培养第51页
        2.1.2 细菌第51页
        2.1.3 抗体及试剂第51页
        2.1.4 表达质粒第51-52页
    2.2 实验方法第52-55页
        2.2.1 CT感染与纯化第52页
        2.2.2 HA-MAVS、GST-p65蛋白制备第52页
        2.2.3 CT蛋白酶制备第52页
        2.2.4 CPAF抗体制备第52-53页
        2.2.5 免疫耗竭第53页
        2.2.6 体外裂解实验第53页
        2.2.7 免疫印迹第53页
        2.2.8 荧光素酶双报告基因实验第53-55页
    2.3 实验结果第55-65页
        2.3.1 CT特异性切割干扰素通路中重要接头蛋白MAVS第55-56页
        2.3.2 CT感染过程中MAVS切割情况分析第56-59页
        2.3.3 裂解MAVS的CT蛋白酶初步鉴定第59-62页
        2.3.4 MAVS切割位点确定第62-63页
        2.3.5 MAVS切割产物失去活化IFN通路能力第63-65页
    2.4 讨论第65-67页
    2.5 结论第67-68页
    参考文献第68-71页
全文总结第71-72页
第三章 综述第72-100页
    3.1 沙眼衣原体感染与天然免疫模式识别受体第72-81页
        3.1.1 沙眼衣原体简介第72-73页
        3.1.2 识别CT感染的天然模式识别受体第73-78页
            3.1.2.1 TLRs与沙眼衣原体第74-76页
            3.1.2.2 NLRs与沙眼衣原体第76-77页
            3.1.2.3 沙眼衣原体与其他免疫识别受体第77-78页
        3.1.3 衣原体蛋白酶CPAF与宿主免疫调控通路第78-81页
    3.2 RIG-Ⅰ/MAVS通路的组成与功能第81-87页
        3.2.1 RIG-Ⅰ的结构和功能第81-84页
        3.2.2 RIG-Ⅰ的配体第84-87页
    参考文献第87-100页
致谢第100-101页
附录第101-102页

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