| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 1 引言 | 第15-19页 |
| 1.1 结肠癌治疗的现状 | 第15页 |
| 1.2 光动力治疗-结肠癌治疗的新方法 | 第15-16页 |
| 1.3 PDT的作用机制 | 第16页 |
| 1.4 PDT的三要素 | 第16-17页 |
| 1.5 光敏剂的发展 | 第17-18页 |
| 1.6 肿瘤干细胞和Notch信号通路 | 第18页 |
| 1.7 结语 | 第18-19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-27页 |
| 2.1 材料 | 第19-22页 |
| 2.1.0 细胞系与实验动物 | 第19页 |
| 2.1.1 药物与试剂耗材 | 第19页 |
| 2.1.2 Notch1过表达的慢病毒载体 | 第19-21页 |
| 2.1.3 仪器设备(表1) | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 结肠癌细胞的培养 | 第22页 |
| 2.2.2 磁珠分选CD133阳性的结肠癌细胞及流式细胞仪鉴定 | 第22-23页 |
| 2.2.3 结肠癌干细胞培养和传代 | 第23页 |
| 2.2.4 CRC-CSCs裸鼠皮下成瘤实验 | 第23页 |
| 2.2.5 Alamar Blue法检测细胞生存活力 | 第23页 |
| 2.2.6 肿瘤球形成能力和自我更新能力分析 | 第23-24页 |
| 2.2.7 流式细胞仪检测细胞凋亡(Annexin V/PI双染色法) | 第24页 |
| 2.2.8 蛋白质免疫印迹(Western blot)分析 | 第24页 |
| 2.2.9 荧光显微镜/激光共聚焦显微镜观察(免疫荧光) | 第24-25页 |
| 2.2.10 慢病毒载体构建Notch1过表达的稳定细胞系 | 第25-26页 |
| 2.3 统计学分析 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-49页 |
| 3.1 CRC-CSCs的分离、富集和鉴定 | 第27-32页 |
| 3.1.1 CRC-CSCs的分离和富集 | 第27页 |
| 3.1.2 CRC-CSCs的鉴定 | 第27-32页 |
| 3.2 CD133-Pc介导的体外光动力治疗作用 | 第32-36页 |
| 3.2.1 CD133-Pc PDT对亲本细胞生存活力的差异 | 第32-33页 |
| 3.2.2 CD133-Pc与传统光敏剂对CRC-CSCs生存活力影响的差异 | 第33-35页 |
| 3.2.3 CD133-Pc PDT在不同激光照射强度下的差异 | 第35页 |
| 3.2.4 CD133-Pc PDT在不同时间下CRC-CSCs细胞形态的改变 | 第35-36页 |
| 3.3 CD133-Pc PDT对结肠癌干细胞干性特征的作用 | 第36-40页 |
| 3.3.1 CD133-Pc PDT抑制结肠癌细胞的肿瘤球形成能力 | 第36-37页 |
| 3.3.2 CD133-Pc PDT抑制CRC-CSCs的自我更新能力 | 第37-38页 |
| 3.3.3 CD133-Pc PDT通过Notch信号通路抑制CCLSCs的干性特征 | 第38-40页 |
| 3.4 CD133-Pc PDT诱导结肠癌干细胞程序性死亡 | 第40-49页 |
| 3.4.1 CD133-Pc的内吞作用及亚细胞定位 | 第40-43页 |
| 3.4.2 CD133-Pc在体内靶向肿瘤组织 | 第43-44页 |
| 3.4.3 CD133-Pc PDT生成ROS的能力 | 第44-46页 |
| 3.4.4 CD133-Pc PDT诱导CRC-CSCs的凋亡 | 第46-47页 |
| 3.4.5 CD133-Pc PDT诱导CRC-CSCs的自噬 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 附录1: 英文缩略词索引 | 第56-57页 |
| 附录2: 综述 | 第57-72页 |
| References | 第66-72页 |
| 攻读硕士学位期间的主要成果 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
