| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| 1.1 植物miRNA的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.1.1 miRNA的研究历史 | 第11页 |
| 1.1.2 miRNA的概念与特征 | 第11页 |
| 1.1.3 miRNA的生物合成及作用机制 | 第11-12页 |
| 1.1.4 植物miRNA功能意义 | 第12页 |
| 1.2 miRNA与植物逆境胁迫 | 第12-15页 |
| 1.2.1 miRNA与植物的养分胁迫 | 第13-14页 |
| 1.2.2 植物miRNA抵御非生物逆境胁迫 | 第14-15页 |
| 1.3 本研究的目的意义 | 第15-16页 |
| 2 实验材料和方法 | 第16-26页 |
| 2.1 小麦小分子TaMIR2275序列的获得 | 第16-17页 |
| 2.1.1 小麦小分子TaMIR2275初始序列和成熟序列 | 第16-17页 |
| 2.1.2 本实验特异引物序列 | 第17页 |
| 2.2 小麦小分子TaMIR2275低氮和盐分胁迫下分子表达特征 | 第17-18页 |
| 2.2.1 材料培养 | 第17页 |
| 2.2.2 总RNA提取和反转录 | 第17-18页 |
| 2.3 小麦小分子TaMIR2275的克隆、表达载体的构建和烟草遗传转化 | 第18-22页 |
| 2.3.1 TaMIR2275前体序列的克隆 | 第18-20页 |
| 2.3.2 融合TaMIR2275基因的正、反义表达双元表达载体构建 | 第20-21页 |
| 2.3.3 TaMIR2275正、反义表达载体的农杆菌遗传转化 | 第21页 |
| 2.3.4 TaMIR2275转基因烟草遗传转化和筛选 | 第21-22页 |
| 2.3.5 转基因烟草的鉴定 | 第22页 |
| 2.4 TaMIR2275转基因烟草低氮和盐分胁迫下生长生理及分子特征 | 第22-26页 |
| 2.4.1 MS和低氮胁迫下正、反义系转基因烟草植株的形态特征、干鲜重分析 | 第22页 |
| 2.4.2 MS和氮胁迫下正反义系转基因烟草植株各项生理指标测定 | 第22-23页 |
| 2.4.3 MS和氮胁迫下正反义系转基因烟草植株氮相关基因NRT、NIR、GS的半定量分析.. | 第23页 |
| 2.4.4 MS和盐分胁迫下正反义系转基因烟草植株的生长特征、干鲜重分析 | 第23页 |
| 2.4.5 MS和盐分胁迫下正反义系转基因烟草植株生理生化分析 | 第23-24页 |
| 2.4.6 MS和盐分胁迫下正反义系转基因烟草植株气孔开度分析 | 第24页 |
| 2.4.7 MS和盐分胁迫下正反义系转基因烟草植株SOD、POD、CAT和ABA受体基因的半定量分析 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-46页 |
| 3.1 小麦小分子TaMIR2275分子特征及氮和盐分胁迫下基因表达模式 | 第26页 |
| 3.2 小麦小分子TaMIR2275前体的克隆 | 第26-27页 |
| 3.3 融合TaMIR2275基因的正、反义表达双元表达载体构建 | 第27-29页 |
| 3.4 TaMIR2275正、反义表达载体转基因烟草的遗传转化和筛选鉴定 | 第29-30页 |
| 3.5 小麦小分子TaMIR2275保守性分析 | 第30-31页 |
| 3.6 低氮胁迫下TaMIR2275生长生理及分子特征 | 第31-37页 |
| 3.6.1 TaMIR2275转基因烟草在低氮胁迫下的形态特征 | 第32-33页 |
| 3.6.2 小分子TaMIR2275转基因烟草生理指标 | 第33-35页 |
| 3.6.3 TaMIR2275转基因烟草NRT、NIR和GS的半定量分析 | 第35-37页 |
| 3.7 盐分胁迫下TaMIR2275转化株系的生长、生理及分子特征 | 第37-46页 |
| 3.7.1 TaMIR2275转基因烟草生长形态特征 | 第37-38页 |
| 3.7.2 TaMIR2275转基因烟草生理指标 | 第38-40页 |
| 3.7.3 TaMIR2275转基因烟草SOD、POD、CAT和ABA受体基因的半定量分析 | 第40-45页 |
| 3.7.4 TaMIR2275转基因烟草气孔开度 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 作者简历 | 第55-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
