摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-9页 |
第1章 绪论 | 第19-51页 |
1.1 种植体植入后的组织时序性响应 | 第19-22页 |
1.1.1 危险信号的释放及蛋白吸附 | 第19-20页 |
1.1.2 急性及慢性炎症响应 | 第20-22页 |
1.1.3 组织愈合 | 第22页 |
1.2 巨噬细胞与生物材料的相互作用 | 第22-35页 |
1.2.1 生物材料对巨噬细胞极化的调控 | 第22-33页 |
1.2.2 生物材料引起的炎性响应对骨愈合的影响 | 第33-35页 |
1.2.3 免疫调节生物材料的设计 | 第35页 |
1.3 转化生长因子β | 第35-43页 |
1.3.1 TGF-β1简介 | 第35-37页 |
1.3.2 TGF-β1信号通路 | 第37-38页 |
1.3.3 TGF-β1的免疫调控 | 第38-40页 |
1.3.4 TGF-β1的骨愈合调控 | 第40-43页 |
1.4 M13噬菌体展示技术及应用 | 第43-49页 |
1.4.1 M13噬菌体及其免疫原性 | 第43-44页 |
1.4.2 M13噬菌体展示技术 | 第44-45页 |
1.4.3 M13噬菌体展示技术的应用 | 第45-48页 |
1.4.4 M13噬菌体生物基质的构建 | 第48-49页 |
1.5 本文研究的目的和内容 | 第49-50页 |
1.6 技术路线 | 第50-51页 |
第2章 钛结合肽-噬菌体的淘选及与钛表面作用机制探究 | 第51-73页 |
2.1 引言 | 第51页 |
2.2 材料与方法 | 第51-55页 |
2.2.1 样品制备 | 第51-52页 |
2.2.2 钛结合肽-噬菌体的淘选 | 第52-53页 |
2.2.3 噬菌体的扩增和纯化 | 第53页 |
2.2.4 噬菌体DNA的提取及测序 | 第53-54页 |
2.2.5 钛结合肽-噬菌体的亲和性评价 | 第54页 |
2.2.6 钛结合肽的蛋白结构预测 | 第54-55页 |
2.2.7 钛基底表面表征 | 第55页 |
2.2.8 统计学分析 | 第55页 |
2.3 实验结果 | 第55-68页 |
2.3.1 钛结合肽-噬菌体的淘选结果 | 第55-57页 |
2.3.2 钛结合肽的分析 | 第57-58页 |
2.3.3 钛结合肽-噬菌体的亲和性评价 | 第58-60页 |
2.3.4 TBP54的蛋白结构分析 | 第60页 |
2.3.5 M13噬菌体红外表征 | 第60-61页 |
2.3.6 钛基底表面表征 | 第61-62页 |
2.3.7 TBP54-phage与钛基底作用表征 | 第62-66页 |
2.3.8 钛表面羟基基团作用的探索 | 第66-68页 |
2.4 讨论 | 第68-71页 |
2.5 结论 | 第71-73页 |
第3章 钛表面噬菌体薄膜的制备 | 第73-85页 |
3.1 引言 | 第73页 |
3.2 材料与方法 | 第73-75页 |
3.2.1 噬菌体薄膜的制备 | 第73-74页 |
3.2.2 壳聚糖/噬菌体复合膜的制备 | 第74页 |
3.2.3 噬菌体活性测定 | 第74-75页 |
3.2.4 噬菌体薄膜的表征 | 第75页 |
3.3 结果与讨论 | 第75-84页 |
3.3.1 纯噬菌体膜的表征 | 第75-76页 |
3.3.2 噬菌体/PVP膜的表征 | 第76-82页 |
3.3.3 噬菌体/壳聚糖复合膜的表征 | 第82-84页 |
3.3.4 小结 | 第84页 |
3.4 结论 | 第84-85页 |
第4章 钛表面噬菌体膜对成骨分化及体外矿化的影响 | 第85-101页 |
4.1 引言 | 第85页 |
4.2 材料与方法 | 第85-89页 |
4.2.1 样品制备及表征 | 第85页 |
4.2.2 蛋白吸附评价 | 第85-86页 |
4.2.3 成骨细胞培养 | 第86页 |
4.2.4 荧光染色观察 | 第86页 |
4.2.5 SEM形态观察 | 第86-87页 |
4.2.6 ALP活性测定 | 第87页 |
4.2.7 RT-PCR检测 | 第87-88页 |
4.2.8 体外矿化 | 第88-89页 |
4.2.9 统计学分析 | 第89页 |
4.3 实验结果 | 第89-98页 |
4.3.1 材料表面表征 | 第89-90页 |
4.3.2 蛋白吸附评价 | 第90-91页 |
4.3.3 成骨细胞粘附与铺展 | 第91-95页 |
4.3.4 成骨细胞增殖与分化 | 第95-96页 |
4.3.5 矿化实验 | 第96-98页 |
4.4 讨论 | 第98-99页 |
4.5 结论 | 第99-101页 |
第5章 钛表面噬菌体膜对巨噬细胞功能的调控 | 第101-113页 |
5.1 引言 | 第101页 |
5.2 材料与方法 | 第101-104页 |
5.2.1 样品制备 | 第101-102页 |
5.2.2 巨噬细胞培养 | 第102页 |
5.2.3 荧光染色观察 | 第102页 |
5.2.4 凋亡染色观察 | 第102页 |
5.2.5 SEM形态观察 | 第102-103页 |
