| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 文献综述 | 第15-33页 |
| 第一章 体细胞核移植技术的研究进展 | 第15-23页 |
| ·哺乳动物胚胎细胞核移植研究进展 | 第15-16页 |
| ·体细胞核移植研究进展 | 第16-17页 |
| ·核移植程序研究 | 第17-23页 |
| ·供体细胞的选择 | 第18-19页 |
| ·受体细胞的准备和去核 | 第19-20页 |
| ·体细胞核移植 | 第20-21页 |
| ·重构胚激活 | 第21-22页 |
| ·重构胚培养与移植 | 第22-23页 |
| 第二章 体细胞核移植重编程 | 第23-33页 |
| ·DNA 甲基化及其在胚胎发育中的作用 | 第23-26页 |
| ·DNA 甲基化 | 第23-25页 |
| ·DNA 甲基化在胚胎发育中的作用 | 第25-26页 |
| ·组蛋白修饰作用 | 第26-28页 |
| ·组蛋白甲基化 | 第26-27页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第27-28页 |
| ·Ca~(2+)在卵母细胞成熟、激活及胚胎发育中的作用 | 第28-30页 |
| ·Ca~(~(2+))与卵母细胞成熟 | 第28-29页 |
| ·Ca~(2+)与卵母细胞激活 | 第29-30页 |
| ·核移植过程中核重编程的蛋白酶 | 第30-31页 |
| ·核移植重构胚中核纤层蛋白变化 | 第31页 |
| ·核移植重构胚中Oct-4 的表达 | 第31-33页 |
| 试验研究 | 第33-81页 |
| 第三章 南阳牛耳缘成纤维细胞的体外培养及其生物学特性研究 | 第33-43页 |
| ·材料和方法 | 第33-35页 |
| ·样品来源 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·主要试剂配制 | 第34-35页 |
| ·试验方法 | 第35-37页 |
| ·原代培养 | 第35-36页 |
| ·传代培养 | 第36页 |
| ·细胞冻存与复苏 | 第36页 |
| ·细胞活率计算 | 第36页 |
| ·生长曲线 | 第36页 |
| ·染色体分析 | 第36-37页 |
| ·同工酶酶谱分析 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·原代和传代细胞形态学观察 | 第37-38页 |
| ·细胞冻存前及复苏后细胞活率 | 第38页 |
| ·细胞生长的动态观察 | 第38-39页 |
| ·细胞染色体分析 | 第39页 |
| ·细胞同工酶酶谱分析 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-42页 |
| ·成纤维细胞的体外培养 | 第41页 |
| ·染色体分析 | 第41-42页 |
| ·同工酶分析 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| 第四章Ca~(2+)在牛卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程的动态变化 | 第43-58页 |
| ·试验材料 | 第43-46页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要实验仪器 | 第44页 |
| ·主要试剂配制 | 第44-46页 |
| ·试验方法和设计 | 第46-47页 |
| ·卵巢的采集 | 第46页 |
| ·卵母细胞的采集和培养 | 第46页 |
| ·成熟卵母细胞的孤雌激活及培养 | 第46页 |
| ·精子获能及体外受精 | 第46页 |
| ·卵母细胞或胚胎Ca~(2+)的测定 | 第46页 |
| ·供体细胞准备 | 第46-47页 |
| ·核移植 | 第47页 |
| ·核移植胚激活及培养 | 第47页 |
| ·试验设计及数据分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-55页 |
| ·卵母细胞发育过程中Ca~(2+)分布 | 第47-49页 |
| ·体外受精不同时间胚胎Ca~(2+)分布 | 第49-51页 |
| ·成熟卵母细胞孤雌激活后Ca~(2+)分布 | 第51-53页 |
| ·体细胞核移植重构胚发育各时期Ca~(2+)分布观察 | 第53-54页 |
| ·体外胚胎Ca~(2+)浓度对比分析 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·Ca~(2+)在卵母细胞成熟和激活过程中的作用 | 第55页 |
| ·Ca~(2+)在卵母细胞成熟过程中的分布 | 第55-56页 |
| ·Ca~(2+)浓度升高引起卵母细胞激活 | 第56页 |
| ·体外胚胎Ca~(2+)变化 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第五章 蛋白酶抑制剂MG-132 对牛核移植重构胚重编程的影响 | 第58-73页 |
| ·试验材料 | 第59-60页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要实验仪器 | 第59页 |
| ·主要试剂配制 | 第59-60页 |
| ·试验方法和设计 | 第60-61页 |
| ·卵母细胞的采集及培养 | 第60页 |
| ·成熟卵母细胞的孤雌激活 | 第60页 |
| ·供体细胞的准备 | 第60页 |
| ·核移植 | 第60页 |
| ·核移植胚激活及培养 | 第60页 |
| ·免疫组化 | 第60页 |
| ·试验设计 | 第60-61页 |
| ·数据分析 | 第61页 |
| ·结果 | 第61-69页 |
| ·不同浓度MG-132 作用于MⅠ期卵母细胞对孤雌激活胚胎发育的影响 | 第61-62页 |
| ·MG-132 作用于成熟卵母细胞后对孤雌激活胚胎发育的影响 | 第62-63页 |
| ·核移植过程中添加5 μmol/mL MG-132 重构胚发育情况 | 第63页 |
| ·Lamin A/C 在成纤维细胞和融合胚胎中的表达 | 第63-64页 |
| ·Lamin A/C 在牛孤雌激活胚胎中的表达 | 第64-66页 |
| ·Lamin A/C 在牛卵母细胞和IVF 胚胎中的表达 | 第66-67页 |
| ·Lamin A/C 在核移植重构胚中的表达 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69-72页 |
| ·MPF 在核移植过程中的作用 | 第69页 |
| ·MG-132 在体细胞核移植中的应用. | 第69-70页 |
| ·核纤层的组成和作用 | 第70-71页 |
| ·Lamin A/C 在不同物种IVF 和SCNT 过程中的表达. | 第71-72页 |
| ·小结 | 第72-73页 |
| 第六章 Oct-4 在牛核移植胚胎中的表达. | 第73-81页 |
| ·试验材料 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74页 |
| ·主要实验仪器 | 第74页 |
| ·主要试剂配制 | 第74页 |
| ·试验方法和设计 | 第74-75页 |
| ·卵母细胞的采集及培养 | 第74页 |
| ·供体细胞的准备 | 第74页 |
| ·核移植 | 第74页 |
| ·核移植胚激活及培养 | 第74页 |
| ·精子获能及体外受精 | 第74页 |
| ·免疫组化 | 第74页 |
| ·试验设计 | 第74页 |
| ·数据分析 | 第74-75页 |
| ·结果 | 第75-78页 |
| ·Oct-4 在IVF 胚胎中的表达 | 第75-76页 |
| ·Oct-4 在核移植重构胚中的表达 | 第76-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| ·Oct-4 在核移植过程中的作用 | 第78页 |
| ·Oct-4 在核移植胚胎的表达 | 第78-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 创新点 | 第82-83页 |
| 进一步研究内容 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 作者简介 | 第100页 |
