摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
1.1 先天性免疫系统 | 第14-15页 |
1.2 TLR 的发现、结构及分布 | 第15-21页 |
1.2.1 TLR 的发现 | 第15页 |
1.2.2 TLR 的结构 | 第15-16页 |
1.2.3 TLR 的分布 | 第16-17页 |
1.2.4 TLRs 家族成员分类及配体 | 第17-19页 |
1.2.5 TLR 信号通路 | 第19-21页 |
1.3 鱼类 TLRS 研究概述 | 第21-22页 |
1.3.1 鱼类 TLRs 的种类 | 第21页 |
1.3.2 TLR22 的研究进展 | 第21-22页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第22-24页 |
第二章 大菱鲆 TLR22 基因的克隆及序列分析 | 第24-55页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 鱼、载体、菌株 | 第24页 |
2.1.2 主要实验仪器 | 第24-25页 |
2.1.3 试剂及相关溶液 | 第25-27页 |
2.2 实验方法 | 第27-36页 |
2.2.1 组织获取 | 第27页 |
2.2.2 总 RNA 提取 | 第27-28页 |
2.2.3 cDNA 第一链的制备 | 第28-29页 |
2.2.4 大菱鲆 TLR22 全长 cDNA 的克隆 | 第29-35页 |
2.2.5 大菱鲆 TLR22 基因组 DNA 的克隆 | 第35-36页 |
2.2.6 分析与构建进化树 | 第36页 |
2.3 实验结果分析 | 第36-53页 |
2.3.1 RNA 质量检测 | 第36页 |
2.3.2 cDNA 序列的克隆及测序结果 | 第36-47页 |
2.3.3 TLR22 基因组 DNA 序列的克隆及测序结果 | 第47-51页 |
2.3.4 大菱鲆 TLR22 系统进化分析 | 第51-53页 |
2.4 讨论 | 第53-55页 |
第三章 大菱鲆 TLR22 的组织分布研究 | 第55-63页 |
3.1 材料与仪器 | 第55-58页 |
3.1.1 大菱鲆 | 第55页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第55-56页 |
3.1.3 试剂及溶液 | 第56-58页 |
3.2 实验方法 | 第58-61页 |
3.2.1 组织的获取 | 第58页 |
3.2.2 总 RNA 的提取及其质量检测 | 第58-59页 |
3.2.3 cDNA 第一链的制备 | 第59页 |
3.2.4 引物的设计 | 第59-60页 |
3.2.5 qPCR 检测 | 第60-61页 |
3.2.6 数据分析 | 第61页 |
3.3 结果分析 | 第61页 |
3.4 讨论 | 第61-63页 |
第四章 大菱鲆 TLR22 基因的表达分析 | 第63-73页 |
4.1 实验材料 | 第63-66页 |
4.1.1 刺激物 | 第63页 |
4.1.2 仪器与设备 | 第63-64页 |
4.1.3 试剂及相关溶液 | 第64-65页 |
4.1.4 主要溶液及溶液的配制 | 第65-66页 |
4.2 实验方法 | 第66-69页 |
4.2.1 poly I:C、TRBIV 和 LPS 感染大菱鲆鱼体 | 第66-67页 |
4.2.2 模板的制备 | 第67-68页 |
4.2.3 cDNA 第一链的制备 | 第68页 |
4.2.4 qPCR 检测 | 第68-69页 |
4.2.5 统计学分析 | 第69页 |
4.3 实验结果 | 第69-71页 |
4.3.1 Poly I:C 感染大菱鲆后 TLR22 基因的表达 | 第69-70页 |
4.3.2 TRBIV 感染大菱鲆后 TLR22 基因的表达 | 第70-71页 |
4.3.3 LPS 感染大菱鲆后 TLR22 基因的表达 | 第71页 |
4.4 讨论 | 第71-73页 |
结论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-78页 |
致谢 | 第78-79页 |
个人简历 | 第79页 |
学术论文 | 第79-80页 |