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MAPK在H2S缓解番茄NO3-胁迫中的作用研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
缩略词第20-22页
第一章 文献综述第22-51页
    1.1 设施土壤次生盐渍化第22-26页
        1.1.1 土壤次生盐渍化特点第22-23页
        1.1.2 设施土壤次生盐渍化形成的原因第23-25页
            1.1.2.1 不合理施肥第23-24页
            1.1.2.2 不合理灌溉第24页
            1.1.2.3 保护地特殊环境第24-25页
        1.1.3 设施土壤次生盐渍化的危害第25-26页
            1.1.3.1 土壤次生盐渍化对作物土壤的危害第25页
            1.1.3.2 土壤次生盐渍化对作物的影响第25-26页
    1.2 NO_3~-胁迫对设施蔬菜生长的影响第26-28页
        1.2.1 NO_3~-胁迫对对植物生理生化的影响第26-27页
        1.2.2 对植物光合碳代谢的影响第27-28页
    1.3 硫化氢的研究进展第28-36页
        1.3.1 H_2S在植物发育中的作用第28-32页
            1.3.1.1 H_2S与种子萌发第28页
            1.3.1.2 H_2S与根发育第28-29页
            1.3.1.3 H_2S与气孔运动第29-30页
            1.3.1.4 H_2S与光合作用第30页
            1.3.1.5 延缓衰老及延长花期第30-31页
            1.3.1.6 参与生长发育第31页
            1.3.1.7 调节硫代谢第31-32页
        1.3.2 H_2S在植物逆境生理中的作用第32-36页
            1.3.2.1 H_2S与水分胁迫第32-33页
            1.3.2.2 H_2S与盐胁迫第33-34页
            1.3.2.3 H_2S与高温胁迫第34页
            1.3.2.4 H_2S与离子胁迫第34-36页
            1.3.2.5 H_2S与其他胁迫第36页
    1.4 MAPK的研究进展第36-49页
        1.4.1 植物中MAPK级联的组成与分类第37-39页
        1.4.2 MAPK在植物发育中的作用第39-41页
        1.4.3 MAPK在植物在植物逆境生理中的作用第41-46页
        1.4.4 MAPK与其他信号分子的互作第46-48页
        1.4.5 MAPK级联反应的调控机制第48-49页
    1.5 本研究的目的和意义第49-51页
第二章 外源NaHS促进番茄幼苗的生长和缓解NO_3~-胁迫第51-82页
    2.1 材料与方法第52-60页
        2.1.1 材料和试剂第52页
        2.1.2 幼苗培养及处理第52-53页
        2.1.3 测定项目及方法第53-56页
            2.1.3.1 株高、根长、鲜重、干重的测定第53页
            2.1.3.2 叶绿素含量的测定第53页
            2.1.3.3 光合参数的测定第53-54页
            2.1.3.4 MDA含量和H_2O_2含量的测定第54页
            2.1.3.5 抗氧化酶活性的测定第54页
            2.1.3.6 AsA含量和GSH含量的测定第54-55页
            2.1.3.7 氮代谢关键酶活性的测定第55页
            2.1.3.8 L-半胱氨酸脱巯基酶(AtLCD)活性和内源H_2S含量的测定第55-56页
            2.1.3.9 气孔开度的测定第56页
        2.1.4 SlMAPK基因克隆的材料与方法第56-60页
            2.1.4.1 菌种和质粒第56页
            2.1.4.2 酶与试剂第56-57页
            2.1.4.3 植物总RNA提取第57页
            2.1.4.4 植物总RNA纯化第57页
            2.1.4.5 引物合成及PCR扩增SlMAPK基因第57-59页
            2.1.4.6 DNA片段回收第59页
            2.1.4.7 RCR产物的TA克隆第59-60页
            2.1.4.8 植物真核表达载体和原核表达载体的构建第60页
        2.1.5 数据处理与分析第60页
    2.2 结果与分析第60-78页
        2.2.1 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗生长和生理生化特性的影响第60-67页
            2.2.1.1 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗生长的影响第60-62页
            2.2.1.2 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗叶片叶绿素含量的影响第62-63页
            2.2.1.3 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗叶片光合特性的影响第63-64页
            2.2.1.4 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗气孔开度的影响第64页
            2.2.1.5 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗氮代谢关键酶活性及NO_3~-含量的影响第64-65页
            2.2.1.6 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗对抗氧物质AsA和GSH含量的影响第65-66页
            2.2.1.7 外源施加不同浓度NaHS对番茄幼苗L-半胱氨酸脱巯基酶活性及内源H_2S含量的影响第66-67页
        2.2.2 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗生理生化特性的影响第67-74页
