| 摘要 | 第8-11页 |
| ABSTRACT | 第11-14页 |
| 缩略词表 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-29页 |
| 1 种子劣变的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.1 种子劣变的影响因素 | 第17-19页 |
| 1.2 种子劣变的生理机制研究进展 | 第19-20页 |
| 1.3 种子劣变的分子机制研究进展 | 第20-21页 |
| 2 植物基质金属蛋白酶(MMPs)的研究进展 | 第21-26页 |
| 2.1 MMPs的分类及一般特征 | 第21页 |
| 2.2 植物MMPs的发现、分布与命名 | 第21-23页 |
| 2.3 植物MMPs的结构 | 第23-24页 |
| 2.4 植物MMPs的活性调节 | 第24-25页 |
| 2.5 植物MMPs参与发育调控 | 第25-26页 |
| 2.6 植物MMPs参与生物与非生物逆境胁迫响应 | 第26页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第26-29页 |
| 第二章 Gm1-MMP和Gm2-MMP基因的分离及其蛋白的亚细胞定位 | 第29-57页 |
| 1 材料与方法 | 第29-43页 |
| 1.1 实验材料 | 第29-31页 |
| 1.2 实验方法 | 第31-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-53页 |
| 2.1 大豆叶片总RNA的提取与cDNA质量检测 | 第43-44页 |
| 2.2 大豆总DNA的提取 | 第44页 |
| 2.3 Gm1-MMP基因的分离 | 第44-45页 |
| 2.4 Gm2-MMP基因的分离 | 第45页 |
| 2.5 Gm1-MMP基因的启动子的分离及功能区的缺失分析 | 第45-49页 |
| 2.6 Gm1-MMP和Gm2-MMP基因的生物信息学分析 | 第49-51页 |
| 2.7 Gm1-MMP和Gm2-MMP的亚细胞定位 | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-57页 |
| 3.1 Gm1-MMP和Gm2-MMP的基本特征分析 | 第53-54页 |
| 3.2 Gm1-MMP基因启动子的结构与功能分析 | 第54-55页 |
| 3.3 Gm1-MMP和Gm2-MMP蛋白的亚细胞定位分析 | 第55-57页 |
| 第三章 Gm1-MMP和Gm2-MMP基因的表达特性分析 | 第57-69页 |
| 1 材料和方法 | 第57-61页 |
| 1.1 实验材料 | 第57-59页 |
| 1.2 实验方法 | 第59-61页 |
| 2 结果分析 | 第61-65页 |
| 2.1 Gm1-MMP基因的组织特异性表达 | 第61页 |
| 2.2 大豆种子发育过程中Gm1-MMP的表达特性 | 第61-62页 |
| 2.3 高温高湿胁迫下Gm1-MMP基因的表达特性 | 第62-63页 |
| 2.4 Gm2-MMP基因的组织特异性表达 | 第63-64页 |
| 2.5 大豆种子发育过程中Gm2-MMP的表达特性 | 第64页 |
| 2.6 高温高湿胁迫下Gm2-MMP基因的表达特性 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-69页 |
| 3.1 Gm1-MMP和Gm2-MMP组织特异性表达分析 | 第66页 |
| 3.2 Gm1-MMP和Gm2-MMP应答高温高湿胁迫的分析 | 第66-69页 |
| 第四章 Gm1-MMP互作蛋白的筛选 | 第69-83页 |
| 1 材料与方法 | 第69-73页 |
| 1.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 1.2 实验方法 | 第70-73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-79页 |
| 2.1 膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒pBT3SUC-Gm1-MMP的鉴定 | 第73-74页 |
| 2.2 pBT3SUC-Gm1-MMP自激活检测和功能检测 | 第74-76页 |
| 2.3 膜蛋白酵母双杂交文库筛选 | 第76-78页 |
| 2.4 互作蛋白分析 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-83页 |
| 第五章 Gm1-MMP与GmMT-Ⅱ蛋白互作方式研究及GmMT-Ⅱ的表达特性分析 | 第83-101页 |
| 1 材料与方法 | 第83-87页 |
| 1.1 实验材料 | 第83-85页 |
| 1.2 实验方法 | 第85-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-96页 |
| 2.1 大豆叶片总RNA的提取与cDNA质量检测 | 第87-88页 |
| 2.2 GmMT-Ⅱ基因的分离与分析 | 第88页 |
| 2.3 GmMT-Ⅱ基因的生物信息学分析 | 第88-90页 |
| 2.4 GmMT-Ⅱ基因编码产物的亚细胞定位 | 第90-91页 |
| 2.5 酵母双杂交验证Gm1-MMP与GmMT-Ⅱ互作 | 第91页 |
| 2.6 BiFC验证Gm1-MMP与GmMT-Ⅱ互作 | 第91-93页 |
| 2.7 结合位点分析 | 第93-94页 |
| 2.8 GmMT-Ⅱ的组织特异性表达 | 第94-95页 |
| 2.9 大豆种子发育过程中GmMT-Ⅱ的表达分析 | 第95页 |
| 2.10 GmMT-Ⅱ在高温高湿胁迫下的表达分析 | 第95-96页 |
| 3 讨论 | 第96-101页 |
| 3.1 GmMT-Ⅱ的基本特征分析 | 第96-97页 |
| 3.2 GmMT-Ⅱ蛋白的亚细胞定位分析 | 第97页 |
| 3.3 Gm1-MMP与GmMT-Ⅱ互作方式的分析 | 第97-98页 |
| 3.4 GmMT-Ⅱ的表达模式分析 | 第98-101页 |
| 第六章 Gm1-MMP和Gm2-MMP参与叶片发育及响应高温高湿胁迫的功能验证 | 第101-129页 |
| 1 材料与方法 | 第101-107页 |
| 1.1 实验材料 | 第101-102页 |
| 1.2 实验方法 | 第102-107页 |
| 2 结果与分析 | 第107-127页 |
| 2.1 表达载体的构建 | 第107-108页 |
| 2.2 Gm1-MMP基因过表达拟南芥植株的阳性鉴定 | 第108-110页 |
| 2.3 Gm1-MMP过表达拟南芥表型观察 | 第110页 |
| 2.4 Gm1-MMP过表达拟南芥组织切片观察 | 第110-112页 |
| 2.5 Gm1-MMP过表达拟南芥植株对高温高湿胁迫的耐受性分析 | 第112-115页 |
| 2.6 高温高湿胁迫下Gm1-MMP过表达拟南芥种子的活力分析 | 第115-117页 |
| 2.7 Gm2-MMP基因过表达拟南芥植株的阳性鉴定 | 第117-119页 |
| 2.8 Gm2-MMP过表达拟南芥表型观察 | 第119-120页 |
| 2.9 Gm2-MMP过表达拟南芥组织切片观察 | 第120-122页 |
| 2.10 Gm2-MMP过表达拟南芥植株对高温高湿胁迫的耐受性分析 | 第122-125页 |
| 2.11 高温高湿胁迫下Gm2-MMP过表达拟南芥种了的活力分析 | 第125-127页 |
| 3 讨论 | 第127-129页 |
| 3.1 Gm1-MMP和Gm2-MMP参与大豆叶片的形态建成分析 | 第127页 |
| 3.2 Gm1-MMP和Gm2-MMP响应高温高湿和参与种子劣变的功能分析 | 第127-129页 |
| 全文总结 | 第129-131页 |
| 本研究创新之处 | 第131-133页 |
| 参考文献 | 第133-145页 |
| 附录 | 第145-155页 |
| 在读期间发表的论文 | 第155-157页 |
| 致谢 | 第157页 |
