| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-36页 |
| 1 胡萝卜 | 第16-17页 |
| 1.1 胡萝卜的起源、驯化与栽培 | 第16页 |
| 1.2 胡萝卜的生物学特性 | 第16-17页 |
| 1.2.1 胡萝卜的植物学特征 | 第16页 |
| 1.2.2 胡萝卜的生长发育特性与环境要求 | 第16-17页 |
| 1.3 胡萝卜的类型 | 第17页 |
| 1.4 胡萝卜的营养成分 | 第17页 |
| 2 类胡萝卜素 | 第17-26页 |
| 2.1 类胡萝卜素的生物合成 | 第18-21页 |
| 2.1.1 类胡萝卜素前体的合成 | 第18-19页 |
| 2.1.2 胡萝卜素和叶黄素的合成 | 第19-21页 |
| 2.2 类胡萝卜素的降解 | 第21-22页 |
| 2.3 类胡萝卜素合成的调控 | 第22-26页 |
| 2.3.1 PSY的调控 | 第22-23页 |
| 2.3.2 类胡萝卜素的脱氢 | 第23-24页 |
| 2.3.3 类胡萝卜素的异构化 | 第24页 |
| 2.3.4 番茄红素的环化分支 | 第24-25页 |
| 2.3.5 叶黄素的生物合成 | 第25-26页 |
| 3 类胡萝卜素在植物发育中的作用 | 第26-28页 |
| 3.1 类胡萝卜素对光合和光保护系统中的作用 | 第27页 |
| 3.2 类胡萝卜素和光形态建成 | 第27页 |
| 3.3 类胡萝卜素衍生信号子 | 第27-28页 |
| 4 园艺作物中类胡萝卜素的积累 | 第28-31页 |
| 4.1 类胡萝卜素在蔬菜中的积累 | 第28-29页 |
| 4.2 类胡萝卜素在水果中的积累 | 第29-30页 |
| 4.3 类胡萝卜素在花卉中的积累 | 第30-31页 |
| 5 类胡萝卜素对人类健康的作用 | 第31-33页 |
| 5.1 类胡萝卜素的吸收和转运 | 第31页 |
| 5.2 类胡萝卜素的抗氧化性 | 第31-32页 |
| 5.3 类胡萝卜素对疾病的影响 | 第32-33页 |
| 6 漆酶的研究进展 | 第33页 |
| 7 本研究的目的和意义 | 第33-36页 |
| 第二章 不同颜色胡萝卜中类胡萝卜素含量及合成途径相关基因的表达分析 | 第36-54页 |
| 1 引言 | 第37-40页 |
| 2 材料与方法 | 第40-42页 |
| 2.1 植物材料和生长条件 | 第40页 |
| 2.2 类胡萝卜素的提取和测定 | 第40页 |
| 2.3 总RNA的提取 | 第40页 |
| 2.4 反转录cDNA | 第40-41页 |
| 2.5 实时定量PCR分析及引物设计 | 第41-42页 |
| 2.6 数据统计分析 | 第42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-50页 |
| 3.1 六种不同品种胡萝卜根在三个生长阶段的表型 | 第42-43页 |
| 3.2 六种不同品种胡萝卜根在三个生长阶段的类胡萝卜素含量 | 第43-45页 |
| 3.3 六种不同品种胡萝卜根在三个生长阶段的类胡萝卜素生物合成途径相关基因的表达量的测定 | 第45-50页 |
| 3.4 三种橙色品种胡萝卜根在三个生长阶段的α-/β-胡萝卜素比值 | 第50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-54页 |
| 第三章 基于胡萝卜根和叶转录组分析类胡萝卜素代谢机制 | 第54-78页 |
| 1 引言 | 第55-56页 |
| 2 材料与方法 | 第56-59页 |
| 2.1 植物材料和RNA提取 | 第56-57页 |
| 2.2 转录组的测序和组装 | 第57页 |
| 2.3 胡萝卜基因功能注释和分类 | 第57-58页 |
| 2.4 差异基因表达分析 | 第58页 |
| 2.5 类胡萝卜素的提取和测定 | 第58页 |
| 2.6 实时定量PCR | 第58-59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-75页 |
| 3.1 胡萝卜叶和根中的类胡萝卜素含量差异 | 第59-62页 |
| 3.2 转录组测序和拼接组装 | 第62-63页 |
| 3.3 Unigene功能注释和分类 | 第63-69页 |
| 3.3.1 Nr、Nt和Swiss-Prot注释 | 第63-65页 |
| 3.3.2 COG注释分类 | 第65-66页 |
| 3.3.3 GO注释分类 | 第66-67页 |
| 3.3.4 KEGG途径注释分类 | 第67-69页 |
| 3.4 类胡萝卜素生物合成差异表达基因的表达分析 | 第69-75页 |
| 3.4.1 类胡萝卜素生物合成DEGs的转录水平 | 第69-74页 |
| 3.4.2 类胡萝卜素生物合成DEGs的qRT-PCR测定 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-76页 |
| 5 结论 | 第76-78页 |
| 第四章 基于胡萝卜叶和根ITRAQ蛋白质组对类胡萝卜素裂解酶的调控研究 | 第78-92页 |
| 1 引言 | 第79-80页 |
| 2 材料与方法 | 第80-82页 |
| 2.1 植物材料和RNA提取及反转录cDNA | 第80页 |
| 2.2 蛋白质的提取 | 第80页 |
| 2.3 胰蛋白酶消化 | 第80页 |
| 2.4 iRAQ标记 | 第80页 |
| 2.5 强阳离子交换多肽片段分离(SCX) | 第80-81页 |
| 2.6 LC-MS/MS分析 | 第81页 |
| 2.7 蛋白数据库搜索和定量分析 | 第81页 |
| 2.8 胡萝卜CCD基因的氨基酸序列分析 | 第81页 |
| 2.9 实时定量PCR | 第81-82页 |
| 3 结果与分析 | 第82-89页 |
| 3.1 胡萝卜叶和根蛋白质功能的GO注释与分类 | 第82-84页 |
| 3.2 胡萝卜叶和根蛋白质功能的KEGG注释与分类 | 第84-86页 |
| 3.3 胡萝卜叶和根蛋白质差异蛋白分析 | 第86-87页 |
| 3.4 胡萝卜CCD蛋白的进化分析 | 第87-88页 |
| 3.5 胡萝卜CCD基因在叶和根中的表达分析 | 第88-89页 |
| 4 讨论 | 第89-90页 |
| 5 结论 | 第90-92页 |
| 第五章 胡萝卜中胡萝卜素羟化酶基因功能的转基因研究 | 第92-108页 |
| 1 引言 | 第93-94页 |
| 2 材料与方法 | 第94-100页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第94-95页 |
| 2.2 总RNA的提取和cDNA的反转录 | 第95页 |
| 2.3 黑田五寸和黄石品种CHXB2、CYP97A3和CHXE基因的克隆 | 第95页 |
| 2.4 目的片段的回收与连接 | 第95页 |
| 2.5 转化大肠杆菌和阳性菌株的鉴定 | 第95-96页 |
| 2.6 胡萝卜DcCHKB、DcCYP97A3和CHXE基因的氨基酸序列分析 | 第96页 |
| 2.7 质粒的提取 | 第96页 |
| 2.8 胡萝卜CHXB2、CYP97A3和CHXE转基因植物表达载体的构建 | 第96-97页 |
| 2.9 植物表达载体的农杆菌转化 | 第97-98页 |
| 2.9.1 农杆菌感受态的制备 | 第97-98页 |
| 2.9.2 农杆菌的电击转化与阳性菌株的筛选 | 第98页 |
| 2.10 胡萝卜遗传转化与培养 | 第98-100页 |
| 2.10.1 B_5培养基的配制 | 第98-99页 |
| 2.10.2 外植体的培养 | 第99页 |
| 2.10.3 农杆菌侵染 | 第99页 |
| 2.10.4 愈伤组织和转基因再生植株的培养 | 第99-100页 |
| 2.11 GUS染色 | 第100页 |
| 3 结果与分析 | 第100-105页 |
| 3.1 胡萝卜CHXB2、CYP97A3和CHE基因的克隆 | 第100-101页 |
| 3.2 伞形科胡萝卜素羟化酶的序列分析 | 第101-102页 |
| 3.3 胡萝卜胡萝卜素羟化酶的进化分析 | 第102-103页 |
| 3.4 胡萝卜CHXB2、CYP97A3和CHXE的转基因植株的获得 | 第103-104页 |
| 3.5 转基因胡萝卜植株GUS染色验证 | 第104-105页 |
| 4 讨论 | 第105-107页 |
| 5 结论 | 第107-108页 |
| 第六章 胡萝卜漆酶的分离、纯化和鉴定及其对非生物和金属离子胁迫的响应 | 第108-120页 |
| 1 引言 | 第109-110页 |
| 2 材料与方法 | 第110-112页 |
| 2.1 植物材料、生长条件和逆境处理 | 第110页 |
| 2.2 总RNA的提取和反转录cDNA | 第110页 |
| 2.3 胡萝卜漆酶基因的克隆和载体构建 | 第110页 |
| 2.4 胡萝卜漆酶的表达和纯化 | 第110-111页 |
| 2.5 胡萝卜漆酶酶活性分析和不同参数的影响 | 第111页 |
| 2.6 实时定量PCR | 第111-112页 |
| 3 结果与分析 | 第112-117页 |
| 3.1 胡萝卜漆酶基因的克隆 | 第112页 |
| 3.2 胡萝卜漆酶蛋白的纯化和酶动力学参数分析 | 第112-113页 |
| 3.3 温度和pH对胡萝卜漆酶活性的影响 | 第113-114页 |
| 3.4 金属离子和抑制剂对胡萝卜漆酶的影响 | 第114-115页 |
| 3.5 胡萝卜漆酶基因在非生物胁迫下的表达谱 | 第115-116页 |
| 3.6 金属离子胁迫下胡萝卜漆酶基因的表达谱 | 第116-117页 |
| 4 讨论 | 第117-119页 |
| 5 结论 | 第119-120页 |
| 全文结论 | 第120-122页 |
| 创新点 | 第122-124页 |
| 参考文献 | 第124-158页 |
| 附录 | 第158-176页 |
| 硕博连读期间论文发表情况 | 第176-178页 |
| 致谢 | 第178页 |