5.2.6 流式细胞仪分析 | 第103页 |
5.2.7 ELISA检测 | 第103页 |
5.2.8 统计学分析 | 第103-104页 |
5.3 实验结果 | 第104-110页 |
5.3.1 巨噬细胞增殖活性 | 第104页 |
5.3.2 巨噬细胞粘附与铺展 | 第104-107页 |
5.3.3 巨噬细胞炎症相关因子分泌 | 第107-108页 |
5.3.4 巨噬细胞M1/M2极化 | 第108-110页 |
5.3.5 巨噬细胞凋亡 | 第110页 |
5.4 讨论 | 第110-112页 |
5.5 结论 | 第112-113页 |
第6章 转化生长因子-β1亲和肽的淘选及评价 | 第113-133页 |
6.1 引言 | 第113页 |
6.2 材料与方法 | 第113-117页 |
6.2.1 亲和肽的淘选 | 第113-114页 |
6.2.2 亲和性评价 | 第114页 |
6.2.3 Tβm结构预测 | 第114-115页 |
6.2.4 细胞培养及表征 | 第115-116页 |
6.2.5 Westernblot分析 | 第116-117页 |
6.2.6 统计学分析 | 第117页 |
6.3 实验结果 | 第117-128页 |
6.3.1 TGF-β1亲和肽的淘选结果 | 第117-118页 |
6.3.2 亲和肽Tβms序列分析 | 第118-121页 |
6.3.3 TGF-β1与Tβms亲和性评价 | 第121-124页 |
6.3.4 Tβms对成骨细胞的单独作用 | 第124-125页 |
6.3.5 TGF-β1和Tβms对成骨细胞的协同作用 | 第125-128页 |
6.4 讨论 | 第128-131页 |
6.5 结论 | 第131-133页 |
第7章 TGF-β1亲和肽-噬菌体膜对间充质干细胞成骨分化的调控 | 第133-151页 |
7.1 引言 | 第133页 |
7.2 材料与方法 | 第133-135页 |
7.2.1 样品制备及表征 | 第133-134页 |
7.2.2 亲和性分析 | 第134页 |
7.2.3 MSCs培养及检测 | 第134-135页 |
7.2.4 统计学分析 | 第135页 |
7.3 实验结果 | 第135-147页 |
7.3.1 样品表征 | 第135-136页 |
7.3.2 MSCs粘附与铺展 | 第136-138页 |
7.3.3 TGF-β1分泌及通路表达 | 第138-139页 |
7.3.4 MSCs增殖与分化 | 第139-147页 |
7.4 讨论 | 第147-149页 |
7.5 结论 | 第149-151页 |
第8章 TGF-β1亲和肽-噬菌体膜对巨噬细胞功能的调控 | 第151-179页 |
8.1 引言 | 第151页 |
8.2 材料与方法 | 第151-154页 |
8.2.1 样品制备 | 第151页 |
8.2.2 蛋白吸附 | 第151-152页 |
8.2.3 巨噬细胞培养及检测 | 第152页 |
8.2.4 免疫荧光染色—NF-κBp | 第152页 |
8.2.5 流式细胞仪分析—细胞凋亡 | 第152-153页 |
8.2.6 Westernblot分析 | 第153页 |
8.2.7 RT-PCR分析 | 第153-154页 |
8.2.8 统计学分析 | 第154页 |
8.3 实验结果 | 第154-172页 |
8.3.1 表面蛋白吸附 | 第154-155页 |
8.3.2 巨噬细胞增殖活性 | 第155-156页 |
8.3.3 巨噬细胞粘附与凋亡 | 第156-159页 |
8.3.4 巨噬细胞整合素表达 | 第159-161页 |
8.3.5 巨噬细胞极化表型 | 第161-165页 |
8.3.6 巨噬细胞NF-κB通路表达 | 第165-167页 |
8.3.7 巨噬细胞TGF-β1通路表达 | 第167-169页 |
8.3.8 组织愈合相关基因表达 | 第169-172页 |
8.4 讨论 | 第172-177页 |
8.5 结论 | 第177-179页 |
第9章 钛表面不同噬菌体膜对体内骨整合的影响 | 第179-193页 |
9.1 引言 | 第179页 |
9.2 材料与方法 | 第179-181页 |
9.2.1 样品制备 | 第179页 |
9.2.2 手术过程 | 第179-180页 |
9.2.3 HE切片及染色 | 第180页 |
9.2.4 免疫组化染色 | 第180-181页 |
9.2.5 硬组织切片及染色 | 第181页 |
9.2.6 统计学分析 | 第181页 |
9.3 实验结果 | 第181-190页 |
9.3.1 噬菌体膜表征 | 第181-182页 |
9.3.2 HE染色表征 | 第182-185页 |
9.3.3 巨噬细胞表征 | 第185-188页 |
9.3.4 TGF-β1分泌表征 | 第188-189页 |
9.3.5 骨形成表征 | 第189-190页 |
9.4 讨论 | 第190-192页 |
9.5 结论 | 第192-193页 |
结论与展望 | 第193-195页 |
致谢 | 第195-197页 |
参考文献 | 第197-221页 |
攻读博士学位期间已发表及待发表的论文 | 第221页 |