| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-29页 |
| 1.1 微丝骨架简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 微丝骨架 | 第12页 |
| 1.1.2 肌动蛋白结合蛋白 | 第12-14页 |
| 1.2 花粉管简介 | 第14-17页 |
| 1.2.1 微丝在花粉管中的分布 | 第14-15页 |
| 1.2.2 影响花粉管中微丝骨架的信号分子 | 第15-17页 |
| 1.3 植物中肌动蛋白结合蛋白的研究概况 | 第17-20页 |
| 1.3.1 profilin | 第17-18页 |
| 1.3.2 Villin/gelsolin/fragmin超家族 | 第18-19页 |
| 1.3.3 ADF/Cofilin | 第19页 |
| 1.3.4 Arp2/3 Complex | 第19-20页 |
| 1.4 植物中微丝成束蛋白研究近况 | 第20-28页 |
| 1.4.1 Formins | 第21-22页 |
| 1.4.2 Fimbrins | 第22-23页 |
| 1.4.3 Villins | 第23-24页 |
| 1.4.4 LIM蛋白 | 第24-25页 |
| 1.4.5 THRUMIN1 | 第25页 |
| 1.4.6 囊泡中的H~+-ATPases B亚基 | 第25页 |
| 1.4.7 气孔关闭相关的微丝结合蛋白(SCAB) | 第25-26页 |
| 1.4.8 茄属花粉特异成束蛋白(SB401) | 第26页 |
| 1.4.9 拟南芥微丝解聚因子9(AtADF9) | 第26-28页 |
| 本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 第二章 材料和方法 | 第29-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 动物材料和植物材料 | 第29页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第29页 |
| 2.1.3 溶液 | 第29-30页 |
| 2.1.3.1 His标签蛋白纯化相关溶液 | 第29页 |
| 2.1.3.2 GST标签蛋白纯化相关溶液 | 第29页 |
| 2.1.3.3 拟南芥花粉体外萌发相关溶液 | 第29页 |
| 2.1.3.4 拟南芥花粉管微丝染色相关溶液 | 第29-30页 |
| 2.1.3.5 蛋白胶相关溶液 | 第30页 |
| 2.1.3.6 肌动蛋白标记的相关溶液 | 第30页 |
| 2.1.3.7 组织定位染色相关溶液 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-39页 |
| 2.2.1 植物组织中RNA的提取和反转录 | 第30-31页 |
| 2.2.2 DNA的提取 | 第31页 |
| 2.2.3 载体构建、转化及鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.4 重组蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.5 肌动蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.6 利用Pyrene进行肌动蛋白标记 | 第34页 |
| 2.2.7 体外生物化学功能分析 | 第34-35页 |
| 2.2.8 体内生理功能分析 | 第35-37页 |
| 2.2.9 浸花法筛选转基因植株 | 第37页 |
| 2.2.10 GUS组织化学染色 | 第37-38页 |
| 2.2.11 统计分析及图像处理 | 第38-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-79页 |
| 3.1 CROLIN1的功能预测与分析 | 第39-46页 |
| 3.1.1 CROLIN家族的鉴定 | 第39-41页 |
| 3.1.2 CROLIN1生物学功能与基因表达 | 第41-43页 |
| 3.1.3 CROLIN1相关的进化分析 | 第43-45页 |
| 3.1.4 CROLIN家族其他成员的生物信息学分析 | 第45-46页 |
| 3.2 CROLIN 1相关基因扩增 | 第46-48页 |
| 3.2.1 CROLIN 1全长基因扩增 | 第46-47页 |
| 3.2.2 交联结构域基因扩增 | 第47-48页 |
| 3.2.3 CROLIN 1启动子的扩增 | 第48页 |
| 3.3 CROLIN 1的原核表达 | 第48-51页 |
| 3.3.1 CROLIN 1原核表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 3.3.2 CROLIN 1蛋白的诱导与纯化 | 第49-51页 |
| 3.4 CROLIN 1体外生物化学功能分析 | 第51-64页 |
| 3.4.1 CROLIN 1与微丝结合 | 第51-54页 |
| 3.4.2 CROLIN 1促进微丝成束 | 第54-58页 |
| 3.4.3 CROLIN 1体外抑制微丝的解聚 | 第58-60页 |
| 3.4.4 缺失交联结构域区域的功能分析 | 第60页 |
| 3.4.5 交联结构域的功能分析 | 第60-63页 |
| 3.4.6 CROLIN 1形成多聚体分析 | 第63-64页 |
| 3.5 CROLIN 1体内生理功能分析 | 第64-75页 |
| 3.5.1 CROLIN 1真核表达载体的构建 | 第64-65页 |
| 3.5.2 CROLIN 1组织定位结果分析 | 第65-67页 |
| 3.5.3 突变体和转基因植株中CROLIN 1表达情况鉴定 | 第67-69页 |
| 3.5.4 CROLIN 1功能缺失后花粉对Lat B敏感 | 第69-71页 |
| 3.5.5 CROLIN 1功能缺失导致花粉管内部微丝骨架对Lat B敏感 | 第71-73页 |
| 3.5.6 CROLIN家族成员功能缺失导致花粉萌发率降低 | 第73-75页 |
| 3.6 讨论 | 第75-79页 |
| 3.6.1 CROLIN是一种新的植物中特有的微丝成束蛋白 | 第75-76页 |
| 3.6.2 CROLIN 1在体外能够通过形成高级微丝结构进而稳定微丝 | 第76-77页 |
| 3.6.3 CROLIN 1能够在花粉管中稳定微丝 | 第77-79页 |
| 第四章 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 在学期间的研究成果 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
