| 中文摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-27页 |
| 1.1 大肠癌 | 第19-20页 |
| 1.2 栝楼 | 第20-21页 |
| 1.2.1 栝楼概述 | 第20页 |
| 1.2.2 栝楼的生物活性 | 第20页 |
| 1.2.3 栝楼的抗肿瘤性质 | 第20页 |
| 1.2.4 栝楼与大肠癌 | 第20-21页 |
| 1.3 上皮间充质转化 | 第21-23页 |
| 1.3.1 上皮间充质转化简介 | 第21-22页 |
| 1.3.2 EMT的分子基础 | 第22-23页 |
| 1.4 二型丙酮酸激酶-PKM2概述 | 第23-24页 |
| 1.4.1 PKM2 | 第23页 |
| 1.4.2 PKM2与大肠癌 | 第23-24页 |
| 1.4.3 PKM2、STAT3/Snail1信号通路 | 第24页 |
| 1.5 Wnt信号通路 | 第24-26页 |
| 1.5.1 Wnt信号通路简介 | 第24页 |
| 1.5.2 Wnt/β-catenin信号通路与大肠癌 | 第24-25页 |
| 1.5.3 Wnt/β-catenin信号通路与迁移 | 第25-26页 |
| 1.6 本课题的研究目的及意义 | 第26-27页 |
| 第二章 栝楼抗肿瘤活性蛋白TKP抑制大肠癌细胞上皮间充质转化 | 第27-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第27页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第27页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第27-28页 |
| 2.2.2 细胞的培养 | 第28页 |
| 2.2.3 栝楼抗肿瘤活性蛋白的提取及纯化 | 第28页 |
| 2.2.4 蛋白浓度的测定 | 第28页 |
| 2.2.5 细胞形态学观察 | 第28-29页 |
| 2.2.6 细胞总RNA提取 | 第29页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR | 第29页 |
| 2.2.8 MTT法检测细胞存活率 | 第29-30页 |
| 2.2.9 细胞粘附实验 | 第30页 |
| 2.2.10 统计学分析 | 第30页 |
| 2.3 实验结果 | 第30-33页 |
| 2.3.1 栝楼抗肿瘤活性蛋白TKP的提取及纯化 | 第30-31页 |
| 2.3.2 TKP处理改变大肠癌细胞DLD1和HCT116的形态 | 第31页 |
| 2.3.3 TKP处理抑制大肠癌细胞DLD1和HCT116的上皮间充质转化 | 第31-32页 |
| 2.3.4 TKP处理减弱大肠癌细胞与基质间的粘附能力 | 第32-33页 |
| 2.3.5 TKP处理对大肠癌细胞DLD1和HCT116存活率的影响 | 第33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 TKP通过PKM2抑制STAT3/Snail1信号通路从而抑制大肠癌细胞发生上皮间充质转化 | 第35-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第35页 |
| 3.2.2 细胞的培养 | 第35页 |
| 3.2.3 TKP的提取和纯化 | 第35页 |
| 3.2.4 细胞总RNA的提取 | 第35页 |
| 3.2.5 荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 3.2.6 细胞蛋白提取 | 第36页 |
| 3.2.7 Western印迹 | 第36页 |
| 3.2.8 细胞转染 | 第36页 |
| 3.2.9 统计学分析 | 第36页 |
| 3.3 实验结果 | 第36-40页 |
| 3.3.1 TKP抑制STAT3/Snail1信号通路 | 第36-37页 |
| 3.3.2 TKP处理抑制PKM2的表达和核转移 | 第37-38页 |
| 3.3.3 TKP通过PKM2抑制STAT3/Snail1信号通路 | 第38-39页 |
| 3.3.4 TKP通过PKM2抑制大肠癌细胞上皮间充质转化 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 TKP通过Wnt/β-catenin信号通路抑制大肠癌细胞的迁移 | 第42-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第42页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第42页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 细胞的复苏与冻存 | 第42页 |
| 4.2.2 细胞的培养 | 第42页 |
| 4.2.3 TKP提取和纯化 | 第42页 |
| 4.2.4 细胞划痕 | 第42页 |
| 4.2.5 细胞总RNA的提取 | 第42-43页 |
| 4.2.6 荧光定量PCR | 第43页 |
| 4.2.7 细胞蛋白提取 | 第43页 |
| 4.2.8 Western印迹 | 第43页 |
| 4.2.9 统计学分析 | 第43页 |
| 4.3 实验结果 | 第43-46页 |
| 4.3.1 TKP处理对大肠癌细胞迁移的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.2 TKP处理对大肠癌细胞Wnt/β-catenin信号通路的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.3 TKP通过Wnt/β-catenin信号通路抑制大肠癌细胞的迁移 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录1 主要试剂配方 | 第54-56页 |
| 附录2 实验主要仪器设备 | 第56-57页 |
| 附录3 英文缩略语表 | 第57-58页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 个人简况及联系方式 | 第60-61页 |
