| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 猪流行性腹泻病毒 | 第10-14页 |
| 1.1.1 病毒粒子结构和理化特性 | 第10-11页 |
| 1.1.2 编码的蛋白及其功能 | 第11-12页 |
| 1.1.3 PEDV的培养特性 | 第12页 |
| 1.1.4 PED的流行 | 第12-13页 |
| 1.1.5 PEDV的遗传变异 | 第13-14页 |
| 1.1.6 致病性 | 第14页 |
| 1.2 PEDV的靶细胞 | 第14-15页 |
| 1.2.1 IPEC-J2/IPEC-1细胞 | 第14-15页 |
| 1.2.2 IECs | 第15页 |
| 1.3 PEDV诱导的免疫应答 | 第15-16页 |
| 1.3.1 全身性免疫应答 | 第15-16页 |
| 1.3.2 固有黏膜免疫应答 | 第16页 |
| 1.4 趋化因子 | 第16-17页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第17页 |
| 1.6 研究内容和技术路线 | 第17-19页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第17-19页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第19页 |
| 1.7 研究目标 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 细胞及毒株 | 第21页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第21页 |
| 2.1.3 主要试剂与试剂盒 | 第21-22页 |
| 2.1.4 流式用抗体 | 第22页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第22-25页 |
| 2.1.6 主要设备 | 第25-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-36页 |
| 2.2.1 引物合成 | 第26-28页 |
| 2.2.2 病毒培养与TCID50测定 | 第28-29页 |
| 2.2.3 FQ-PCR标准曲线的建立 | 第29-31页 |
| 2.2.4 PEDV感染仔猪回肠组织中差异表达基因的检测 | 第31-32页 |
| 2.2.5 趋化因子mRNA表达水平的FQ-PCR检测 | 第32页 |
| 2.2.6 体外PEDV感染试验最佳细胞系的筛选 | 第32-34页 |
| 2.2.7 趋化因子对仔猪外周血白细胞趋化作用的检测 | 第34-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-69页 |
| 3.1 FQ-PCR标准曲线 | 第36-39页 |
| 3.1.1 趋化因子FQ-PCR标准曲线 | 第36-39页 |
| 3.1.2 PEDVN基因FQ-PCR标准曲线 | 第39页 |
| 3.2 感染仔猪回肠组织中趋化因子差异表达基因 | 第39-46页 |
| 3.2.1 RNA的质量 | 第39-40页 |
| 3.2.2 样品主成分分析 | 第40-41页 |
| 3.2.3 火山图 | 第41页 |
| 3.2.4 GO分析 | 第41-43页 |
| 3.2.5 KEGGPathway富集分析 | 第43-45页 |
| 3.2.6 趋化因子差异基因 | 第45-46页 |
| 3.3 仔猪回肠组织中趋化因子mRNA的表达量 | 第46-49页 |
| 3.3.1 FQ-PCR检测 | 第46-48页 |
| 3.3.2 FQ-PCR检测结果与表达谱芯片检测结果对比 | 第48-49页 |
| 3.4 PEDV体外最佳感染细胞系的确定 | 第49-60页 |
| 3.4.1 病毒核酸载量 | 第49-50页 |
| 3.4.2 病毒抗原 | 第50-53页 |
| 3.4.3 TCID_(50) | 第53页 |
| 3.4.4 趋化因子mRNA的表达水平 | 第53-58页 |
| 3.4.5 感染细胞上清中的趋化因子浓度 | 第58-60页 |
| 3.5 MCP-1、CXCL9、CXCL13对白细胞的趋化作用 | 第60-69页 |
| 3.5.1 趋化因子高抑制活性siRNA | 第60-63页 |
| 3.5.2 MCP-1、CXCL9、CXCL13对仔猪外周血白细胞的趋化作用 | 第63-69页 |
| 4 讨论 | 第69-72页 |
| 4.1 PEDV感染仔猪后回肠组织中趋化因子mRNA的表达水平 | 第69页 |
| 4.2 PEDV体外感染最佳细胞系的选择 | 第69-71页 |
| 4.3 趋化因子对仔猪外周血白细胞的趋化作用 | 第71-72页 |
| 6 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 在读期间发表的学术论文与获得的研究成果 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-84页 |
| 中文详细摘要 | 第84-85页 |