            2.2.2.1 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗生长的影响第67-68页
            2.2.2.2 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗叶片叶绿素含量的影响第68-69页
            2.2.2.3 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗叶片光合特性的影响第69-70页
            2.2.2.4 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗膜脂过氧化水平和H_2O_2含量的影响第70-71页
            2.2.2.5 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗抗氧化物酶活性和抗氧化物质含量的影响第71-72页
            2.2.2.6 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗氮代谢关键酶活性的影响第72-73页
            2.2.2.7 外源施加NaHS不同时间对NO_3~-胁迫下番茄幼苗L-半胱氨酸脱巯基酶活性及内源H_2S含量的影响第73-74页
        2.2.3 外源施加NaHS对番茄MAPK基因家族的表达的影响第74-75页
        2.2.4 番茄MAPK基因的克隆及载体构建第75-78页
            2.2.4.1 番茄MAPK基因的克隆第75-76页
            2.2.4.2 植物表达载体和原核表达载体的构建第76-78页
    2.3 讨论第78-82页
第三章 MAPK在H_2S缓解NO_3~-胁迫中的作用第82-100页
    3.1 材料与方法第83-86页
        3.1.1 材料与试剂第83-84页
        3.1.2 幼苗培养及处理第84-85页
        3.1.3 测定项目及方法第85-86页
            3.1.3.1 MDA含量和H_2O_2含量的测定第85页
            3.1.3.2 抗氧化酶活性的测定第85页
            3.1.3.3 AsA含量和GSH含量的测定第85页
            3.1.3.4 L-半胱氨酸脱巯基酶(AtLCD)活性和内源H_2S含量的测定第85-86页
            3.1.3.5 GR、DHAR、MDHAR活性的测定第86页
        3.1.4 数据处理与分析第86页
    3.2 结果与分析第86-97页
        3.2.1 MAPK参与番茄中H_2S对NO_3~-胁迫诱导氧化损伤的缓解作用第86-90页
            3.2.1.1 MAPK抑制剂对H_2S缓解NO_3~-胁迫过程中H_2O_2和MDA含量的影响第86-87页
            3.2.1.2 MAPK抑制剂对H_2S缓解NO_3~-胁迫过程中抗氧化酶活性的影响第87-88页
            3.2.1.3 MAPK抑制剂对H_2S缓解NO_3~-胁迫过程中AsA和GSH含量的影响第88-89页
            3.2.1.4 MAPK抑制剂对H_2S缓解NO_3~-胁迫过程中GR、DHAR和MDHAR的影响第89-90页
            3.2.1.5 MAPK抑制剂对H_2S缓解NO_3~-胁迫过程中L-半胱氨酸脱巯基酶活性及内源H_2S含量的影响第90页
        3.2.2 NO_3~-胁迫下CsNMAPK过表达转基因烟草中H_2S的作用分析第90-97页
            3.2.2.1 外源H_2S供体、清除剂、抑制剂和MAPK抑制剂对硝酸盐胁迫下CsNMAPK过表达转基因烟草中H_2O_2及MDA含量的影响第90-92页
            3.2.2.2 外源H_2S供体、清除剂、抑制剂和MAPK抑制剂对硝酸盐胁迫下CsNMAPK过表达转基因烟草中抗氧化酶活性的影响第92-94页
            3.2.2.3 外源H_2S供体、清除剂、抑制剂和MAPK抑制剂对硝酸盐胁迫下CsNMAPK过表达转基因烟草中抗氧化物质含量影响第94-95页
            3.2.2.4 外源H_2S供体、清除剂、抑制剂和MAPK抑制剂对硝酸盐胁迫下CsNMAPK过表达转基因烟草中GR、DHAR、MDHAR活性的影响第95-96页
            3.2.2.5 外源H_2S供体、清除剂、抑制剂和MAPK抑制剂对硝酸盐胁迫下CsNMAPK过表达转基因烟草中AtLCD活性及H_2S含量的影响第96-97页
    3.3 讨论第97-100页
第四章 L-/D-型半胱氨酸脱巯基酶基因的克隆及过表达转基因烟草的获得第100-108页
    4.1 材料和方法第100-103页
        4.1.1 菌种和质粒第100页
        4.1.2 酶与试剂第100-101页
        4.1.3 植物材料培养第101页
        4.1.4 植物总RNA提取第101页
        4.1.5 植物总RNA纯化第101页
        4.1.6 引物合成及PCR扩增AtLCD 和 SlDCD基因第101页
        4.1.7 DNA片段回收第101页
        4.1.8 PCR产物的TA克隆第101-102页
        4.1.9 植物表达载体的构建第102页
        4.1.10 农杆菌侵染法转化烟草第102-103页
        4.1.11 转基因烟草基因组PCR、RT-PCR检测第103页
    4.2 结果与分析第103-107页
        4.2.1 巢式PCR扩增AtLCD及SlDCD基因第103-104页
        4.2.2 pRI101-AtLCD及pRI101-SlDCD植物表达载体的构建第104-105页
        4.2.3 转基因烟草的基因组PCR检测第105-106页
        4.2.4 SlDCD过表达转基因烟草的生长情况第106-107页
    4.3 讨论第107-108页
第五章 总结和展望第108-110页
    5.1 总结第108-109页
    5.2 展望第109-110页
致谢第110-111页
参考文献第111-137页
附录攻读硕士期间发表论文第137页

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