| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1.1 文昌鱼概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 文昌鱼的命名及分类 | 第11-12页 |
| 1.1.2 文昌鱼的构造 | 第12-13页 |
| 1.1.3 文昌鱼的进化地位 | 第13-14页 |
| 1.1.4 文昌鱼免疫学研究 | 第14页 |
| 1.2 载脂蛋白的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 载脂蛋白定义 | 第15页 |
| 1.2.2 载脂蛋白的分类 | 第15-16页 |
| 1.2.3 载脂蛋白的生理功能 | 第16页 |
| 1.3 ApoA-I | 第16-18页 |
| 1.3.1 ApoA-I的结构特点 | 第17页 |
| 1.3.2 ApoA-I的功能 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的背景和意义 | 第18-19页 |
| 1.5 技术路线 | 第19-21页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第21-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 常用试剂的配置 | 第21-23页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 实验菌种及质粒 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-38页 |
| 2.2.1 白氏文昌鱼RNA的提取 | 第24页 |
| 2.2.2 RNA反转录 | 第24-25页 |
| 2.2.3 文昌鱼APOA-I cDNA的PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.4 PCR片段回收 | 第26页 |
| 2.2.5 pET28a质粒的双酶切及纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.6 重组质粒pET28a-apoA-I的构建及转化 | 第27-28页 |
| 2.2.7 重组质粒pET28a-apoA-I的筛选 | 第28-29页 |
| 2.2.8 重组质粒pET28a-apoA-I的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.9 重组质粒pET28a-apoA-I诱导表达 | 第30-31页 |
| 2.2.10 BCA法测定纯化后纯化蛋白的浓度 | 第31页 |
| 2.2.11 蛋白电泳鉴定表达蛋白 | 第31-33页 |
| 2.2.12 Western blot鉴定表达蛋白 | 第33页 |
| 2.2.13 白氏文昌鱼鱼ApoA-I蛋白体外抗菌活性实验 | 第33-34页 |
| 2.2.14 pCDNA6-BSA-apoA-I复合载体构建 | 第34-35页 |
| 2.2.15 BSA-apoA-I的PCR片段回收 | 第35页 |
| 2.2.16 pCDNA6质粒的双酶切及纯化 | 第35页 |
| 2.2.17 重组质粒pCDNA6-BSA-apoA-I的构建及转化 | 第35页 |
| 2.2.18 重组质粒pCDNA6-BSA-apoA-I的筛选和提取 | 第35页 |
| 2.2.19 重组质粒pCDNA6-BSA-apoA-I在293T中表达 | 第35-36页 |
| 2.2.20 蛋白电泳及Westernblot鉴定表达蛋白pCDNA6-BSA-ApoA-I | 第36页 |
| 2.2.21 不同组织白氏文昌鱼apoA-I基因的表达量情况 | 第36-37页 |
| 2.2.22 LPS,POY(I:C)BL21刺激对白氏文昌鱼apoA-I基因表达量的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.23 白氏文昌鱼apoA-I基因的生物信息学分析 | 第38页 |
| 2.3 结果与分析 | 第38-55页 |
| 2.3.1 白氏文昌鱼apoA-I cDNA的PCR扩增 | 第38-39页 |
| 2.3.2 pET28a-apoA-I重组质粒的构建 | 第39-40页 |
| 2.3.3 白氏文昌鱼ApoA-I基因的生物信息学分析 | 第40-43页 |
| 2.3.4 不同物种的ApoA-I蛋白的比对分析和系统发生树 | 第43-45页 |
| 2.3.5 白氏文昌鱼apoA-I基因在293T细胞中的表达鉴定 | 第45-46页 |
| 2.3.6 白氏文昌鱼ApoA-I蛋白表达的Western blot鉴定 | 第46-47页 |
| 2.3.7 白氏文昌鱼apoA-I基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第47-49页 |
| 2.3.8 白氏文昌鱼ApoA-I蛋白的Western blot鉴定 | 第49页 |
| 2.3.9 BCA法测定纯化后pET28a-ApoA-I融合蛋白的浓度 | 第49-50页 |
| 2.3.10 白氏文昌鱼apoA-I的组织分布及诱导表达结果 | 第50-51页 |
| 2.3.11 白氏文昌鱼ApoA-I蛋白的抗菌活性 | 第51-55页 |
| 第三章 讨论 | 第55-59页 |
| 3.1 白氏文昌鱼apoA-I基因结构和进化关系的讨论 | 第55-56页 |
| 3.2 apoA-I的表达特性 | 第56页 |
| 3.3 ApoA-I蛋白的体外抗菌活性及刺激后mRNA表达 | 第56-59页 |
| 结语与展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
