| 摘要 | 第9-11页 |
| 中英文缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-44页 |
| 1 Tet调控系统的构建 | 第14-19页 |
| 1.1 Tet-off调控系统 | 第15-16页 |
| 1.2 Tet-on调控系统 | 第16-17页 |
| 1.3 Tet调控系统的特点 | 第17-18页 |
| 1.4 Tet调控系统的前景展望 | 第18-19页 |
| 2 生长激素的研究 | 第19-27页 |
| 2.1 生长激素的发现 | 第19-20页 |
| 2.2 生长激素基因簇的组成 | 第20页 |
| 2.3 生长激素基因的表达 | 第20-21页 |
| 2.4 生长激素基因的调节 | 第21-22页 |
| 2.5 生长激素表达的发育阶段性调控 | 第22页 |
| 2.6 生长激素的生理生化作用 | 第22-24页 |
| 2.7 生长激素的作用方式 | 第24-25页 |
| 2.8 生长激素自分泌机制研究 | 第25-26页 |
| 2.9 生长激素的临床应用 | 第26-27页 |
| 3 猪生长激素的研究 | 第27-31页 |
| 3.1 猪生长激素基因的发现 | 第27页 |
| 3.2 猪生长激素基因的定位和分子结构 | 第27-28页 |
| 3.3 猪生长激素基因的保守性 | 第28页 |
| 3.4 猪生长激素基因的多态性 | 第28-29页 |
| 3.5 猪生长激素基因的分泌规律 | 第29页 |
| 3.6 猪生长激素生理学功能 | 第29-30页 |
| 3.7 猪生长激素在生产中的使用 | 第30页 |
| 3.8 猪生长激素的应用前景 | 第30-31页 |
| 4 GH参与肌肉发育的研究现状 | 第31-32页 |
| 5 利用转基因动物模型研究GH生理功能的现状 | 第32-33页 |
| 6 研究目的和意义 | 第33-34页 |
| 7 技术路线 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-44页 |
| 第二章 可控表达GH基因真核表达载体构建及功能验证 | 第44-71页 |
| 1 材料与方法 | 第44-58页 |
| 1.1 菌株、质粒、细胞 | 第44页 |
| 1.2 主要试剂 | 第44-45页 |
| 1.3 主要溶液及配制 | 第45-46页 |
| 1.4 主要仪器 | 第46-47页 |
| 1.5 引物信息 | 第47页 |
| 1.6 试验方法 | 第47-51页 |
| 1.7 诱导表达pGH细胞系的建立 | 第51-56页 |
| 1.8 诱导型表达GH单质粒表达载体(pTTGH)的构建 | 第56-57页 |
| 1.9 诱导型表达GH单质粒表达载体(pTTGH)在细胞中的表达 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-65页 |
| 2.1 条件表达载体pTRE-GH的构建 | 第58-59页 |
| 2.2 诱导表达pGH细胞系的建立 | 第59-63页 |
| 2.3 诱导型表达GH单质粒表达载体(pTTGH)的构建 | 第63-64页 |
| 2.4 诱导型表达GH单质粒表达载体(pTTGH)在PIEC细胞中的表达 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 4 小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-71页 |
| 第三章 可控表达pGH转基因小鼠模型的建立与分析 | 第71-105页 |
| 1 材料与方法 | 第72-83页 |
| 1.1 试验动物及饲养环境 | 第72页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第72页 |
| 1.3 主要溶液及配制 | 第72-73页 |
| 1.4 主要仪器 | 第73-74页 |
| 1.5 引物信息 | 第74页 |
| 1.6 利用原核显微注射法进行转基因小鼠的制备 | 第74页 |
| 1.7 G0代转基因小鼠基因整合检测 | 第74-80页 |
| 1.8 后代转基因小鼠表达检测 | 第80-81页 |
| 1.9 转基因小鼠诱导试验 | 第81页 |
| 1.10 转基因小鼠血清中外源GH放免测定 | 第81页 |
| 1.11 转基因小鼠血清中IGF-1酶免测定 | 第81-82页 |
| 1.12 转基因小鼠血液生化及血常规检测 | 第82页 |
| 1.13 转基因小鼠组织学检查 | 第82-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-96页 |
| 2.1 原核显微注射质粒基因的酶切和纯化 | 第83页 |
| 2.2 G0代转基因小鼠基因整合检测结果 | 第83-85页 |
| 2.3 G0代转基因小鼠基因表达检测结果 | 第85-86页 |
| 2.4 后代转基因阳性小鼠扩繁培育 | 第86-87页 |
| 2.5 后代转基因小鼠的整合检测结果 | 第87-89页 |
| 2.6 后代转基因小鼠表达检测结果 | 第89页 |
| 2.7 后代转基因小鼠的诱导试验 | 第89-90页 |
| 2.8 转基因小鼠血清中外源GH放免测定 | 第90-91页 |
| 2.9 转基因小鼠血清中内源IGF-1酶免测定 | 第91-92页 |
| 2.10 转基因小鼠血液生化及血常规检测 | 第92-93页 |
| 2.11 转基因小鼠组织学检查 | 第93-96页 |
| 3 讨论 | 第96-100页 |
| 4 小结 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-105页 |
| 第四章 转基因小鼠和非转基因小鼠的iTRAQ分析 | 第105-129页 |
| 1 材料与方法 | 第105-110页 |
| 1.1 试验仪器 | 第105-106页 |
| 1.2 试验方法 | 第106-109页 |
| 1.3 质谱分析 | 第109-110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-122页 |
| 2.1 SDS-PAGE电泳 | 第110-111页 |
| 2.2 酶解肽段浓度测定 | 第111页 |
| 2.3 肽段SCX检测分级 | 第111-112页 |
| 2.4 蛋白质鉴定结果 | 第112页 |
| 2.5 定量分析 | 第112-114页 |
| 2.6 生物信息分析 | 第114-122页 |
| 3 讨论 | 第122-125页 |
| 4 小结 | 第125-126页 |
| 参考文献 | 第126-129页 |
| 全文结论 | 第129-131页 |
| 创新与特色 | 第131-133页 |
| Abstract | 第133-135页 |
| 附录 | 第137-139页 |
| 致谢 | 第139页 |
