| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 课题背景 | 第10-11页 |
| 1.1.1 偶氮染料的简介 | 第10页 |
| 1.1.2 偶氮染料的危害 | 第10-11页 |
| 1.2 偶氮还原酶的研究现状 | 第11-13页 |
| 1.2.1 偶氮还原酶简介和反应机理 | 第11-12页 |
| 1.2.2 偶氮还原酶的研究趋势 | 第12-13页 |
| 1.3 二氧化钛光催化处理有机污染物的研究现状 | 第13-15页 |
| 1.3.1 TiO2光催化氧化的原理 | 第13-14页 |
| 1.3.2 二氧化钛光催化氧化技术研究概述 | 第14-15页 |
| 1.4 研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 pET-28a(+)-azor重组质粒的构建、表达及酶活检测 | 第16-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-19页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第16-17页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要试剂及相关配制 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 大肠杆菌AzoR原核表达载体的构建 | 第19-22页 |
| 2.2.2 感受态细胞的转化及AzoR的诱导表达和纯化 | 第22-25页 |
| 2.2.3 全细胞的活性检测 | 第25页 |
| 2.2.4 纯化后的AzoR酶活检测 | 第25-26页 |
| 2.3 实验结果及讨论 | 第26-33页 |
| 2.3.1 azor基因PCR和双酶切连接及测序结果 | 第26-29页 |
| 2.3.2 AzoR的诱导表达可溶性鉴定及纯化 | 第29页 |
| 2.3.3 基因工程菌全细胞降解偶氮染料 | 第29-32页 |
| 2.3.4 AzoR的活性及稳态动力学分析 | 第32-33页 |
| 2.4 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 偶氮还原酶R59X点饱和突变文库的构建及筛选方法的初步研究 | 第34-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-36页 |
| 3.1.1 菌种和质粒 | 第34页 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 | 第34-35页 |
| 3.1.3 主要试剂及相关配制 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 R59X点饱和突变文库的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.2 R59X点饱和突变文库的酶活筛选 | 第37-38页 |
| 3.3 实验结果和分析 | 第38-40页 |
| 3.3.1 点饱和突变结果 | 第38-39页 |
| 3.3.2 R59X点饱和突变文库的酶活筛选结果 | 第39-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第四章 偶氮还原酶的内源荧光特性 | 第41-46页 |
| 4.1 实验材料 | 第41-42页 |
| 4.1.1 主要仪器和设备 | 第41-42页 |
| 4.1.2 主要试剂及相关配制 | 第42页 |
| 4.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 4.2.1 偶氮还原酶的内源荧光 | 第42页 |
| 4.2.2 蛋白浓度对荧光光谱的影响 | 第42页 |
| 4.2.3 NADH滴定AzoR的实验 | 第42-43页 |
| 4.3 实验结果 | 第43-45页 |
| 4.3.1 AzoR的内源荧光及FMN荧光光谱 | 第43-44页 |
| 4.3.2 稀释对于AzoR荧光光谱的影响 | 第44-45页 |
| 4.3.3 NADH的加入对于AzoR荧光特性的影响 | 第45页 |
| 4.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第五章 二氧化钛光催化降解偶氮染料的研究 | 第46-51页 |
| 5.1 实验材料 | 第46页 |
| 5.1.1 主要仪器和设备 | 第46页 |
| 5.1.2 主要试剂及相关配制 | 第46页 |
| 5.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 5.2.1 搭建光催化装置 | 第46-47页 |
| 5.2.2 偶氮染料的光催化降解 | 第47-48页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第48-50页 |
| 5.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第六章 结论 | 第51-53页 |
| 6.1 总结 | 第51页 |
| 6.2 创新点 | 第51-52页 |
| 6.3 展望 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第57-58页 |
