| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 1 文献综述 | 第9-16页 |
| 1.1 鹅肥肝的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 SCD基因的研究概况 | 第10-11页 |
| 1.2.1 SCD1基因的结构和分布特点 | 第10页 |
| 1.2.2 SCD1基因的功能 | 第10-11页 |
| 1.3 miRNA概况 | 第11-15页 |
| 1.3.1 miRNA的产生 | 第12页 |
| 1.3.2 miRNA的作用机制 | 第12-13页 |
| 1.3.3 miRNA的研究方法 | 第13-15页 |
| 1.4 实验目的、意义及研究内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-20页 |
| 2.1.1 实验动物及饲养管理 | 第16页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第16-17页 |
| 2.1.3 主要实验试剂及试剂盒 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.1.5 引物设计 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法及步骤 | 第20-33页 |
| 2.2.1 血液生化指标的测定 | 第20页 |
| 2.2.2 脂肪酸含量测定 | 第20页 |
| 2.2.3 总RNA提取前的准备 | 第20页 |
| 2.2.4 总RNA提取 | 第20-21页 |
| 2.2.5 总RNA检测 | 第21-22页 |
| 2.2.6 RNA反转录为cDNA | 第22页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR反应 | 第22-23页 |
| 2.2.8 miRNA反转录 | 第23-24页 |
| 2.2.9 miRNA荧光定量PCR | 第24页 |
| 2.2.10 预测调控鹅SCD1基因的miRNA | 第24-25页 |
| 2.2.11 鹅血细胞基因组DNA提取 | 第25页 |
| 2.2.12 鹅miR-30b和miR-30a-5p前体扩增 | 第25-26页 |
| 2.2.13 PCR产物切胶回收 | 第26页 |
| 2.2.14 PCR产物的T载体连接 | 第26-27页 |
| 2.2.15 连接产物转化及阳性克隆菌鉴定 | 第27页 |
| 2.2.16 序列分析 | 第27页 |
| 2.2.17 miRNA靶基因靶位点PCR | 第27页 |
| 2.2.18 载体质粒回收 | 第27-28页 |
| 2.2.19 回收PCR产物及载体双酶切 | 第28页 |
| 2.2.20 酶切产物连接 | 第28页 |
| 2.2.21 连接产物转化及阳性克隆菌鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.22 转染用质粒提取 | 第29页 |
| 2.2.23 细胞复苏、培养、传代及冻存 | 第29-30页 |
| 2.2.24 CHO细胞转染 | 第30-31页 |
| 2.2.25 CHO细胞总RNA提取 | 第31页 |
| 2.2.26 双荧光素酶活性检测 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-41页 |
| 3.1 朗德鹅填饲各阶段肝脏重量及肝体比变化规律 | 第33页 |
| 3.2 朗德鹅SCD1基因在填饲不同阶段表达量变化 | 第33-34页 |
| 3.3 SCD1基因与棕榈油酸,油酸,甘油三酯,胆固醇和VLDL的相关性分析 | 第34-35页 |
| 3.4 调控鹅SCD1基因的miRNA预测 | 第35-36页 |
| 3.5 填饲不同阶段各miRNA的表达规律 | 第36-38页 |
| 3.6 miR-30b和miR-30a-5p前体序列扩增 | 第38-39页 |
| 3.7 靶序列区扩增及载体构建 | 第39页 |
| 3.8 SCD1基因与各miRNA靶向关系验证 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| 4.1 SCD1基因在鹅肝脏脂肪代谢中的作用 | 第41页 |
| 4.2 SCD1基因与常规指标的关系 | 第41-42页 |
| 4.3 影响SCD1基因表达调控因素 | 第42页 |
| 4.4 miRNA靶向调控SCD1基因在鹅肥肝中的作用 | 第42-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第53-54页 |
