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自噬在雄黄微生物转化液诱导U937细胞凋亡过程中的作用研究

中文摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
缩略词表第5-10页
第一章 文献综述第10-29页
    1.1 程序性死亡在白血病细胞生存中的意义第10-19页
        1.1.1 凋亡在白血病细胞生存中的意义第10-12页
        1.1.2 自噬在白血病细胞生存中的意义第12-15页
        1.1.3 程序性坏死及其意义第15-16页
        1.1.4 凋亡、自噬及程序性坏死之间的关系第16-17页
        1.1.5 程序性死亡与白血病细胞多药耐药第17-19页
    1.2 砷剂与白血病治疗第19-27页
        1.2.1 砷的理化性质及生物学效应第19-21页
        1.2.2 砷剂治疗白血病的研究进展第21-27页
            1.2.2.1 有机砷第22页
            1.2.2.2 ATO第22-25页
            1.2.2.3 雄黄第25-26页
            1.2.2.4 RTS第26-27页
    1.3 立题依据及研究内容第27-29页
第二章 自噬在雄黄微生物转化液诱导U937细胞凋亡过程中的作用第29-50页
    2.1. 雄黄微生物转化液对常见白血病细胞的生长抑制作用第29-36页
        2.1.1 实验材料和仪器第29-31页
            2.1.1.1 细胞株第29页
            2.1.1.2 主要试剂和仪器第29-31页
        2.1.2 实验方法第31-33页
            2.1.2.1 MTT法检测雄黄微生物转化液对白血病细胞的生长抑制作用第31-32页
            2.1.2.2 ATO、Realgar和RTS处理U937细胞进行荧光染色观察细胞凋亡形态第32-33页
        2.1.3 实验结果第33-35页
            2.1.3.1 雄黄微生物转化液对白血病细胞的生长抑制作用的IC50值第33页
            2.1.3.2 荧光显微镜下细胞的凋亡形态第33-35页
        2.1.4 结果分析与讨论第35-36页
    2.2 雄黄微生物转化液对U937细胞的生长抑制作用及机理的研究第36-50页
        2.2.1 实验材料和试剂第36-38页
            2.2.1.1 细胞株第36页
            2.2.1.2 主要试剂和仪器第36-38页
        2.2.2 实验方法第38-42页
            2.2.2.1 PI染色观察三种砷剂对U937细胞周期的影响第38页
            2.2.2.2 MDC荧光染色法观察自噬体的形态第38-39页
            2.2.2.3 MTT法对自噬抑制剂用量范围的确定第39页
            2.2.2.4 Western blotting检测LC3-Ⅱ的变化第39-41页
            2.2.2.5 MTT实验检测砷剂与3-MA联用对细胞的生长抑制作用第41页
            2.2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡第41-42页
        2.2.3 实验结果第42-49页
            2.2.3.1 三种砷剂对U937细胞周期影响的PI染色结果第42-43页
            2.2.3.2 三种砷剂处理U937的MDC染色结果第43-44页
            2.2.3.3 3-MA常规用量对白血病细胞的抑制作用第44-45页
            2.2.3.4 砷剂联合3-MA处理U937后LC3-Ⅱ的变化第45-46页
            2.2.3.5 砷剂与3-MA联用对U937细胞的生长抑制作用第46页
            2.2.3.6 砷剂与3-MA联用对U937细胞凋亡的影响第46-49页
        2.2.4 结果分析与讨论第49-50页
第三章 自噬在雄黄微生物转化液诱导U937/VCR细胞凋亡过程中的作用第50-71页
    3.1 白血病多药耐药细胞株U937/VCR的诱导和表征第50-57页
        3.1.1 实验材料和仪器第50页
            3.1.1.1 细胞株第50页
            3.1.1.2 主要试剂和仪器第50页
        3.1.2 实验方法第50-53页
            3.1.2.1 白血病多药耐药细胞株U937/VCR的诱导第50-51页
            3.1.2.2 MTT法测定U937/VCR的耐药倍数第51页
            3.1.2.3 MTT法进行U937/VCR生长曲线的绘制第51-52页
            3.1.2.4 流式细胞术分析细胞周期第52页
            3.1.2.5 交叉耐药实验第52-53页
        3.1.3 实验结果第53-56页
        3.1.4 结果分析与讨论第56-57页
    3.2 雄黄微生物转化液对U937/VCR细胞的生长抑制及其作用机理的研究第57-71页
        3.2.1 实验材料和试剂第57页
            3.2.1.1 细胞株第57页
            3.2.1.2 主要试剂和仪器第57页
        3.2.2 实验方法第57-61页
            3.2.2.1 PI染色观察三种砷剂对U937/VCR细胞周期的影响第57页
            3.2.2.2 荧光显微镜观察细胞凋亡形态第57-58页
            3.2.2.3 MDC荧光染色法观察自噬体的形态第58页
            3.2.2.4 Western blotting检测LC3-Ⅱ的变化第58-60页
            3.2.2.5 MTT实验检测砷剂与3-MA联用对细胞的生长抑制作用第60-61页
            3.2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡第61页
            3.2.2.7 Western blotting检测自噬及凋亡的相关蛋白的变化第61页
        3.2.3 实验结果第61-69页
            3.2.3.1 三种砷剂对U937/VCR细胞周期影响的PI染色结果第61-62页
            3.2.3.2 三种砷剂处理U937/VCR的Hoechst33258染色结果第62-63页
            3.2.3.3 三种砷剂处理U937/VCR的MDC染色结果第63-64页
            3.2.3.4 砷剂联合3-MA处理U937/VCR后LC3-Ⅱ的变化第64-65页
            3.2.3.5 砷剂与3-MA联用对U937/VCR细胞的生长抑制作用第65-66页
            3.2.3.6 砷剂与3-MA联用对U937/VCR细胞凋亡的影响第66-68页
            3.2.3.7 砷剂联合3-MA处理U937/VCR后自噬和凋亡相关蛋白的变化第68-69页
        3.2.4 结果分析与讨论第69-71页
第四章 总结与讨论第71-73页
参考文献第73-79页
在学期间的研究成果第79-80页
致谢第80页

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