| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词对照表 | 第8-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-26页 |
| 1.1 棉花概述 | 第13页 |
| 1.2 耐旱、耐盐碱及高温对棉花的影响机理 | 第13-15页 |
| 1.2.1 干旱对棉花的影响及机理 | 第13-14页 |
| 1.2.2 盐碱对棉花的影响及机理 | 第14-15页 |
| 1.2.3 高温对棉花的影响及机理 | 第15页 |
| 1.3 棉花耐旱耐盐的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 棉花抗逆基因的概述 | 第16-20页 |
| 1.4.1 转录因子介绍 | 第16页 |
| 1.4.2 抗逆转录因子分类及特点 | 第16-17页 |
| 1.4.3 ERF/DREB概述 | 第17-18页 |
| 1.4.4 功能基因的概述 | 第18-19页 |
| 1.4.5 Gols功能基因的概述 | 第19-20页 |
| 1.5 棉花遗传转化方法 | 第20-22页 |
| 1.5.1 基因枪法 | 第20-21页 |
| 1.5.2 农杆菌介导法 | 第21页 |
| 1.5.3 花粉管通道法 | 第21-22页 |
| 1.6 转基因材料的获得 | 第22-23页 |
| 1.7 研究意义及思路 | 第23-26页 |
| 第二章 棉花Gols基因的筛选和鉴定 | 第26-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.1.1 转化材料 | 第26页 |
| 2.1.2 基因 | 第26页 |
| 2.1.3 菌种 | 第26页 |
| 2.1.4 质粒载体 | 第26页 |
| 2.1.5 生物信息学软件 | 第26页 |
| 2.1.6 引物及测序 | 第26-27页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.1.8 主要试剂和试剂盒 | 第27-28页 |
| 2.1.9 主要试剂和试剂盒 | 第28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-35页 |
| 2.2.1 常用培养基和溶液配制 | 第28-30页 |
| 2.2.2 棉花肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的生物学信息分析 | 第30页 |
| 2.2.3 基因的筛选 | 第30页 |
| 2.2.4 植物表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.5 蘸花法侵染拟南芥 | 第31-33页 |
| 2.2.6 T_0代转基因拟南芥的筛选 | 第33页 |
| 2.2.7 T_3代转基因拟南芥的抗性测定方法 | 第33页 |
| 2.2.8 T_3代转基因GhGols2-2拟南芥新株系抗旱耐盐性生理指标检测 | 第33-35页 |
| 2.2.9 肌醇半乳糖苷合成酶活性的测定 | 第35页 |
| 2.3 结果分析 | 第35-45页 |
| 2.3.1 棉花肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的克隆及生物学信息分析 | 第35-37页 |
| 2.3.2 Gols2基因进化树构建 | 第37-38页 |
| 2.3.3 棉花肌醇半乳糖苷合成酶基因的筛选 | 第38-39页 |
| 2.3.4 GhGols2-2基因克隆 | 第39-40页 |
| 2.3.5 转基因拟南芥阳性苗的鉴定 | 第40页 |
| 2.3.6 转基因植株的RT-PCR检测 | 第40页 |
| 2.3.7 转基因拟南芥表型分析 | 第40-42页 |
| 2.3.8 胁迫处理对种子发芽率的影响 | 第42-43页 |
| 2.3.9 转基因株系耐旱耐盐生理指标的测定 | 第43-44页 |
| 2.3.10 肌醇半乳糖苷合成酶活性测定 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-47页 |
| 第三章 转KcERF和PeDREB2a基因棉花的创制及分子检测 | 第47-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 3.1.2 基因、相关载体及菌种 | 第47页 |
| 3.1.3 主要引物序列 | 第47-48页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第48页 |
| 3.2 试验方法 | 第48-55页 |
| 3.2.1 培养基和溶液配制 | 第48页 |
| 3.2.2 植物基因组DNA提取 | 第48-49页 |
| 3.2.3 植物RNA的提取 | 第49页 |
| 3.2.4 cDNA的合成 | 第49页 |
| 3.2.5 质粒DNA提取 | 第49-50页 |
| 3.2.6 PCR扩增 | 第50-51页 |
| 3.2.7 DNA切胶回收 | 第51页 |
| 3.2.8 酶切与连接 | 第51-52页 |
| 3.2.9 棉花的遗传转化 | 第52-54页 |
| 3.2.10 非组培农杆菌介导的遗传体系转化棉花 | 第54页 |
| 3.2.11 抗逆转基因棉花的筛选及分子检测 | 第54-55页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第55-60页 |
| 3.3.1 载体筛选 | 第55页 |
| 3.3.2 受体材料 | 第55-56页 |
| 3.3.3 非组培法转化 | 第56-57页 |
| 3.3.4 初筛 | 第57页 |
| 3.3.5 抗旱耐盐分子检测 | 第57-58页 |
| 3.3.6 RT-PCR检测 | 第58页 |
| 3.3.7 棉花杂交 | 第58-59页 |
| 3.3.8 qRT-PCR检测目的基因的表达量 | 第59页 |
| 3.3.9 转基因棉花的田间农艺性状分析 | 第59-60页 |
| 3.4 小结 | 第60-62页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第62-64页 |
| 4.1 结论 | 第62-63页 |
| 4.2 讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第77-78页 |
