摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5页 |
第1章 文献综述 | 第9-15页 |
1.1 植物三酰甘油组装过程 | 第9-10页 |
1.2 与植物三酰甘油合成相关的基因 | 第10-13页 |
1.2.1 调控植物脂肪酸合成的主要基因 | 第10-11页 |
1.2.2 调控三酰甘油组装过程的主要基因 | 第11-13页 |
1.3 本研究的目的和意义 | 第13-15页 |
第2章 油菜二酰甘油酰基转移酶(BnDGAT3)基因克隆与生物信息学分析 | 第15-27页 |
2.1 实验材料 | 第15页 |
2.2 实验试剂 | 第15页 |
2.3 实验方法 | 第15-18页 |
2.3.1 油菜总RNA的提取 | 第15页 |
2.3.2 RNA质量检测 | 第15-16页 |
2.3.3 cDNA第一条链的合成 | 第16页 |
2.3.4 候选基因的选定与引物设计 | 第16页 |
2.3.5 目的片段的获得及测序 | 第16-18页 |
2.3.6 生物信息学分析 | 第18页 |
2.4 结果与分析 | 第18-25页 |
2.4.1 甘蓝型油菜二酰甘油酰基转移酶(BnDGAT3)基因的克隆 | 第18-19页 |
2.4.2 测序结果的同源性比对 | 第19-22页 |
2.4.3 甘蓝型油菜油菜二酰甘油酰基转移酶基因(BnDGAT3)的鉴定 | 第22-23页 |
2.4.4 对甘蓝型油菜二酰甘油酰基转移酶(BnDGAT3)进行生物信息学分析 | 第23-25页 |
2.5 小结与讨论 | 第25-27页 |
第3章 BnDGAT3基因在酵母中的表达研究 | 第27-35页 |
3.1 实验材料 | 第27页 |
3.2 试剂与仪器 | 第27页 |
3.3 方法 | 第27-30页 |
3.3.1 目的片段的T1质粒提取 | 第27-28页 |
3.3.2 引物设计 | 第28页 |
3.3.3 目的片段的纯化回收 | 第28-29页 |
3.3.4 目的片段与pyes2.0载体的双酶切及连接 | 第29页 |
3.3.5 质粒转化大肠杆菌 | 第29页 |
3.3.6 重组子PCR鉴定 | 第29页 |
3.3.7 酵母转化 | 第29-30页 |
3.3.8 酵母脂肪酸组分检测 | 第30页 |
3.4 结果分析 | 第30-33页 |
3.4.1 酵母表达载体构建 | 第30-32页 |
3.4.2 酵母转化 | 第32页 |
3.4.3 酵母脂肪酸组分测定 | 第32-33页 |
3.5 小结与讨论 | 第33-35页 |
第4章 BnDGAT3基因在拟南芥中的表达研究 | 第35-42页 |
4.1 实验材料 | 第35页 |
4.2 试剂与仪器 | 第35-36页 |
4.3 方法 | 第36-38页 |
4.3.1 材料准备 | 第36页 |
4.3.2 植物表达载体构建 | 第36-37页 |
4.3.3 转大肠杆菌 | 第37页 |
4.3.4 重组子PCR鉴定 | 第37页 |
4.3.5 农杆菌转化 | 第37-38页 |
4.3.6 拟南芥花序侵染 | 第38页 |
4.3.7 脂肪酸成分分析 | 第38页 |
4.4 结果与分析 | 第38-41页 |
4.4.1 重组质粒与农杆菌转化子PCR检测 | 第38-39页 |
4.4.2 拟南芥抗性苗筛选 | 第39页 |
4.4.3 抗性苗PCR检测 | 第39-40页 |
4.4.4 拟南芥种子脂肪酸组分测定 | 第40-41页 |
4.5 小结与讨论 | 第41-42页 |
第5章 油菜中BnDGAT3基因的表达研究及油菜种子品质分析 | 第42-48页 |
5.1 实验材料 | 第42页 |
5.2 试剂与仪器 | 第42页 |
5.3 方法 | 第42-44页 |
5.3.1 表达研究 | 第42-43页 |
5.3.2 油菜种子品种分析 | 第43-44页 |
5.4 结果与分析 | 第44-46页 |
5.4.1 BnDGAT3基因在甘蓝型油菜不同组织中的相对表达分析 | 第44页 |
5.4.2 BnDGAT3基因在甘蓝型油菜种子不同时期的表达 | 第44-45页 |
5.4.3 BnDGAT3基因在甘蓝型油菜角果皮不同发育时期的表达 | 第45页 |
5.4.4 油菜种子品质分析 | 第45-46页 |
5.5 小结与讨论 | 第46-48页 |
第6章 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
附录 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |