摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述与研究概况 | 第11-17页 |
1.1 禾谷镰刀菌简介 | 第11-14页 |
1.2 禾谷镰刀菌单端孢霉烯类毒素合成相关基因研究 | 第14-15页 |
1.3 环境因素影响禾谷镰刀菌DON毒素合成相关研究 | 第15-16页 |
1.4 本研究的意义 | 第16-17页 |
第二章 tri6、tri10突变体以及双敲突变体与野生型产毒诱导转录组分析 | 第17-27页 |
2.1 前言 | 第17页 |
2.2 材料、试剂与仪器 | 第17-18页 |
2.2.1 材料 | 第17页 |
2.2.2 试剂 | 第17-18页 |
2.2.3 仪器 | 第18页 |
2.3 实验方法 | 第18-20页 |
2.3.1 生物学实验 | 第18页 |
2.3.2 转录组分析 | 第18-20页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第20-27页 |
2.4.1 RNA-seq返回数据评估 | 第20-21页 |
2.4.2 转录差异基因分析 | 第21-26页 |
2.4.3 讨论 | 第26-27页 |
第三章 Tri6与Tri10互作关系的研究 | 第27-35页 |
3.1 前言 | 第27页 |
3.2 材料、试剂 | 第27-29页 |
3.2.1 材料 | 第27页 |
3.2.2 酶与试剂盒 | 第27页 |
3.2.3 试剂 | 第27-29页 |
3.3 实验方法 | 第29-33页 |
3.3.1 PCR扩增TRI6、TRI10 cDNA序列 | 第29-30页 |
3.3.2 酵母双杂载体的构建 | 第30-32页 |
3.3.3 酵母转化 | 第32-33页 |
3.3.4 SD-Trp-Leu-His培养基验证Tri6、Tri10互作 | 第33页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第33-35页 |
3.4.1 实验结果 | 第33-34页 |
3.4.2 讨论 | 第34-35页 |
第四章 Tri6 C端C2H2 domain对致病性的影响 | 第35-44页 |
4.1 前言 | 第35页 |
4.2 材料、试剂 | 第35-38页 |
4.2.1 材料 | 第35页 |
4.2.2 酶、试剂盒以及耗材 | 第35-36页 |
4.2.3 试剂 | 第36-38页 |
4.3 实验方法 | 第38-42页 |
4.3.1 获取domain删除片段 | 第38-39页 |
4.3.2 C2H2 Domain删除互补载体构建 | 第39-41页 |
4.3.3 C2H2 Domain删除菌株的获得 | 第41-42页 |
4.3.4 C2H2 Domain删除菌株接种小麦穗 | 第42页 |
4.4 实验结果与讨论 | 第42-44页 |
4.4.1 小麦穗接种发病情况 | 第42-43页 |
4.4.2 讨论 | 第43-44页 |
第五章 TRI10过表达对TRI基因簇的影响 | 第44-52页 |
5.1 前言 | 第44页 |
5.2 材料、试剂 | 第44-45页 |
5.2.1 材料 | 第44页 |
5.2.2 酶、试剂盒以及耗材 | 第44页 |
5.2.3 试剂 | 第44-45页 |
5.3 实验方法 | 第45-48页 |
5.3.1 扩增TRI10片段 | 第45-46页 |
5.3.2 TRI10过表达载体构建 | 第46页 |
5.3.3 TRI10过表达菌株的获得 | 第46页 |
5.3.4 TRI10过表达菌株毒素产量测定 | 第46页 |
5.3.5 TRI10过表达菌株TRI基因转录水平测定 | 第46-48页 |
5.3.6 TRI10过表达菌株产毒结构观察 | 第48页 |
5.4 实验结果与结论 | 第48-52页 |
5.4.1 TRI10过表达菌株DON毒素产量与TRI基因表达量 | 第48-50页 |
5.4.2 TRI10过表达菌株产毒结构观察 | 第50-51页 |
5.4.3 讨论 | 第51-52页 |
第六章 Tri10在产毒阶段亚细胞定位以及与Tri1的共定位 | 第52-55页 |
6.1 前言 | 第52页 |
6.2 材料、试剂 | 第52页 |
6.2.1 材料 | 第52页 |
6.2.2 酶、试剂盒以及耗材 | 第52页 |
6.2.3 试剂 | 第52页 |
6.3 实验方法 | 第52-53页 |
6.3.1 Tri10-GFP菌株的获得 | 第52页 |
6.3.2 Tri10亚细胞定位 | 第52-53页 |
6.4 实验结果与讨论 | 第53-55页 |
6.4.1 Tri10产毒阶段亚细胞定位 | 第53页 |
6.4.2 Tri10与Tri1产毒阶段共定位 | 第53-54页 |
6.4.3 讨论 | 第54-55页 |
第七章 全文总结与讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
附录 | 第59-77页 |
附表1 tri6突变体2倍以上转录差异基因及功能注释 | 第59-62页 |
附表2 tri10突变体2倍以上转录差异基因功能分类 | 第62-68页 |
附表3 tri6tri10双敲突变体2倍以上转录差异基因功能分类 | 第68-70页 |
附表4 tri6tri10双敲突变体2~5倍以上转录差异基因功能注释 | 第70-75页 |
附表5 Tri6C端C2H2 domain删除载体引物 | 第75-76页 |
附表6 Tri10过表达载体构建及筛选引物 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
作者简介 | 第78页 |