中文摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
缩略词表 | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-29页 |
1.1 程序性死亡在白血病细胞生存中的意义 | 第10-19页 |
1.1.1 凋亡在白血病细胞生存中的意义 | 第10-12页 |
1.1.2 自噬在白血病细胞生存中的意义 | 第12-15页 |
1.1.3 程序性坏死及其意义 | 第15-16页 |
1.1.4 凋亡、自噬及程序性坏死之间的关系 | 第16-17页 |
1.1.5 程序性死亡与白血病细胞多药耐药 | 第17-19页 |
1.2 砷剂与白血病治疗 | 第19-27页 |
1.2.1 砷的理化性质及生物学效应 | 第19-21页 |
1.2.2 砷剂治疗白血病的研究进展 | 第21-27页 |
1.2.2.1 有机砷 | 第22页 |
1.2.2.2 ATO | 第22-25页 |
1.2.2.3 雄黄 | 第25-26页 |
1.2.2.4 RTS | 第26-27页 |
1.3 立题依据及研究内容 | 第27-29页 |
第二章 自噬在雄黄微生物转化液诱导U937细胞凋亡过程中的作用 | 第29-50页 |
2.1. 雄黄微生物转化液对常见白血病细胞的生长抑制作用 | 第29-36页 |
2.1.1 实验材料和仪器 | 第29-31页 |
2.1.1.1 细胞株 | 第29页 |
2.1.1.2 主要试剂和仪器 | 第29-31页 |
2.1.2 实验方法 | 第31-33页 |
2.1.2.1 MTT法检测雄黄微生物转化液对白血病细胞的生长抑制作用 | 第31-32页 |
2.1.2.2 ATO、Realgar和RTS处理U937细胞进行荧光染色观察细胞凋亡形态 | 第32-33页 |
2.1.3 实验结果 | 第33-35页 |
2.1.3.1 雄黄微生物转化液对白血病细胞的生长抑制作用的IC50值 | 第33页 |
2.1.3.2 荧光显微镜下细胞的凋亡形态 | 第33-35页 |
2.1.4 结果分析与讨论 | 第35-36页 |
2.2 雄黄微生物转化液对U937细胞的生长抑制作用及机理的研究 | 第36-50页 |
2.2.1 实验材料和试剂 | 第36-38页 |
2.2.1.1 细胞株 | 第36页 |
2.2.1.2 主要试剂和仪器 | 第36-38页 |
2.2.2 实验方法 | 第38-42页 |
2.2.2.1 PI染色观察三种砷剂对U937细胞周期的影响 | 第38页 |
2.2.2.2 MDC荧光染色法观察自噬体的形态 | 第38-39页 |
2.2.2.3 MTT法对自噬抑制剂用量范围的确定 | 第39页 |
2.2.2.4 Western blotting检测LC3-Ⅱ的变化 | 第39-41页 |
2.2.2.5 MTT实验检测砷剂与3-MA联用对细胞的生长抑制作用 | 第41页 |
2.2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第41-42页 |
2.2.3 实验结果 | 第42-49页 |
2.2.3.1 三种砷剂对U937细胞周期影响的PI染色结果 | 第42-43页 |
2.2.3.2 三种砷剂处理U937的MDC染色结果 | 第43-44页 |
2.2.3.3 3-MA常规用量对白血病细胞的抑制作用 | 第44-45页 |
2.2.3.4 砷剂联合3-MA处理U937后LC3-Ⅱ的变化 | 第45-46页 |
2.2.3.5 砷剂与3-MA联用对U937细胞的生长抑制作用 | 第46页 |
2.2.3.6 砷剂与3-MA联用对U937细胞凋亡的影响 | 第46-49页 |
2.2.4 结果分析与讨论 | 第49-50页 |
第三章 自噬在雄黄微生物转化液诱导U937/VCR细胞凋亡过程中的作用 | 第50-71页 |
3.1 白血病多药耐药细胞株U937/VCR的诱导和表征 | 第50-57页 |
3.1.1 实验材料和仪器 | 第50页 |
3.1.1.1 细胞株 | 第50页 |
3.1.1.2 主要试剂和仪器 | 第50页 |
3.1.2 实验方法 | 第50-53页 |
3.1.2.1 白血病多药耐药细胞株U937/VCR的诱导 | 第50-51页 |
3.1.2.2 MTT法测定U937/VCR的耐药倍数 | 第51页 |
3.1.2.3 MTT法进行U937/VCR生长曲线的绘制 | 第51-52页 |
3.1.2.4 流式细胞术分析细胞周期 | 第52页 |
3.1.2.5 交叉耐药实验 | 第52-53页 |
3.1.3 实验结果 | 第53-56页 |
3.1.4 结果分析与讨论 | 第56-57页 |
3.2 雄黄微生物转化液对U937/VCR细胞的生长抑制及其作用机理的研究 | 第57-71页 |
3.2.1 实验材料和试剂 | 第57页 |
3.2.1.1 细胞株 | 第57页 |
3.2.1.2 主要试剂和仪器 | 第57页 |
3.2.2 实验方法 | 第57-61页 |
3.2.2.1 PI染色观察三种砷剂对U937/VCR细胞周期的影响 | 第57页 |
3.2.2.2 荧光显微镜观察细胞凋亡形态 | 第57-58页 |
3.2.2.3 MDC荧光染色法观察自噬体的形态 | 第58页 |
3.2.2.4 Western blotting检测LC3-Ⅱ的变化 | 第58-60页 |
3.2.2.5 MTT实验检测砷剂与3-MA联用对细胞的生长抑制作用 | 第60-61页 |
3.2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第61页 |
3.2.2.7 Western blotting检测自噬及凋亡的相关蛋白的变化 | 第61页 |
3.2.3 实验结果 | 第61-69页 |
3.2.3.1 三种砷剂对U937/VCR细胞周期影响的PI染色结果 | 第61-62页 |
3.2.3.2 三种砷剂处理U937/VCR的Hoechst33258染色结果 | 第62-63页 |
3.2.3.3 三种砷剂处理U937/VCR的MDC染色结果 | 第63-64页 |
3.2.3.4 砷剂联合3-MA处理U937/VCR后LC3-Ⅱ的变化 | 第64-65页 |
3.2.3.5 砷剂与3-MA联用对U937/VCR细胞的生长抑制作用 | 第65-66页 |
3.2.3.6 砷剂与3-MA联用对U937/VCR细胞凋亡的影响 | 第66-68页 |
3.2.3.7 砷剂联合3-MA处理U937/VCR后自噬和凋亡相关蛋白的变化 | 第68-69页 |
3.2.4 结果分析与讨论 | 第69-71页 |
第四章 总结与讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-79页 |
在学期间的研究成果 | 第79-80页 |
致谢 | 第80页 |