| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 Th17细胞的起源及其重要功能 | 第10-12页 |
| 1.1.1 辅助性T(Th)细胞简介 | 第10页 |
| 1.1.2 Th17细胞的特征性细胞因子及其功能 | 第10-11页 |
| 1.1.3 哺乳动物中诱导Th17细胞分化的关键因子 | 第11-12页 |
| 1.2 IL-17家族成员及其免疫功能 | 第12-14页 |
| 1.2.1 IL-17的发现 | 第12页 |
| 1.2.2 IL-17的家族成员 | 第12-13页 |
| 1.2.3 IL-17受体家族 | 第13页 |
| 1.2.4 IL-17的信号转导与免疫相关功能 | 第13-14页 |
| 1.3 硬骨鱼中Th17细胞及IL-17家族的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.4 本文研究意义及内容 | 第15-16页 |
| 第二章 草鱼头肾白细胞中细胞因子调节IL-17A/F1及其受体的基因表达和相关信号通路 | 第16-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.2 实验方法与操作 | 第16-19页 |
| 2.2.1 草鱼头肾白细胞(HKLs)的分离及培养 | 第16页 |
| 2.2.2 不同细胞因子和信号通路抑制剂处理HKLs | 第16-17页 |
| 2.2.3 总RNA提取 | 第17页 |
| 2.2.4 cDNA模板的制备 | 第17页 |
| 2.2.5 实时荧光定量PCR | 第17-18页 |
| 2.2.6 数据统计与分析 | 第18-19页 |
| 2.3 实验结果分析 | 第19-26页 |
| 2.3.1 IL-21对草鱼IL-17A/F1及其受体IL-17RA、IL-17RCmRNA表达的影响和相关信号通路 | 第19-21页 |
| 2.3.2 IL-6刺激草鱼IL-17A/F1及其受体IL-17RA、IL-17RCmRNA的表达和相关信号通路 | 第21-23页 |
| 2.3.3 IL-1β诱导IL-17A/F1及其受体IL-17RA、IL-17RCmRNA的表达分析和相关信号通路 | 第23-24页 |
| 2.3.4 TGF-β1抑制IL-17A/F1及其受体IL-17RA、IL-17RCmRNA的表达 | 第24-26页 |
| 2.4 讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 不同细胞因子的联合作用对草鱼头肾白细胞中IL-17A/F1基因表达的影响 | 第28-31页 |
| 3.1 实验材料 | 第28页 |
| 3.2 实验方法与操作 | 第28页 |
| 3.2.1 草鱼头肾白细胞(HKLs)的分离及培养 | 第28页 |
| 3.2.2 使用不同的细胞因子处理HKLs | 第28页 |
| 3.2.3 RNA提取及cDNA模板的制备 | 第28页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR | 第28页 |
| 3.2.5 数据统计与分析 | 第28页 |
| 3.3 实验结果分析 | 第28-30页 |
| 3.3.1 IL-21与IL-1β的联合作用对IL-17A/F1基因表达的影响 | 第28-29页 |
| 3.3.2 IL-21与TGF-β1的联合作用对IL-17A/F1基因表达的影响 | 第29-30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-31页 |
| 第四章 不同细胞因子处理和体内外炎症条件下草鱼IL-17A/F1的分泌检测 | 第31-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第31页 |
| 4.1.1 IL-17A/F1菌株 | 第31页 |
| 4.1.2 实验中主要溶液的配制 | 第31页 |
| 4.1.3 草鱼 | 第31页 |
| 4.2 实验方法与操作 | 第31-34页 |
| 4.2.1 IL-17A/F1重组蛋白的真核表达与纯化 | 第31-32页 |
| 4.2.2 草鱼IL-17A/F1多克隆抗体的制备 | 第32页 |
| 4.2.3 蛋白质免疫印迹法 | 第32-33页 |
| 4.2.4 利用棋盘法建立草鱼IL-17A/F1竞争-抑制酶连免疫吸附实验方法 | 第33页 |
| 4.2.5 草鱼头肾淋巴细胞(HKLs)的分选及培养 | 第33页 |
| 4.2.6 使用不同的细胞因子处理HKLs | 第33-34页 |
| 4.2.7 嗜水气单胞菌的培养 | 第34页 |
| 4.2.8 嗜水气单胞菌感染草鱼 | 第34页 |
| 4.2.9 ELISA方法检测IL-17A/F1的分泌 | 第34页 |
| 4.2.10 数据统计与分析 | 第34页 |
| 4.3 实验结果分析 | 第34-40页 |
| 4.3.1 草鱼IL-17A/F1多克隆抗体具有特异性 | 第34-35页 |
| 4.3.2 草鱼IL-17A/F1竞争-抑制酶连免疫吸附实验方法建立 | 第35-36页 |
| 4.3.3 不同细胞因子处理对草鱼头肾白细胞分泌IL-17A/F1的影响 | 第36-39页 |
| 4.3.4 体内外炎症条件下草鱼IL-17A/F1的分泌 | 第39-40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第五章 结论与展望 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第51页 |
