| 致谢 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述及研究背景 | 第15-32页 |
| 1.1 西瓜枯萎病概述 | 第15-18页 |
| 1.1.1 病害症状 | 第15-16页 |
| 1.1.2 病菌生理小种分化 | 第16页 |
| 1.1.3 西瓜枯萎病的防治方法研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2 尖孢镰刀菌致病基因及其机理研究进展 | 第18-23页 |
| 1.2.1 尖孢镰刀菌致病基因研究方法 | 第19-21页 |
| 1.2.1.1 插入诱变 | 第19-20页 |
| 1.2.1.2 转录组学 | 第20-21页 |
| 1.2.2 尖孢镰刀菌致病相关基因及其机理 | 第21-23页 |
| 1.2.2.1 转录因子 | 第21-22页 |
| 1.2.2.2 无毒与效应蛋白 | 第22-23页 |
| 1.3 Mediator complex在真菌中的研究进展 | 第23-30页 |
| 1.3.1 Mediator complex的结构特点 | 第23-24页 |
| 1.3.2 Mediator complex与辅激活因子互作 | 第24-25页 |
| 1.3.3 Mediator complex与一般转录因子的互作 | 第25-27页 |
| 1.3.4 Mediator complex与RNA聚合酶Ⅱ互作 | 第27页 |
| 1.3.5 Mediator complex与CDK8之间的互作 | 第27-28页 |
| 1.3.6 Mediator complex在基因转录过程中的作用 | 第28-30页 |
| 1.3.7 Mediator complex在转录起始后的功能 | 第30页 |
| 1.4 本研究的目的意义及主要内容 | 第30-32页 |
| 1.4.1 研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 1.4.2 研究的主要内容 | 第31-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-42页 |
| 2.1 西瓜和甜瓜真菌病害防治试验 | 第32-33页 |
| 2.1.1 供试药剂 | 第32页 |
| 2.1.2 试验地点、供试作物品种及试验设计 | 第32页 |
| 2.1.3 试验设计 | 第32-33页 |
| 2.1.4 调查方法及调查时间 | 第33页 |
| 2.2 农杆菌介导的西瓜枯萎病菌转化方法 | 第33-35页 |
| 2.2.1 待转化菌液的制备 | 第33-34页 |
| 2.2.2 转化子的筛选与保存 | 第34页 |
| 2.2.3 西瓜枯萎病的接菌方法 | 第34页 |
| 2.2.4 突变体致病性测定方法 | 第34-35页 |
| 2.2.5 西瓜枯萎病分级方法 | 第35页 |
| 2.2.6 TAIL-PCR技术 | 第35页 |
| 2.3 西瓜枯萎病菌原生质体转化方法 | 第35-36页 |
| 2.3.1 分生孢子的制备 | 第35页 |
| 2.3.2 幼殖体培养 | 第35-36页 |
| 2.3.3 原生质体的制备 | 第36页 |
| 2.3.4 原生质体转化 | 第36页 |
| 2.4 基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
| 2.4.1 小量提取法 | 第36-37页 |
| 2.4.2 大量提取法 | 第37页 |
| 2.5 总RNA的提取与表达量分析 | 第37-38页 |
| 2.5.1 西瓜枯萎病菌总RNA的提取 | 第37-38页 |
| 2.5.2 cDNA的合成 | 第38页 |
| 2.5.3 基因表达量分析 | 第38页 |
| 2.6 西瓜枯萎病菌生物学性状测定实验 | 第38-39页 |
| 2.6.1 西瓜枯萎病菌菌落形态观察及生长速率测定 | 第38页 |
| 2.6.2 西瓜枯萎病菌孢子产量测定 | 第38-39页 |
| 2.6.3 西瓜枯萎病菌孢子萌发及萌发率测定 | 第39页 |
| 2.6.4 西瓜枯萎病菌孢子大小和隔膜数测定 | 第39页 |
| 2.6.5 洋葱表皮穿透实验 | 第39页 |
| 2.7 西瓜枯萎病菌基因组DNA Southern杂交分析 | 第39-42页 |
| 2.7.1 DNA杂交探针的制备 | 第39-40页 |
| 2.7.2 基因组DNA的消化、电泳与变性 | 第40页 |
| 2.7.3 凝胶处理与印迹 | 第40页 |
| 2.7.4 印迹转移及杂交 | 第40-41页 |
| 2.7.5 洗膜和免疫检测 | 第41-42页 |
| 第三章 结果与分析 | 第42-82页 |
| 3.1 西瓜和甜瓜真菌病害防治试验试验结果 | 第42-46页 |
| 3.1.1 诱抗剂A101和A102对西甜瓜生长无显著影响 | 第42页 |
| 3.1.2 诱抗剂A101和A102对大棚西甜瓜枯萎病的防治效果 | 第42-44页 |
| 3.1.3 诱抗剂A101和A102对西甜瓜白粉病的防治效果 | 第44页 |
| 3.1.4 诱抗剂A101和A102对西甜瓜产量与品质的影响 | 第44-46页 |
| 3.2 西瓜枯萎病菌T-DNA随机插入突变体库的建立 | 第46-48页 |
| 3.2.1 西瓜枯萎病菌FON随机插入突变体的筛选 | 第46页 |
| 3.2.2 西瓜枯萎病菌随机插入转化子的致病性测定 | 第46-48页 |
| 3.2.3 TAIL-PCR扩增T-DNA的侧翼序列 | 第48页 |
| 3.3 西瓜枯萎病菌FoCdk8基因功能研究 | 第48-57页 |
| 3.3.1 FoCdk8基因序列分析 | 第48-49页 |
| 3.3.2 突变体的获得 | 第49-51页 |
| 3.3.3 FoCdk8基因缺失突变体表型分析 | 第51-57页 |
| 3.3.3.1 FoCdk8基因敲除对FON菌落形态及孢子产量的影响 | 第51-52页 |
| 3.3.3.2 FoCdk8基因敲除对FON孢子形态及大小的影响 | 第52-54页 |
| 3.3.3.3 FoCdk8基因敲除对FON孢子萌发的影响 | 第54页 |
| 3.3.3.4 FoCdk8基因敲除对FON致病性的影响 | 第54-56页 |
| 3.3.3.5 FoCdk8基因对FON侵入能力的影响 | 第56页 |
| 3.3.3.6 FoCdk8具有负调控基因表达的功能 | 第56-57页 |
| 3.4 西瓜枯萎病菌FoCycc基因功能研究 | 第57-64页 |
| 3.4.1 FoCycc基因序列分析 | 第57-58页 |
| 3.4.2 突变体的获得 | 第58-59页 |
| 3.4.3 FoCycc突变体表型分析 | 第59-64页 |
| 3.4.3.1 FoCycc基因敲除对FON菌落形态及产孢量的影响 | 第59-61页 |
| 3.4.3.2 FoCycc基因对FON孢子形态及大小的影响 | 第61页 |
| 3.4.3.3 FoCycc基因敲除对FON致病性的影响 | 第61-63页 |
| 3.4.3.4 FoCycc基因对FON致病相关基因的调控功能 | 第63-64页 |
| 3.5 西瓜枯萎病菌Fomed10基因功能研究 | 第64-73页 |
| 3.5.1 Fomed10基因序列分析 | 第64-65页 |
| 3.5.2 突变体的获得 | 第65页 |
| 3.5.3 Fomed10突变体表型分析 | 第65-73页 |
| 3.5.3.1 Fomed10基因敲除对FON菌落形态及产孢量的影响 | 第65-68页 |
| 3.5.3.2 △Fomed10-0204突变体菌株胁迫压力测定 | 第68-69页 |
| 3.5.3.3 Fomed10基因对FON孢子萌发的影响 | 第69-70页 |
| 3.5.3.4 Fomed10基因敲除对FON致病性的影响 | 第70-72页 |
| 3.5.3.5 Fomed10基因敲除对FON侵入能力的影响 | 第72-73页 |
| 3.6 西瓜枯萎病菌Fomed19基因功能研究 | 第73-82页 |
| 3.6.1 Fomed19基因序列分析 | 第73-74页 |
| 3.6.2 突变体的获得 | 第74-75页 |
| 3.6.3 Fomed19突变体表型分析 | 第75-82页 |
| 3.6.3.1 Fomed19基因敲除对FON菌落形态和产孢的影响 | 第75-76页 |
| 3.6.3.2 Fomed19对FON孢子形态、大小及萌发的影响 | 第76-78页 |
| 3.6.3.3 △Fomed19-0111突变体菌株胁迫压力测定 | 第78-79页 |
| 3.6.3.4 Fomed19基因敲除对FON致病性的影响 | 第79-82页 |
| 第四章 小结与讨论 | 第82-85页 |
| 4.1 全文小结 | 第82-83页 |
| 4.2 讨论与展望 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 附录 本文的引物列表 | 第96-99页 |
