| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 球孢白僵菌简介 | 第10-12页 |
| 1.1.1 球孢白僵菌的生物学特性 | 第10页 |
| 1.1.2 球孢白僵菌的致病机理 | 第10-12页 |
| 1.2 金龟子绿僵菌黏着蛋白MAD1的功能和作用 | 第12-14页 |
| 1.2.1 MAD1结构特点 | 第12-13页 |
| 1.2.2 MAD1的主要功能 | 第13-14页 |
| 1.3 原生质体融合技术的研究 | 第14-19页 |
| 1.3.1 原生质体融合的发展历程 | 第14页 |
| 1.3.2 原生质体遗传转化方法 | 第14-16页 |
| 1.3.3 影响真菌原生质体产生的因子 | 第16-18页 |
| 1.3.4 筛选标记 | 第18-19页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第19页 |
| 1.5 技术路线 | 第19-20页 |
| 第2章 Mad1基因的克隆及pHD3-hsp70::Mad1遗传转化载体的构建 | 第20-28页 |
| 2.1 材料和方法 | 第20-25页 |
| 2.1.1 材料 | 第20页 |
| 2.1.2 主要的培养基 | 第20页 |
| 2.1.3 常用缓冲液及贮存液的配制 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要的化学试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第21-22页 |
| 2.1.6 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.2 实验结果 | 第25-28页 |
| 2.2.1 绿僵菌Mad1基因的克隆 | 第25-26页 |
| 2.2.2 pHD3-hsp70::Mad1遗传转化载体的构建 | 第26-28页 |
| 第3章 pHD3-hsp70::Mad1球孢白僵菌遗传转化及分子验证 | 第28-35页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-31页 |
| 3.1.1 材料 | 第28页 |
| 3.1.2 培养基 | 第28页 |
| 3.1.3 检测引物 | 第28页 |
| 3.1.4 方法 | 第28-31页 |
| 3.2 实验结果 | 第31-33页 |
| 3.2.1 球孢白僵菌原生质体的制备 | 第31页 |
| 3.2.2 原生质体再生率 | 第31页 |
| 3.2.3 抗性筛选 | 第31-32页 |
| 3.2.4 球孢白僵菌原生质体转化 | 第32-33页 |
| 3.2.5 转化子继代培养及PCR验证 | 第33页 |
| 3.3 小结 | 第33-35页 |
| 第4章 转Mad1基因球孢白僵菌工程菌株生物学功能验证 | 第35-39页 |
| 4.1 材料与方法 | 第35-36页 |
| 4.1.1 材料 | 第35页 |
| 4.1.2 方法 | 第35-36页 |
| 4.2 实验结果 | 第36-38页 |
| 4.2.1 吸附性验证 | 第36-37页 |
| 4.2.2 毒力检测 | 第37-38页 |
| 4.3 小结 | 第38-39页 |
| 第5章 讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第48-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
