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禽流感和猪流感病毒的分离鉴定、遗传进化分析和致病性研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略语表(Abbreviation)第11-12页
1.前言第12-19页
    1.1 流感病毒概况第12-15页
        1.1.1 流感病毒的病原学第12-14页
        1.1.2 流感病毒的分类第14-15页
        1.1.3 流感病毒流行概述第15页
    1.2 H9N2亚型禽流感概述第15-16页
        1.2.1 H9N2亚型AIV的遗传进化及流行情况第15-16页
        1.2.2 研究H9N2亚型AIV的意义第16页
    1.3 H1N1亚型猪流感概述第16-19页
        1.3.1 H1N1亚型SIV的遗传进化及流行情况第16-17页
        1.3.2 研究欧亚禽系H1N1亚型SIV的意义第17-19页
2.材料和方法第19-29页
    2.1 实验材料第19-21页
        2.1.1 病料及毒株第19页
        2.1.2 SPF鸡胚第19页
        2.1.3 Balb/c小鼠第19页
        2.1.4 主要工具酶及试剂第19-20页
        2.1.5 主要培养基及试剂的配制第20页
        2.1.6 主要仪器及设备第20-21页
        2.1.7 其他实验材料第21页
        2.1.8 分子生物学软件第21页
    2.2 实验方法第21-29页
        2.2.1 病料的采集和处理第21-22页
        2.2.2 病毒的增殖及处理第22页
        2.2.3 HA试验第22页
        2.2.4 有限稀释法纯化病毒第22页
        2.2.5 半数细胞培养物感染量(TCID50)的测定第22-23页
        2.2.6 病毒RNA的提取第23页
        2.2.7 引物设计第23-24页
        2.2.8 病毒基因组的反转录第24页
        2.2.9 病毒cDNA的PCR扩增第24页
        2.2.10 PCR产物的回收与纯化第24-25页
        2.2.11 连接反应第25页
        2.2.12 连接产物的转化第25页
        2.2.13 阳性重组质粒的筛选与鉴定第25-26页
        2.2.14 序列分析第26页
        2.2.15 病毒对BALB/c小鼠的致病性第26-29页
3.结果与分析第29-66页
    3.1 禽流感病毒的分离鉴定、基因组测序及遗传进化分析第29-43页
        3.1.1 病毒的分离鉴定第29页
        3.1.2 2株禽流感病毒基因组片段重组质粒的PCR鉴定第29-30页
        3.1.3 2株禽流感病毒全基因组核苷酸序列测定第30-31页
        3.1.4 2株H9N2亚型AIV全基因组序列分析第31-43页
            3.1.4.1 HA基因序列分析第31-34页
            3.1.4.2 NA基因序列分析第34页
            3.1.4.3 PB2基因序列分析第34-36页
            3.1.4.4 PB1基因序列分析第36-38页
            3.1.4.5 PA基因序列分析第38页
            3.1.4.6 NP基因序列分析第38-40页
            3.1.4.7 M基因序列分析第40-41页
            3.1.4.8 NS基因序列分析第41-43页
    3.2 猪流感病毒的分离鉴定、遗传进化分析及其对小鼠的致病性研究第43-66页
        3.2.1 病毒的分离鉴定第43-44页
        3.2.2 HuBEA-H1N1全基因组核苷酸序列测定第44页
        3.2.3 湖北H1N1亚型猪流感病毒全基因组序列分析第44-55页
            3.2.3.1 HA基因序列分析第44-45页
            3.2.3.2 NA基因序列分析第45页
            3.2.3.3 PB2基因序列分析第45页
            3.2.3.4 PB1基因序列分析第45-46页
            3.2.3.5 PA基因序列分析第46页
            3.2.3.6 NP基因序列分析第46页
            3.2.3.7 M基因序列分析第46页
            3.2.3.8 NS基因序列分析第46-55页
        3.2.4 HuBEA-H1N1与HuNEA-H1N1的序列比对第55页
        3.2.5 中国猪流感流行概况第55-59页
            3.2.5.1 中国欧亚禽系H1N1亚型SIV的基因型及其分布情况第56-59页
        3.2.6 2株H1N1亚型流感病毒在细胞上的增殖曲线第59-61页
        3.2.7 H1N1流感病毒对小鼠的致病性试验第61-66页
            3.2.7.1 2株H1N1流感病毒感染SPFBalb/c小鼠后的临床症状第61页
            3.2.7.2 2株H1N1流感病毒感染SPFBalb/c小鼠后的存活率第61-62页
            3.2.7.3 2株H1N1流感病毒感染SPFBalb/c小鼠后体重变化情况第62-63页
            3.2.7.4 2株H1N1流感病毒感染SPFBalb/c小鼠后肺脏眼观病变第63页
            3.2.7.5 2株H1N1流感病毒在SPFBalb/c小鼠体内复制情况第63-64页
            3.2.7.6 2株H1N1流感病毒感染SPFBalb/c小鼠后肺脏组织病变第64-66页
4.讨论第66-69页
    4.1 H9N2亚型禽流感病毒第66-67页
    4.2 H1N1亚型猪流感病毒第67-69页
5.结论第69-70页
参考文献第70-80页
致谢第80页

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