| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-20页 |
| 1.1 研究背景 | 第14-15页 |
| 1.1.1 水体氮污染现状 | 第14页 |
| 1.1.2 氮污染的来源 | 第14页 |
| 1.1.3 氮污染的危害 | 第14-15页 |
| 1.2 污水脱氮技术 | 第15-16页 |
| 1.2.1 传统脱氮技术 | 第15页 |
| 1.2.2 生物脱氮技术 | 第15-16页 |
| 1.3 好氧反硝化脱氮机理 | 第16-17页 |
| 1.3.1 好氧反硝化菌的发现 | 第16页 |
| 1.3.2 好氧反硝化作用机理 | 第16-17页 |
| 1.3.3 好氧反硝化菌生长影响因素 | 第17页 |
| 1.4 氮代谢调控 | 第17-18页 |
| 1.4.1 氮代谢调控蛋白NtrC的研究进展 | 第17页 |
| 1.4.2 NtrC蛋白在代谢调控中的功能 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究目的和意义 | 第18页 |
| 1.6 研究内容和技术路线 | 第18-20页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第18-19页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 反硝化基因启动子区的生物信息学比较分析 | 第20-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20页 |
| 2.1.1 数据库 | 第20页 |
| 2.1.2 应用软件 | 第20页 |
| 2.2 结果与分析 | 第20-25页 |
| 2.3 小结与讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 氮代谢调控蛋白ntrC基因的克隆与序列分析 | 第27-38页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第27页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第27页 |
| 3.2 实验方法 | 第27-31页 |
| 3.2.1 细菌基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
| 3.2.2 质粒DNA的提取 | 第28页 |
| 3.2.3 JM110感受态的制备 | 第28-29页 |
| 3.2.4 DNA片段的凝胶回收 | 第29页 |
| 3.2.5 TA克隆及转化 | 第29-30页 |
| 3.2.6 氮代谢调控蛋白基因ntrC的克隆 | 第30页 |
| 3.2.7 氮代谢调控蛋白基因ntrC的测序及序列分析 | 第30-31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-37页 |
| 3.3.1 氮代谢调控蛋白基因的克隆 | 第31-33页 |
| 3.3.2 NP1氮代谢调控蛋白的序列比对 | 第33-34页 |
| 3.3.3 NP1氮代谢调控蛋白的二级结构分析 | 第34-36页 |
| 3.3.4 NP1氮代谢调控蛋白的三级结构分析 | 第36-37页 |
| 3.4 小结与讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 ntrC基因敲除对NP1氮代谢的影响 | 第38-52页 |
| 4.1 实验材料与仪器 | 第38页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第38页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第38页 |
| 4.2 实验方法 | 第38-43页 |
| 4.2.1 载体构建示意图 | 第38-39页 |
| 4.2.2 pGEM-T-ntrC-Tc的构建 | 第39页 |
| 4.2.3 pJQ200SK-ntrC-Tc的构建 | 第39-40页 |
| 4.2.4 DNA片段的纯化 | 第40页 |
| 4.2.5 NP1电转感受态的制备 | 第40页 |
| 4.2.6 NP1的电击转化 | 第40页 |
| 4.2.7 细菌RNA的提取 | 第40-41页 |
| 4.2.8 第一链cDNA的合成 | 第41-42页 |
| 4.2.9 qRT-PCR实验 | 第42-43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-50页 |
| 4.3.1 ntrC基因敲除质粒的构建与鉴定 | 第43-47页 |
| 4.3.2 ntrC基因敲除菌株的筛选 | 第47-48页 |
| 4.3.3 ntrC基因敲除对脱氮过程的影响 | 第48-50页 |
| 4.4 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 ntrC基因过表达对NP1氮代谢的影响 | 第52-62页 |
| 5.1 实验材料与仪器 | 第52页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第52页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 5.2.1 载体构建示意图 | 第52-53页 |
| 5.2.2 乳酸脱氢酶dld启动子的克隆 | 第53页 |
| 5.2.3 dld-ntrC基因片段的获得 | 第53-54页 |
| 5.2.4 pBBR3-dld-ntrC的构建 | 第54页 |
| 5.2.5 其他方法 | 第54页 |
| 5.3 结果与分析 | 第54-60页 |
| 5.3.1 ntrC基因过表达质粒的构建与鉴定 | 第54-57页 |
| 5.3.2 ntrC基因过表达菌株的筛选 | 第57-58页 |
| 5.3.3 ntrC基因过表达对脱氮过程的影响 | 第58-60页 |
| 5.4 小结与讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 ntrC基因功能互补对NP1氮代谢的影响 | 第62-66页 |
| 6.1 实验材料与仪器 | 第62页 |
| 6.1.1 实验材料 | 第62页 |
| 6.1.2 实验仪器 | 第62页 |
| 6.2 实验方法 | 第62页 |
| 6.3 结果与分析 | 第62-64页 |
| 6.3.1 ntrC基因功能互补质粒的构建与鉴定 | 第62页 |
| 6.3.2 ntrC基因功能互补菌株的筛选 | 第62-63页 |
| 6.3.3 ntrC基因功能互补对脱氮过程的影响 | 第63-64页 |
| 6.4 小结与讨论 | 第64-66页 |
| 第七章 全文结论 | 第66-67页 |
| 7.1 反硝化基因启动子区的生物信息学比较分析 | 第66页 |
| 7.2 氮代谢调控蛋白ntrC基因的克隆与序列分析 | 第66页 |
| 7.3 ntrC基因敲除菌株氮代谢分析 | 第66页 |
| 7.4 ntrC基因过表达菌株氮代谢分析及功能互补 | 第66页 |
| 7.5 ntrC功能互补菌株氮代谢分析 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |
