中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一部分: 综述部分 | 第9-35页 |
1 拟南芥简介 | 第9-11页 |
2 跨膜转运蛋白简介 | 第11-30页 |
2.1 跨膜转运蛋白的分类 | 第11-14页 |
2.1.1 通道蛋白的分类 | 第12-13页 |
2.1.2 载体蛋白的分类 | 第13-14页 |
2.2 跨膜转运蛋白的研究进展 | 第14-30页 |
2.2.1 K~+转运蛋白的研究 | 第14-20页 |
2.2.2 Mg~(2+)转运蛋白的研究 | 第20-23页 |
2.2.3 Ca~(2+)转运蛋白的研究 | 第23-26页 |
2.2.4 糖转运蛋白的研究 | 第26-28页 |
2.2.5 其他金属离子转运蛋白的研究 | 第28-30页 |
3 跨膜转运蛋白与植物的耐逆性研究 | 第30-33页 |
3.1 耐盐性 | 第31-32页 |
3.2 耐热性 | 第32-33页 |
4 本课题研究的内容及意义 | 第33-35页 |
第二部分: 研究论文 | 第35-76页 |
第一章 拟南芥跨膜转运蛋白相关基因T-DNA插入突变纯合体的筛选鉴定 | 第35-56页 |
1 实验材料 | 第35-36页 |
1.1 植物材料 | 第35-36页 |
1.2 仪器及试剂 | 第36页 |
2 实验方法 | 第36-42页 |
2.1 拟南芥叶片DNA提取 | 第36-37页 |
2.2 引物设计 | 第37页 |
2.3 PCR检测T-DNA插入突变纯合体 | 第37-39页 |
2.4 凝胶电泳检测 | 第39-42页 |
3 实验结果 | 第42-56页 |
3.1 系统进化树分析 | 第42-43页 |
3.2 T-DNA插入突变体检测结果 | 第43-56页 |
第二章 杂交双突变体的构建及纯合体检测 | 第56-60页 |
1 实验材料 | 第56页 |
1.1 植物材料 | 第56页 |
1.2 仪器设备 | 第56页 |
2 实验方法 | 第56-57页 |
2.1 杂交双突变体的构建 | 第56-57页 |
2.2 PCR检测杂交双突变纯合体 | 第57页 |
3 实验结果 | 第57-60页 |
3.1 双突变纯合体DNA水平检测结果 | 第57-60页 |
第三章 若干T-DNA插入突变体植株的耐热性实验 | 第60-76页 |
1 实验材料 | 第60-62页 |
1.1 植物材料 | 第60-61页 |
1.2 试剂及仪器 | 第61页 |
1.3 菌种及质粒 | 第61页 |
1.4 培养基配方 | 第61-62页 |
2 实验方法 | 第62-70页 |
2.1 RT-PCR检测T-DNA突变体 | 第62-64页 |
2.1.1 Trizol法提取拟南芥叶片RNA | 第62页 |
2.1.2 反转录获得cDNA第一条链 | 第62-63页 |
2.1.3 PCR检测 | 第63-64页 |
2.2 对部分拟南芥突变体植株进行高温处理 | 第64页 |
2.2.1 拟南芥种植 | 第64页 |
2.2.2 高温处理 | 第64页 |
2.3 At3906710基因互补载体构建 | 第64-70页 |
2.3.1 目的基因的获取 | 第64-66页 |
2.3.2 酶切目的基因与质粒 | 第66页 |
2.3.3 连接 | 第66页 |
2.3.4 大肠杆菌DH5α感受态细胞的小量制备 | 第66-67页 |
2.3.5 连接产物转化入大肠杆菌 | 第67-68页 |
2.3.6 菌检 | 第68页 |
2.3.7 质粒提取 | 第68-69页 |
2.3.8 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第69页 |
2.3.9 重组质粒转化入根癌农杆菌GV3101感受态细胞中 | 第69-70页 |
2.3.10 侵染拟南芥花序 | 第70页 |
3 实验结果 | 第70-76页 |
3.1 RT-PCR检测T-DNA突变体 | 第70-72页 |
3.2 高温胁迫处理结果 | 第72-75页 |
3.3 At3906710基因互补载体的构建 | 第75-76页 |
讨论 | 第76-79页 |
1 T-DNA插入突变纯合体的检测分析 | 第76-77页 |
2 拟南芥跨膜蛋白与植物耐热性关系的探讨 | 第77页 |
3 关于转运蛋白深入研究的设想 | 第77-79页 |
全文结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-88页 |
致谢 | 第88-89页 |