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苜蓿中华根瘤菌CCNWSX0020抗铜基因的克隆与功能验证

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 文献综述第12-24页
   ·引言第12页
   ·根瘤菌及其重金属抗性研究概况第12-14页
     ·根瘤菌在农业生产中的地位第13页
     ·根瘤菌及根瘤菌-豆科植物共生体系对重金属抗性的研究第13-14页
   ·重金属及其污染土壤概况第14-15页
     ·重金属及生物学效应第14-15页
     ·土壤重金属污染的特点第15页
   ·微生物对重金属的抗性研究概况第15-18页
     ·重金属对微生物的毒性效应第15-16页
     ·微生物对重金属的抗性机理和解毒机制第16-17页
     ·微生物抗重金属基因研究第17-18页
   ·微生物的铜抗性机理第18-21页
     ·细菌抗铜作用方式及其抗性基因第18-19页
     ·耐铜基因的调节第19-21页
   ·转座子标签技术第21-22页
     ·转座子标签技术在分析未知基因上的优越性第21页
     ·转座子标签技术的应用第21-22页
   ·研究内容及技术路线第22-24页
     ·研究内容第22页
     ·实验方案及技术路线第22-24页
第二章 S. meliloti CCNWSX0020 铜敏感性突变体的筛选及其特性第24-40页
   ·引言第24页
   ·材料与方法第24-32页
     ·材料第24-28页
     ·实验方法第28-32页
   ·结果与分析第32-38页
     ·S. meliloti CCNWSX002 对不同重金属的抗性水平第32页
     ·S. meliloti CNWSX0020 对不同抗生素的抗性水平第32-33页
     ·突变体筛选培养基的选择第33-34页
     ·pRL1063a 正确性鉴定第34页
     ·突变体库的建立第34-35页
     ·突变体的分子检测第35-36页
     ·铜敏感性突变株的筛选第36-37页
     ·铜敏感突变株的生长状况第37页
     ·重金属对铜敏感突变株的生长状况影响第37-38页
   ·讨论第38-40页
第三章 S. meliloti CCNWSX0020 抗铜相关基因序列分析第40-74页
   ·引言第40页
   ·材料与方法第40-45页
     ·材料第40-41页
     ·实验方法第41-45页
   ·结果与分析第45-71页
     ·突变株基因组酶切、自连和转化第45-47页
     ·突变株单一插入位点的确定第47页
     ·Tn5-1063a 侧翼DNA 序列的测序及插入基因确定第47页
     ·插入基因的序列分析及其蛋白同源性比较第47-71页
   ·讨论第71-74页
第四章 突变基因的克隆与功能互补第74-80页
   ·引言第74页
   ·材料与方法第74-76页
     ·材料第74-75页
     ·实验方法第75-76页
   ·结果与分析第76-79页
     ·S.meliloti CCNWSX0020 lpxXL、CueR、copB 和fixI1 基因全长的获得第76-77页
     ·lpxXL、CueR、copB 和fixI1 与重组质粒pBBR1MCS-5 的构建第77-78页
     ·lpxXL、CueR、copB 和fixI1 与其相应突变株的互补分析第78-79页
   ·讨论第79-80页
第五章 铜敏感性突变株对宿主植物结瘤和植物生长的影响第80-90页
   ·引言第80页
   ·材料与方法第80-83页
     ·材料第80-81页
     ·实验方法第81-83页
   ·结果与分析第83-88页
     ·突变株对宿主植物结瘤和生长的影响第83-84页
     ·铜胁迫下突变株对宿主植物生长的影响第84-87页
     ·突变株对宿主植物根茎铜含量的影响第87-88页
   ·讨论第88-90页
第六章 结论与创新第90-93页
   ·结论第90-91页
     ·S. meliloti CCNWSX0020 的抗性能力第90页
     ·突变体库的建立和铜敏感性突变株的筛选及特性第90页
     ·Tn5-1063a 插入位点的侧翼序列分析第90页
     ·功能互补实验第90页
     ·突变株对水培植物结瘤和生长的影响第90-91页
     ·铜胁迫下突变株对盆栽植物生长和铜含量的影响第91页
   ·创新点第91页
   ·展望第91-93页
参考文献第93-103页
附录第103-105页
缩略词第105-106页
致谢第106-107页
作者简介第107页

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